華中科技大學(xué)發(fā)酵工程第二章工業(yè)用微生物菌種(更新版)
【正文】 sp結(jié)構(gòu)類似物 選育適宜的 CO2固定酶 /TCA循環(huán)酶活性比突變株 7. 選育溫度敏感突變株 8. 應(yīng)用細(xì)胞工程和基因工程育種 選育適宜的 CO2固定酶 /TCA循環(huán)酶活性比突變株 賴氨酸合成中間代謝有以下兩條途徑： ① 通過(guò) TCA循環(huán) 葡萄糖 丙酮酸 草酰乙酸 天冬氨酸 賴氨酸 ② 通過(guò)磷酸烯醇丙酮酸羧化反應(yīng) 葡萄糖 磷酸烯醇 草酰乙酸 天冬氨酸 式丙酮酸 丙酮酸 賴氨酸 代謝工程的定義 ? 利用多基因重組技術(shù)有目的地對(duì)細(xì)胞代謝途徑進(jìn)行修飾、改造，改變細(xì)胞特性，并與細(xì)胞基因調(diào)控、代謝調(diào)控及生化工程相結(jié)合，為實(shí)現(xiàn)構(gòu)建新的代謝途徑，生產(chǎn)特定目的產(chǎn)物而發(fā)展起來(lái)的一個(gè)新的學(xué)科領(lǐng)域。 ? 分離純化同時(shí)富于篩選條件，一步得出所需菌株。 （二）分離篩選原理與技術(shù) 1. 篩選的指導(dǎo)思想 2. 分離篩選工作在實(shí)際中應(yīng)用的幾個(gè)方面 3. 新種分離篩選原理與技術(shù) 1. 篩選的兩種指導(dǎo)思想 ? 先分離純化，再結(jié)合工藝要求進(jìn)行篩選。 ? 篩選模型：目標(biāo)酶 生長(zhǎng)因子產(chǎn)生菌的篩選 ? 篩選模型：營(yíng)養(yǎng)缺陷型試驗(yàn)菌 ? 篩選方法：利用被分離的微生物產(chǎn)物能否促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)缺陷型試驗(yàn)菌生長(zhǎng) 氨基酸產(chǎn)生菌的篩選 樣品 預(yù)處理 初篩 （ 除真菌 ） 在分離平板上生長(zhǎng)獲得多個(gè)單菌落 復(fù)印平板 （ copy 法 ） 平板培養(yǎng) ， 其中有產(chǎn)生氨基酸 的菌落分泌氨基酸 對(duì)應(yīng)到 copy前相應(yīng) 位置 ， 找到目的菌落 再鋪上一層含營(yíng)養(yǎng)缺陷型試驗(yàn)菌的瓊脂 培養(yǎng)后 產(chǎn)氨基酸菌落周圍有生長(zhǎng)圈 目的菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)， 對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行定量測(cè)定 篩選產(chǎn)物含量高的菌株 多糖產(chǎn)生菌的篩選 ? 取樣特點(diǎn)：碳水化合物工業(yè)的廢棄物 ? 篩選方案：從菌落外觀判斷，選擇外觀呈粘液狀的菌落，然后根據(jù)液體培養(yǎng)測(cè)定多糖含量來(lái)篩選高產(chǎn)菌。 代謝工程 發(fā)展基礎(chǔ) ? 相依網(wǎng)絡(luò) ：代謝網(wǎng)絡(luò)中各主節(jié)點(diǎn)集中于產(chǎn)物 ， 為了避免中間物的過(guò)量積累 ， 各分支的代謝流都必須保持平衡 ， 各分支的分流相等 ， 各節(jié)點(diǎn)的重要性相同 。 本章小結(jié) ? 掌握微生物分離篩選的基本概念、基本原理與基本技術(shù) ? 掌握菌種改良的基本技術(shù)與方法 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAIT
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