生物12基因工程的基本操作程序ppt(新人教版選修3)-文庫(kù)吧資料
2025-03-03 19:20本頁(yè)面
【正文】 入細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng) A．①② B．②③ C．③④ D．①④ C 5. 下列屬于基因工程中導(dǎo)入目的基因方法的是 ①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ②基因槍法 ③花粉管道法 ④顯微注射法 ⑤胚胎移植 ⑥ DNA分子雜交法 A．①②③④⑤⑥ B．①②③④⑤ C．①②③④ D．①③④⑤⑥ C (四 )目的基因的檢測(cè)與鑒定 檢測(cè) ①導(dǎo)入檢測(cè)：目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 方法 —— DNA分子雜交 ②表達(dá)檢測(cè) 轉(zhuǎn)錄檢測(cè) —— 分子雜交 翻譯檢測(cè) —— 抗原抗體 雜交 分子檢測(cè)法 鑒定 抗蟲鑒定 抗病鑒定 活性鑒定等 個(gè)體水平的鑒定 知識(shí)延伸 —— DNA分子雜交技術(shù) 該方法是根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，把互補(bǔ)的雙鏈DNA解開，把單股的 DNA小片段用同位素、熒光分子或化學(xué)發(fā)光催化劑等進(jìn)行標(biāo)記，之后同被檢測(cè)的 DNA中的同源互補(bǔ)序列雜交，從而檢出所要查明的 DNA或基因。 （ 3）花粉通道法 植物花粉在柱頭上萌發(fā)后，花粉管要穿過花柱直通胚囊。 ? 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的原理 借鑒 細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞 的途徑。必須構(gòu)建上述元件的主要理由是： （ 1） 生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用 受體生物自身基因的啟動(dòng)子才能比較有利于基因的表達(dá)； （ 2） 通過 cDNA文庫(kù)獲得的目的基因沒有啟動(dòng)子，只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中無(wú)法轉(zhuǎn)錄； （ 3） 目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記； （ 4） 為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，往往還要增加一些其他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等； （ 5） 有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么部位，往往要加上可以標(biāo)識(shí)存在部位的基因（或做成目的基因與標(biāo)識(shí)基因的融合基因），如綠色熒光蛋白基因等。 （ 3）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的 ______處，再加入適量 ___________，形成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 限制酶 黏性末端 同一種限制酶 的黏性末端 切口 DNA連接酶 相同 : 質(zhì)粒 目的基因 限制酶處理 一個(gè)切口 兩個(gè)黏性末端 兩個(gè)切口 獲得目的基因 DNA連接酶 表達(dá)載體 同種 : 基因表達(dá)載體的作用 a、使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代 b、同時(shí)使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用 思考： 作為基因工程表達(dá)載體，只需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎？為什么？ 不可以。 編碼蛋白質(zhì) 核苷酸 染色體 轉(zhuǎn)錄 表達(dá) 體外 核苷酸 引物 人工合成 二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 核心 （ 1）用一定的 _________切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出 ____________。（ 2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，該技術(shù)是一項(xiàng)在 ________完成的核酸合成技術(shù)，前提條件是有一段已知目的基因的________序列，以便于合成 _________。 PCR技術(shù) ? 原理： ? 前提： ? 原料 ? 方式 PCR擴(kuò)增儀 DNA復(fù)制 一段已知目的基因的核苷酸序列 ：以 _____方式擴(kuò)增， 即 ____（ n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)） 指數(shù) 2n 模板 DNA； DNA引物；四種脫氧核苷酸；熱穩(wěn)定 DNA聚合酶（ Taq酶）；離子 ? 過程 變性、退火、延伸三步曲 ?變性： 加熱至 90～ 95℃雙鏈 DNA
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1