3植物組織培養(yǎng)技術(shù)[1]-文庫(kù)吧資料
2025-01-19 01:58本頁(yè)面
【正文】 超凈工作臺(tái) 數(shù)碼顯微鏡 數(shù)碼顯微鏡又叫視頻顯微鏡，它是將顯微鏡看到的實(shí)物圖像通過數(shù)模轉(zhuǎn)換，使其成像在顯微鏡自帶的屏幕上或計(jì)算機(jī)上。有機(jī)物質(zhì)和鐵鹽溶液配好以后要裝入棕色瓶放入電冰箱內(nèi)保存，其它兩種種母液可在常溫下保存但最多不能超過一個(gè)月； pH值對(duì)培養(yǎng)基的硬度有影響， pH過高培養(yǎng)基變硬， pH過低培養(yǎng)基不能凝固，所以要調(diào)整好培養(yǎng)基的 pH值； 材料脫毒時(shí)不要在酒精中停留過長(zhǎng)時(shí)間，以免材料被殺死。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄，因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。 思考：在整個(gè)操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)無菌環(huán) 境的？ 組織培養(yǎng) 原理 過程 意義 利用植物細(xì)胞的全能性 快速繁殖，培育無毒植株，培育作物新品種 根芽 植物體 離體植物器官、組織或細(xì)胞 (脫分化 ) 愈傷組織 (再分化 ) 植物組織培養(yǎng)小結(jié) : 操作條件 含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的 PH、適時(shí)光照等 ? 練習(xí) ? ：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。 移栽：去凈培養(yǎng)基，可先在滅過菌的珍珠巖或蛭石上培養(yǎng)使根系發(fā)達(dá)再轉(zhuǎn)移到土壤中。胡蘿卜無光才長(zhǎng)得好。2周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長(zhǎng)出乳白色或黃白色的瘤狀愈傷組織。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。 （ 3）接種 常用滅菌劑使用濃度及效果比較表 植物組織培養(yǎng)消毒與接種示意圖 接種注意事項(xiàng) ①每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為 75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種 ②外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，一般胡蘿卜 3－4塊，菊的莖或葉 6－ 8塊，也不要太少，以充分利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分和光照條件 ③插入時(shí)應(yīng)注意方向，不要倒插。 ②放入 70﹪ 酒精中搖動(dòng) 2~3次 ,持續(xù) 6~7秒 ,無菌水沖洗 2~3次，用無菌吸水紙吸干 。 ③培養(yǎng)基的分裝 注：由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此 不必添加植物激素 滅菌 分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行 高壓蒸汽滅菌 植物組培具體操作步驟 （ 1）取材： 取菊花生長(zhǎng)旺盛的嫩枝 (外植體不能太小，否則會(huì)影響愈傷組織的形成 )。(母液配制見下表 ) （ 2） MS（ 1000mL） 培養(yǎng)基的配制 : 按比例分別取適量各種成分的母液，加入燒杯，稱取蔗糖 30g，瓊脂 7g，加水并加熱使瓊脂溶解，按照需要的濃度分別加入激素，用1mol/L NaOH和 1mol/L HCl溶液調(diào)節(jié) pH至~。與微生物的培養(yǎng)不同， MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須
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