【正文】 1IU（ 第二次以 1IU） 。 重量折算單位：即以特定的純抗生素的某一重量為 1個(gè)國際單位 （ IU） ，此時(shí) 1181。 即部分抗生素是以特定的純抗生素鹽類的重量作為效價(jià)單位 ， 如純金霉素鹽酸鹽 ， 四環(huán)素鹽酸鹽 （ 包括無活性的鹽酸根在內(nèi) ） 1181。實(shí)際取量時(shí) ， 應(yīng)根據(jù)制劑所標(biāo)示的效價(jià) ， 將藥品稀釋定容 ， 換算成體積量取 。 即 1mg鏈霉素的活性部分 （ 1000181。抗生素劑量總是按其有效部分而標(biāo)示的單位或重量計(jì)量的 。 ⑷ 劑量的確定 確定劑量時(shí)應(yīng)注意兩個(gè)方面的問題 ， 一個(gè)是藥物的效價(jià) ，一個(gè)是原藥與成鹽制劑的差別 。 如果高低兩種劑量的試驗(yàn)結(jié)果所得到的動力學(xué)參數(shù)有顯著性差異 ， 則提示該藥物在高劑量時(shí)存在非線性藥物動力學(xué)特征 。 ⑶ 藥物劑量的選擇 可根據(jù)藥物的毒性指標(biāo)和臨床藥效試驗(yàn)結(jié)果估計(jì)確定 ， 一般選擇高低兩種劑量 。 肌內(nèi)注射劑溶液的 pH值最好控制在 49之間 。 特別是制成注射劑時(shí) ，應(yīng)嚴(yán)格按照注射劑的制劑標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行配制 。 （ 三 ） 試驗(yàn)藥品與給藥 試驗(yàn)藥品 ⑴ 試驗(yàn)藥品要選擇正規(guī)產(chǎn)品 ， 制劑的批號要在法定的有效期限內(nèi) 。 因?yàn)?， 飽腹與空腹對藥物在體內(nèi)的過程特別是藥物的吸收影響很大 。 在一個(gè)試驗(yàn)中 ， 各個(gè)試驗(yàn)動物的禁食時(shí)間必須一致 。 因此 ， 飼料中不應(yīng)該含有其他藥物 ， 特別是與所試藥品歸屬于同類的藥物 。 飼料標(biāo)準(zhǔn)：藥物在動物體內(nèi)的過程受著各種因素的影響 。 水溫低時(shí) ，藥物在體內(nèi)的代謝與水溫高時(shí)有顯著的差別 。 冬天時(shí)注意給動物保暖 ， 夏天注意給動物降溫 。因此對動物飼養(yǎng)環(huán)境的一般要求如下： 家畜或家禽的試驗(yàn)環(huán)境以室溫為宜 。在獸醫(yī)藥物動力學(xué)研究中，要探討某種藥物某一途徑給藥后的藥物動力學(xué)特征，一般要求樣本數(shù)為，大動物（馬、牛、水牛、駱駝、鹿等） 57頭，中等動物（豬、綿羊、山羊等） 68頭；小動物（犬、貓、禽類、兔等） 812頭 (只 )。 保證實(shí)驗(yàn)期間飼料及飼養(yǎng)條件的恒定性 。 如建立豬胸膜性肺炎病理模型 ， 要求對動物的年齡 ， 發(fā)病環(huán)境 ， 接種菌量作嚴(yán)格的限制 ， 甚至對某些生理生化指標(biāo)也要求作定量和定性標(biāo)準(zhǔn)判定 。 所建立的動物病理模型的條件必須有可重復(fù)性 。為了驗(yàn)證動物是否屬臨床健康 ， 必要時(shí)可進(jìn)行肝腎功能的化驗(yàn) 。 除了特別要研究某一性別動物的動力學(xué)特征外 ， 一般要雌雄兼用 ， 在某一藥物的試驗(yàn)中 ， 動物的品種必須保持一致 ， 不得將奶牛和黃牛作為一個(gè)總體來進(jìn)行研究 。 即牛用藥物直接用牛作試驗(yàn) ， 雞用藥物直接用雞作試驗(yàn) ， 用于兩種或兩種以上的動物的藥物 ， 應(yīng)分別在各種動物身上進(jìn)行試驗(yàn) 。如果所研究的是屬于抗球蟲作用的藥物 ， 則通常要選擇禽類 、兔等易感染球蟲病的動物品種 ， 很少選擇成年豬作為抗球蟲藥的藥物動力學(xué)研究試驗(yàn)動物 。 （ 一 ） 實(shí)驗(yàn)動物 藥物在動物體內(nèi)的處置狀態(tài)表現(xiàn)有明顯的種屬 、 生理病理和年齡差異性等 ， 因此在選擇動物時(shí)應(yīng)注意如下幾點(diǎn)： 所選擇的動物品種應(yīng)該是某一藥品對該動物某種疾病有使用意義 。 無論是專業(yè)設(shè)計(jì)還是統(tǒng)計(jì)學(xué)設(shè)計(jì)都必須遵循現(xiàn)代自然科學(xué)試驗(yàn)的三大基本原則 ， 即隨機(jī)原則 ， 對照原則與重復(fù)原則 。第九章 藥物動力學(xué)試驗(yàn)設(shè)計(jì)與統(tǒng)計(jì)分析 藥物動力學(xué)屬于自然科學(xué)的范疇 ， 是一門理論與實(shí)驗(yàn)性極強(qiáng)的科學(xué) 。 藥物動力學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括專業(yè)設(shè)計(jì)和統(tǒng)計(jì)學(xué)設(shè)計(jì)兩個(gè)方面 。 第一節(jié) 藥物動力學(xué)試驗(yàn)設(shè)計(jì) 一 、 藥物動力學(xué)試驗(yàn)專業(yè)設(shè)計(jì) 專業(yè)試驗(yàn)設(shè)計(jì)通常包括實(shí)驗(yàn)動物的選擇 、 實(shí)驗(yàn)環(huán)境因素的確定 、 試驗(yàn)藥品 、 給藥 、 采樣與血藥濃度的分析測定 。 例如要研究某種抗菌藥物的藥動學(xué)特征 ， 通常可以選擇大多數(shù)動物品種 ， 因?yàn)槎喾N動物都可能感染上細(xì)菌性的疾病 。 獸醫(yī)藥物動力學(xué)試驗(yàn)一般是直接選擇靶動物進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 。 選擇的動物應(yīng)為臨床健康的成年動物 。 過幼 、 過老 、 瘦弱或過肥的動物盡量不用 。 為了探討某種藥物在疾病狀態(tài)下的藥物動力學(xué)特征 ， 必須建立特定的病理模型 。 其病理指標(biāo)要盡可能做到一致性 。 無論是哪一種途徑給藥 ， 在做正式試驗(yàn)之前 ， 要求將實(shí)驗(yàn)動物置于給定的試驗(yàn)條件下馴養(yǎng) 37天 。 試驗(yàn)動物的數(shù)量：從統(tǒng)計(jì)學(xué)角度分析，當(dāng)然動物的數(shù)量越多越好，因?yàn)?n越大，試驗(yàn)的隨機(jī)誤差就越小。 （ 二 ） 實(shí)驗(yàn)環(huán)境 動物所處環(huán)境不同 ， 其藥物在體內(nèi)的吸收或消除也不同 。 禁止在過熱或過冷的溫度條件下進(jìn)行動力學(xué)試驗(yàn) 。 溫度對變溫水生動物魚類的代謝影響十分明顯 。 因此 ， 在以水生動物作試驗(yàn)對象時(shí) ， 應(yīng)注意確定試驗(yàn)的環(huán)境溫度及其水溫 ， 在試驗(yàn)報(bào)告中應(yīng)注明所進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的溫度條件 。特別是藥物間的相互作用 。 在進(jìn)行內(nèi)服給藥試驗(yàn)時(shí) ， 或進(jìn)行藥物的生物利用度試驗(yàn)時(shí) ， 通常在給藥前給動物禁食 812小時(shí) 。 整個(gè)試驗(yàn)期間 ， 應(yīng)充分保證動物的飲水條件 ， 即做到飲水自由 。 整個(gè)試驗(yàn)期間 ， 應(yīng)充分保證動物的飲水條件 ， 即做到飲水自由 。 ⑵ 在進(jìn)行新藥的藥物動力學(xué)研究時(shí) ， 對原料藥必須首先經(jīng)過一定的制劑工藝流程制成一定的制劑 。 包括附加劑的選擇如pH調(diào)節(jié)劑 ， 滲透壓調(diào)節(jié)劑 ， 抗氧劑 ， 金屬離子結(jié)合劑 。 制劑必須做到無菌無熱原 。 高劑量應(yīng)為動物的最大耐受量 ， 低劑量應(yīng)為臨床使用的中等劑量或常用劑量 。 如磺胺類藥物在動物體內(nèi)經(jīng)常表現(xiàn)為非線性動力學(xué)過程 ， 高劑量時(shí) ， 藥物呈現(xiàn)零級動力學(xué)消除 ， 低劑量時(shí)呈現(xiàn)一級動力學(xué)消除 。 抗生素的效價(jià)換算必須清楚 。 如獸藥典規(guī)定注射用硫酸鏈霉素 10mg， 此處 10mg絕非稱重硫酸鏈霉素 10mg， 而是指相當(dāng)于 10mg鏈霉素生物活性部分的硫酸鏈霉素 。g） 相當(dāng)于 1000國際單位 。 抗生素有時(shí)以類似重量單位表示其效價(jià) 。g=1IU。g（ 抗生素或者其鹽 ） ≠ 1IU。 又如純多粘菌素B堿 1181。 特定單位：即以特定的抗生素樣品的某一重量作為一定單位 。 制霉菌素等的單位也屬于特定單位 ， 以 1963年制定的第一個(gè)國際標(biāo)準(zhǔn)品 （ 本身并非純品 ）作為基準(zhǔn) ， 每稱重 1mg定為 3000IU。 ② 個(gè)別品種由于用藥習(xí)慣 ， 目前仍用 IU表示 ， 如芐青霉素 。 如制霉菌素 。 如苯唑青霉素鈉片 。 問應(yīng)稱取原料多少毫克 ？ 稱重 = 抗生素總單位數(shù) /效價(jià) = 1000000IU/653IU/mg = 在劑量的確定時(shí) ， 還應(yīng)注明是藥物的堿基或酸基成分還是成鹽成分 。 諾氟沙星有諾氟沙星原粉 （ 堿基部分 ） 和乳酸諾氟沙星 （ 成鹽成分 ） 。 給藥： 獸醫(yī)藥物動力學(xué)試驗(yàn)研究中 ， 其給藥途徑通常包括靜脈給藥 ， 內(nèi)服給藥 、 肌內(nèi)注射 ， 皮下注射 ， 腹腔注射 ， 栓劑直腸給藥以及皮膚給藥 （ 透皮劑 ） 等 ?？焖凫o脈注射可用英文 Bolus Injection表示， “ Bolus”實(shí)意為 “ 大丸藥 ”。容易理解，要將液體藥物注射到血液中形成 “ 液丸 ” ，其注射速度越快越好。 最好在 30秒鐘內(nèi)注射完畢 。 所以要求快速靜注動力學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí) ， 給藥注射時(shí)間至多在 1分鐘之內(nèi)注射完畢 。 從血藥濃度 — 時(shí)間曲線圖可知 ， 如果是快速靜注 ， 則建立藥動學(xué)模型時(shí) ， 解其動力學(xué)微分方程的初始條件總是假定 t = 0時(shí) C = Co， 因此 ， 注射給藥的延遲對藥物動力學(xué)參數(shù)初始血藥濃度的確定有很大影響 。 并作恒速靜脈輸注 ， 中間的輸液速度不能改變 ， 以便于模型的建立與確定 。 特別要注意藥液的酸堿度 ， 避免藥液對用藥局部的刺激性 。 對于家禽內(nèi)服給藥 ， 通常是通過導(dǎo)管將藥物投入嗉囊中 。 注意將投藥導(dǎo)管用水清洗 （ 小體積注射用水 ） 后 ， 將清洗液投入到體內(nèi) ， 以保證用藥劑量的準(zhǔn)確性 。 盡可能不使用麻醉藥品或其他藥物用于動物的保定 ， 以免干擾試藥的體內(nèi)過程 。 有時(shí)也同時(shí)收集尿液作為樣品 ， 臨床藥物動力學(xué)也可以唾液作為樣品 。一般說來靜脈給藥無吸收過程，在開始時(shí)，采血間隔時(shí)間要短，采血次數(shù)較多，這樣才能將藥物在體內(nèi)的變化過程基本反映出來。 如磺胺類藥物采到 10μ g/ml即可 。為了模型的擬合方便，在峰值血藥濃度前至少采血三次，為了反映藥物吸收達(dá)到的最大血藥濃度，盡可能在峰時(shí)左右多采集 12點(diǎn)的血樣。 通常的采血時(shí)間是在給藥后 5分鐘， 15分鐘， 30分鐘， 45分鐘， 1小時(shí)， 2小時(shí)， 3小時(shí)， 4小時(shí)， 5小時(shí)， 6小時(shí)， 8小時(shí)， 12小時(shí)， 16小時(shí)，24小時(shí) …… 等時(shí)刻點(diǎn)。同樣，采血時(shí)間應(yīng)一直延續(xù)到有效血藥濃度以下，然后再繼續(xù)采 12個(gè)血樣。 通常在設(shè)計(jì)采樣時(shí)間時(shí) ， 應(yīng)在正式試驗(yàn)前作預(yù)備試驗(yàn) ， 根據(jù)預(yù)試的結(jié)果確定正式試驗(yàn)采樣方案 。 30秒。 )( 112121 ttttCCCCff ?????采樣量：在藥物動力學(xué)研究中，原則上是采血樣的量是愈少愈好。實(shí)際中，可根據(jù)檢測方法的靈敏度確定所需樣品的量。實(shí)測兩次，求取平均值，留一份備用。但對于小動物來說，采血量的多少就必須嚴(yán)格控制。即體重為 1kg的動物的全血量約為 5070ml。 因此對于禽類的采血量每次應(yīng)控制在 。 樣品的處理及保存： 血樣包括全血 、 血漿和血清三種形式 。 無論是全血 、 血漿和血清樣品在制取時(shí)均應(yīng)避免溶血反應(yīng) 。 對于激素類或易發(fā)生生物降解的藥物 ， 盡可能及時(shí)測定 。 抗凝劑通常有肝素 ， 草酸鹽 、 枸櫞酸鈉等 ， 但最好選用肝素 ， 因?yàn)楦嗡乇旧硎茄褐械某煞?， 其抗凝效果好 ， 用量低 ， 不會干擾血藥濃度的測定 。 抗凝劑的用法與用量： 肝素：常用其鈉鹽 ， 每 1ml血液加肝素約 （ 注： 1mg肝素相當(dāng)120130國際單位 ） ， 防止血液凝固 。 為體外生化檢驗(yàn)的抗凝劑 。 由于量太少 ， 使用時(shí) ， 可將草酸鉀配成 10%水溶液 ， 按抗凝劑量加于采血管中 ， 在 50℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)干燥備用 。 值得注意的是草酸根具有較強(qiáng)的還原性 ， 易受氧化還原影響的藥物不得用本品抗凝 。 枸櫞酸鈉：每 1ml血液加枸櫞酸鈉 ， 使用時(shí)與草酸鉀一樣 ， 將枸櫞酸鈉配成 25%的水溶液 ， 按抗凝劑量加于采血管中 ，在 45℃ 溫度條件下干燥備用 。 乙二胺四乙酸 （ EDTA） ：常用其二鈉鹽 （ EDTANa2） ：每 ml血液加本品 。 由于藥物在血液中分布可能不均勻，所以無論是全血、血漿還是血液，制備時(shí)都必須防止發(fā)生溶血。 在實(shí)踐中防止溶血應(yīng)該做到：采血針頭與試管必須干燥潔凈；抗凝劑應(yīng)按量添加到采血管中，并在干燥后使用；采血時(shí)注意輕輕轉(zhuǎn)動試管讓血液與抗凝劑混合，不得用力振搖；分離血漿或血清時(shí)，離心速度不得過快，以 1500r/min轉(zhuǎn)速即可。 如不能很快檢驗(yàn) ， 抗凝血應(yīng)放在 4℃ 冰箱保存 。 尿藥的測定可用于藥物劑量的回收、藥物腎清除率及代謝物類型的研究。測定尿藥濃度比測定血藥濃度相對來說要麻煩。因此，實(shí)驗(yàn)時(shí)，既要測定尿液的體積（排尿量），又要測定其中藥物或代謝物的含量。 若需收集 24小時(shí)或更長時(shí)間的尿液或不能立即測定時(shí) ， 則將尿液置于 4℃ 冰箱保存 。 放置時(shí)間較長則需要冷凍貯存 。 而血清 、 血漿和尿樣及其他組織樣不能立即測定時(shí)則必須進(jìn)行冷凍貯存 ， 冷凍溫度一般在 20℃ 以下 。 常用冷凍劑的配方有 : ⑴ NaCl: 冰塊 （ 33:100） ， 最低冷凍溫度為 21℃ ； ⑵ NH4Cl：冰塊 （ 25:100） ， 最低冷凍溫度為 15℃ ； ⑶ CaCl 6H2O：冰塊 （ 20:100） ， 最低冷凍溫度為 4℃ ； ⑷ NH4Cl： NaCl: 冰塊 （ 20:40:100） ， 最低冷凍溫度為 30℃ ； ⑸ 氯仿 +固體 CO2， 最低冷凍溫度為 77℃ ⑹ 酒精 +固體 CO2， 最低冷凍溫度為 72℃ 冷凍樣品測定時(shí) ， 要求解凍后樣品一次性測定完畢 。 因?yàn)闃悠吩诮?