20xx年醫(yī)學(xué)專題—第四章-細(xì)胞破碎-文庫(kù)吧資料
2024-11-16 00:59本頁(yè)面
【正文】 36。 在工業(yè)規(guī)模的細(xì)胞破碎中，對(duì)于酵母等難破碎的及濃度高或處于生長(zhǎng)靜止期的細(xì)胞，常采用多次循環(huán)的操作方法。,高壓(gāoyā)勻漿法使用時(shí)注意事項(xiàng),高壓勻漿器的操作溫度上升約２３℃/10MPa為了控制溫度的升高(shēnɡ ɡāo)，可在進(jìn)口處用干冰調(diào)節(jié)溫度，使出口溫度調(diào)節(jié)在20℃左右。,高壓勻漿(y,44,第四十四頁(yè)，共六十八頁(yè)。bāo)在這一系列高速運(yùn)動(dòng)過(guò)程中經(jīng)歷了高速剪切、碰撞及壓力驟降，造成細(xì)胞(x236。bāo)懸浮液自高壓室針形閥噴出時(shí)，每秒速度高達(dá)幾百米，高速噴出的漿液又射到靜止的撞擊環(huán)上，被迫改變方向從出口管流出。,1. 勻漿(y)破碎法又可分為 勻漿法（homogenization） 珠磨法（bead grinding） 超聲波破碎法（ultrasonication）,43,第四十三頁(yè)，共六十八頁(yè)。,二 機(jī)械(jīxi232。,能分解細(xì)胞壁中的磷脂，使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞，胞內(nèi)物質(zhì)被釋放出來(lái)。還有，表面活性劑的表面張力是常數(shù)，表面活性的選擇電極可以(kěyǐ)突然改變。圖4.32表示了該表面活性增溶的原理。,40,第四十頁(yè)，共六十八頁(yè)。同樣，這種清潔劑既有親水基團(tuán)又有疏水基團(tuán)。經(jīng)濟(jì)價(jià)值不明確，市場(chǎng)(sh236。,39,第三十九頁(yè)，共六十八頁(yè)。它有一個(gè)長(zhǎng)烷烴鏈（十六烷基）和三個(gè)甲基，都連接在一個(gè)帶正電的氮原子上，負(fù)離子通常是鹵素，市場(chǎng)上常做洗發(fā)劑出售。o)是烷基胺鹽。,38,第三十八頁(yè)，共六十八頁(yè)。nɡ y242。硫酸鹽可連在苯環(huán)上，結(jié)構(gòu)如圖4.21所示。nɡ y242。,可通過(guò)將肥皂的羧基用硫酸鹽代替來(lái)改變傳統(tǒng)肥皂的缺點(diǎn)。在硬水中，由于Ca2+與羧酸基團(tuán)形成不可溶的沉淀，而使肥皂失效。,36,第三十六頁(yè)，共六十八頁(yè)。n jī)磺酸鈉）是典型的陰離子表面活性劑。,無(wú)論表面活性劑是陰離子、陽(yáng)離子還是非離子型，都是兩性的。,34,第三十四頁(yè)，共六十八頁(yè)。結(jié)構(gòu)中有一個(gè)親水基團(tuán)，通常是離子；一個(gè)疏水基團(tuán)，通常是烴基。,方法有效在于表面活性劑的化學(xué)性質(zhì)，化學(xué)性質(zhì)由圖4.31所示的化學(xué)結(jié)構(gòu)表示(biǎosh236。ngch233。 非離子型如Triton X100和吐溫（Tween）等 對(duì)疏水性物質(zhì)具有很強(qiáng)的親和力，能結(jié)合并溶解磷脂，破壞內(nèi)膜的磷脂雙分子層，使某些胞內(nèi)物質(zhì)釋放出來(lái)。,細(xì)胞破碎常用的表面(biǎomi224。n)活性劑能將細(xì)胞壁破碎，制成的懸浮液可用離心分離除去細(xì)胞碎片，再用吸附柱或萃取劑分離制得產(chǎn)品。n)活性劑加入到細(xì)胞中。n)活性劑的增溶法。,優(yōu)點(diǎn),31,第三十一頁(yè)，共六十八頁(yè)。xu233。,通用性差； 時(shí)間長(zhǎng)，效率(xi224。 由此可見(jiàn)滲透壓必須很大，才導(dǎo)致了細(xì)胞的破碎。我們可以采用等式4.23 估算出滲透壓的大小。,由該方程知細(xì)胞內(nèi)壓力必須(b236。i)范特苛夫定律。且x1很小時(shí)就有：,28,第二十八頁(yè)，共六十八頁(yè)。0H20——標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)電勢(shì) VH2o——水的偏摩爾體積 x1——細(xì)胞內(nèi)所有溶質(zhì)的總摩爾(m243。0 H20+VH2oPin+RT ln(1x1) (4.32),27,第二十七頁(yè)，共六十八頁(yè)。對(duì)于理想(lǐxiǎng)的不可壓縮溶液，這些修正相和式（4.21）可改寫為： 181。H20 (inside) (4.31),26,第二十六頁(yè)，共六十八頁(yè)?？梢?kěyǐ)通過(guò)化學(xué)平衡來(lái)估算，水的化學(xué)電勢(shì)是常數(shù)，即： 181。,25,第二十五頁(yè)，共六十八頁(yè)。,1）滲透壓沖擊(chōngjī)法,滲透壓沖擊是較溫和的一種(yī zhǒnɡ)破碎方法， 將細(xì)胞放在高滲透壓的溶液中（如一定濃度的甘油或蔗糖溶液），由于滲透壓的作用，細(xì)胞內(nèi)水分便向外滲出，細(xì)胞發(fā)生收縮，當(dāng)達(dá)到平衡后，將介質(zhì)快速稀釋，或?qū)⒓?xì)胞轉(zhuǎn)入水或緩沖液中，由于滲透壓的突然變化，胞外的水迅速滲入胞內(nèi)，引起細(xì)胞快速膨脹而破裂。 成本低，反應(yīng)激烈，不具選擇性。,堿能溶解細(xì)胞壁上脂類物質(zhì)或使某些組分從細(xì)胞內(nèi)滲漏出來(lái)(chū l225。堿加入細(xì)胞懸浮液中后和細(xì)胞壁進(jìn)行了多種反應(yīng)，包括使磷脂皂化。,堿處理法和酶消化(xiāohu224。nɡ)的酶) 產(chǎn)物抑制的存在。nɡ)菌種需選擇不同(b249。) 能選擇性地釋放產(chǎn)物 胞內(nèi)核酸等泄出量少，細(xì)胞外形較完整,缺點(diǎn)： 溶酶價(jià)格高， 溶酶法通用性差（不同(b249。,21,第二十一頁(yè)，共六十八頁(yè)。)細(xì)胞壁的組分主要是纖維素、葡聚糖、幾丁質(zhì)等，常用蝸牛酶、纖維素酶、多糖酶等。 放線菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)類似于革蘭氏陽(yáng)性菌，以肽聚糖為主要成分，所以也能采用溶菌酶， 酵母和真菌由于(y243。革蘭氏陽(yáng)性菌懸浮液中加入溶菌酶，很快就產(chǎn)生溶壁現(xiàn)象。ijiā)酶法,酶解法的特點(diǎn)是專一性強(qiáng)，因此在選擇酶系統(tǒng)時(shí)，必須根據(jù)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成來(lái)選擇。,20,第二十頁(yè)，共六十八頁(yè)。 對(duì)酵母(ji22
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