凝膠層析法測定蛋白質相對分子質量-展示頁
2025-05-25 16:54本頁面
【正文】 如果假定蛋白質分子近于球形，同時沒有顯著的水合作用，則不同大小分子量的蛋白質，在洗脫時峰的位置和該物質相對分子質量有直接的定量的關系。若分子大小介于上述完全排阻或完全滲入凝膠的物質，則居二者之間從柱中流出。當含有分子大小不一的蛋白質混合物樣品加到用此類凝膠顆粒裝填而成的層析柱上時，這些物質即隨洗脫液的流動而發(fā)生移動。該法設備簡單、操作方便、重復性好、樣品回收率高。 實驗原理 ? 凝膠層析法也稱分子篩層析法，是利用具有一定孔徑大小的多孔凝膠作固定相的層析技術。凝膠層析法測定蛋白質相對分子質量 實驗目的 ? 掌握凝膠層析的基本原理。 ? 學習利用凝膠層析法測定蛋白質相對分子質量的實驗技能。當混合物隨流動相經過凝膠層析柱時，其中各組分按其分子大小不同而被分離的技術。 ? 凝膠是一種不帶電的具有三維空間的多孔網狀結構、呈珠狀顆粒的物質，每個顆粒的細微結構及篩孔的直徑均勻一致，像篩子，小的分子可以進入凝膠網孔，而大的分子則排阻于顆粒之外。大分子物質沿凝膠顆粒間隙隨洗脫液移動，流程短，移動速率快，先被洗出層析柱；而小分子物質可通過凝膠網孔進入顆粒內部，然后再擴散出來，故流程長，移動速度慢，最后被洗出層
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