生化工程,第二章酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)-文庫吧資料
2025-02-21 23:57本頁面
【正文】 enoted the instance without substrate inhibition.Similarly, at high substrate concentration, the curve in doublereciprocal plot is in hyperbolic mode.Plots on Substrate Inhibitions56產(chǎn)物抑制產(chǎn)物抑制 (product inhibitions)EESEPPS PE + S+P[ES] E + P[EP]Km’KPk+257With similar equations and derivations as before, 58各種抑制的比較各種抑制的比較? 參見 戚以政， 《 生物反應(yīng)工程 》 ，第19頁，表 23和圖 211。E + S+I[ES] + IE + P[EI]+S [ESI]Km’Km’KIKI47With similar equations and derivations as before, Where . we can get,48The effect of nonpetitive inhibitions is a reductionin with same MichaelisMenten constant.High substrate concentration would not overe nonpetitive inhibitions. Other reagents need to be added to block binding of it to the enzyme.Plots on Nonpetitive Inhibitions49反競(jìng)爭(zhēng)性抑制反競(jìng)爭(zhēng)性抑制 (Unpetitive Inhibitions)SEI+ E S E SIX P這種抑制劑僅能與 ES復(fù)合物 結(jié)合，而與 游離酶 不能直接結(jié)合。抑制劑與酶的結(jié)合并不妨礙酶再與底物結(jié)合，但所形成：酶 — 底物 — 抑制劑復(fù)合物 42這種抑制劑僅能與 ES復(fù)合物 結(jié)合，而與 游離酶 不能直接結(jié)合反競(jìng)爭(zhēng)性抑制 ： 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑只結(jié)合到 ES復(fù)合物。?許多抗代謝的 抗癌藥 物如 5氟尿嘧啶和 6巰基嘌呤幾乎都是酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。 40競(jìng)爭(zhēng)性抑制 ： 競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑往往和底物在結(jié)構(gòu)上相似 ? 丙二酸（ HOOC— CH2— COOH）抑制 琥珀酸脫氫酶 催化的琥珀酸（HOOC— CH2— CH2— COOH）脫氫作用。 可逆抑制 和 不可逆抑制 (如鉛和汞等重金屬 )【 可逆抑制 】 (reversible inhibition)：抑制劑與酶以 非共價(jià)鍵結(jié)合而引起酶活力降低或喪失，能用物理方法除去抑制劑而使酶復(fù)性，這種抑制作用是可逆的，稱為可逆抑制。如因別構(gòu)導(dǎo)致酶活性降低的物質(zhì)稱為負(fù)效應(yīng)物。失活 與 抑制 【 失活 】 (inactivation)：由于酶蛋白分子 變性 而引起的酶活力喪失的現(xiàn)象稱為失活。遺傳算法 (不依賴于初值，可并行計(jì)算 )34LB雙倒數(shù)法雙倒數(shù)法? 將米氏方程式兩側(cè)取雙倒數(shù)，得到下列方程式：? 以 作圖 ,得到一直線? 缺點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)點(diǎn)過分集中在直線的左下方，影響Km和 Vmax的準(zhǔn)確測(cè)定。積分法l非線性最小二乘法回歸處理252。HW法252。31問問 題題為什么說低 Km值意味著酶與底物的結(jié)合力強(qiáng)？考慮一下 Km的定義：為什么只有初始反應(yīng)速率可以使用？，酶的活力可能會(huì)失活的活性e.…….32實(shí)驗(yàn)測(cè)定實(shí)驗(yàn)測(cè)定 MichaelisMenten動(dòng)力學(xué)參數(shù)動(dòng)力學(xué)參數(shù)根據(jù)已知的 [S0] 和 [E0], 能計(jì)算出初始的反應(yīng)速率 :33動(dòng)力學(xué)參數(shù)的求解動(dòng)力學(xué)參數(shù)的求解l作圖法 (通過方程變換，將方程線性化 )252。 催化可逆反應(yīng)的酶，對(duì)正逆兩向底物的 Km值往往是不同的，例如谷氨酸脫氫酶， NAD+的 Km值為 105mol/L，而 NADH為 105 mol/L。例如 :當(dāng) [S]=3 Km時(shí)，代入米氏方程后可求得v=216。216。216。216。但底物種類、反應(yīng)溫度、 pH和離子強(qiáng)度等因素會(huì)影響 Km值。216。Mixed order with respect to S27反應(yīng)速率、底物濃度與時(shí)間的關(guān)系反應(yīng)速率、底物濃度與時(shí)間的關(guān)系S, E28底物濃度與反應(yīng)速率的關(guān)系底物濃度與反應(yīng)速率的關(guān)系底物濃度反應(yīng)速率Vm29反應(yīng)速率、底物濃度與時(shí)間的關(guān)系反應(yīng)速率、底物濃度與時(shí)間的關(guān)系反應(yīng)速率反應(yīng)時(shí)間底物濃度反應(yīng)時(shí)間30米氏常數(shù)米氏常數(shù) Km的意義的意義216。當(dāng) k+2k1時(shí)， Km=KS這意味著生成產(chǎn)物的速率遠(yuǎn)遠(yuǎn)慢于 [ES]復(fù)合物解離的速率。22Experimental data demonstrated the concentration profiles.當(dāng)反應(yīng)系統(tǒng)中 [ES]的生成速率與分解速率相等時(shí)， [ES]濃度保持不變的狀態(tài)稱為穩(wěn)態(tài)。3. 在反應(yīng)的初始階段，產(chǎn)物濃度很低， P+E→ES 這個(gè)可逆反應(yīng)的速率極小，可以忽略不計(jì)。當(dāng)反應(yīng)初始時(shí)刻，底物 [S][E],幾乎所有的酶都與底物結(jié)合成復(fù)合物 [ES]，因此 [E0]≈[ES],反應(yīng)速率最大，此時(shí)產(chǎn)物的最大合成速率為：21＋k+1
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1