華中科技大學(xué)發(fā)酵工程第二章工業(yè)用微生物菌種-文庫(kù)吧資料
2025-01-02 14:40本頁(yè)面
【正文】 生物合成途徑，以獲得高產(chǎn)的新產(chǎn)品 發(fā)酵工業(yè)菌種改良方法 ? 常規(guī)育種 (誘變育種 ) ? 細(xì)胞工程育種 ? 基于代謝調(diào)節(jié)的育種技術(shù) ? 基因工程育種 ? 蛋白質(zhì)工程育種 ? 代謝工程育種 賴氨酸生產(chǎn)菌種的選育改良思路 ? 出發(fā)菌株 ：黃色短桿菌、谷氨酸棒桿菌、乳糖發(fā)酵短桿菌 ? 育種思路 —— 滲漏缺陷型的選育 —— 營(yíng)養(yǎng)缺陷型的選育：高絲氨酸缺陷型 ： AEC ： Leu 、 抗 Leu結(jié)構(gòu)類似物、 喹啉 s 、 苯醌 s ： Ala、抗 Asp結(jié)構(gòu)類似物 選育適宜的 CO2固定酶 /TCA循環(huán)酶活性比突變株 7. 選育溫度敏感突變株 8. 應(yīng)用細(xì)胞工程和基因工程育種 選育適宜的 CO2固定酶 /TCA循環(huán)酶活性比突變株 賴氨酸合成中間代謝有以下兩條途徑： ① 通過(guò) TCA循環(huán) 葡萄糖 丙酮酸 草酰乙酸 天冬氨酸 賴氨酸 ② 通過(guò)磷酸烯醇丙酮酸羧化反應(yīng) 葡萄糖 磷酸烯醇 草酰乙酸 天冬氨酸 式丙酮酸 丙酮酸 賴氨酸 代謝工程的定義 ? 利用多基因重組技術(shù)有目的地對(duì)細(xì)胞代謝途徑進(jìn)行修飾、改造，改變細(xì)胞特性，并與細(xì)胞基因調(diào)控、代謝調(diào)控及生化工程相結(jié)合，為實(shí)現(xiàn)構(gòu)建新的代謝途徑，生產(chǎn)特定目的產(chǎn)物而發(fā)展起來(lái)的一個(gè)新的學(xué)科領(lǐng)域。 抗生素產(chǎn)生菌的篩選 ? 篩選模型： 試驗(yàn)菌 ? 篩選方法： 鋪菌法 復(fù)印平板法 ?液體培養(yǎng)篩選 ?抗藥性 篩選 篩選模型： 氨芐青霉素 和 β 內(nèi)酰胺酶 產(chǎn)生菌 （ 克雷白氏菌 ） 協(xié)同 I II 無(wú)試樣時(shí) （ 不含棒酸時(shí) ） ， I對(duì) II菌作用不大 有試樣時(shí) （ 含棒酸時(shí) ） ， I對(duì) II菌恢復(fù)藥效 ， 棒酸抑制水解酶活性 ? 固體培養(yǎng)篩選 試驗(yàn)菌 代表微生物類型 金黃色葡萄球菌 209p 革蘭氏陽(yáng)性球菌 枯草桿菌 6633 革蘭氏陽(yáng)性桿菌 大腸桿菌 革蘭氏陰性腸道細(xì)菌 恥垢分枝桿菌 607 結(jié)核桿菌 白色念珠菌 酵母狀真菌 青霉菌 絲狀真菌 藥理活性化合物產(chǎn)生菌的篩選 ? 藥理活性化合物是指能抑制人類代謝中某一個(gè)關(guān)鍵酶的微生物產(chǎn)物即酶抑制劑 ， 從而達(dá)到治療的目的 。 ? 技術(shù) 關(guān)鍵：產(chǎn)物合成條件的選擇與控制及相應(yīng)篩選方法的確定。 ? 從保藏機(jī)構(gòu)獲取菌種進(jìn)行分離篩選有兩個(gè)好處： 經(jīng)濟(jì)性 指導(dǎo)性 設(shè)計(jì)篩選方案時(shí)必須考慮兩個(gè)要點(diǎn) ?選擇性 ?靈敏度 3. 新種分離與篩選的步驟 調(diào)查研究 （ 包括資料查閱 ）
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