【正文】 病毒 諾瓦科病毒（ Norwalk virus） ? 1972年首次發(fā)現(xiàn)。 致病性弧菌的檢測方法 以上介紹的方法均是以單一或少數(shù)目標菌（ NMKL為四種）為目的的設計的程序。 （ 3） ISO方法 副溶血弧菌的檢測方法（ ISO8914： 1990E） （ 4） NMKL 食品中致病性弧菌的檢測和計數(shù)（ NMKL N0156）介紹了霍亂弧菌、副溶血弧菌、創(chuàng)傷弧菌、溶藻弧菌的檢測程序。 致病性弧菌的檢測方法 具有代表性檢驗方法簡介 （ 1） FDA的細菌學分析手冊 霍亂、付弧、創(chuàng)傷弧菌和其他弧菌（ 1995 1998修訂）分別著重介紹了霍亂弧菌、副溶血弧菌、創(chuàng)傷弧菌的方法。 霍亂弧菌的檢測方法 ? 生物學檢測方法，作霍亂弧菌 O1+O139多價血清凝集試驗（水、食品）。 ? 由霍亂弧菌 E1 Tor生物型引起的癥狀較輕，病程也短。 ? 與霍亂有關的食品主要是海產(chǎn)品、有殼的水生動物和甲殼動物，主要有魚、蝦、貝類、甲魚、牛蛙、蟹等。該病傳播快 , 波及面廣，是屬于國際檢疫的傳染病。在這 12種致病菌種，最重要的，也是問題最多的是 O1型霍亂弧菌、非 O1型霍亂弧菌、副溶血性弧菌和創(chuàng)傷弧菌。 ? 歐美國家：肉類食品、罐頭食品； ? 日本等沿海國家：進食水產(chǎn)品； ? 我國內(nèi)地：進食發(fā)酵食品（如臭豆腐、豆瓣醬、豆豉等）。根據(jù)抗原特異性，可分為 A、 B、 C、 D、 E、 F、 G七個型別。該毒素性質(zhì)穩(wěn)定，是目前已知化學毒物和生物毒素中毒性最強烈者，對人的致死劑量為 0. 1ug。 肉毒梭菌 ? 肉毒梭菌是嚴重食物中毒的病原菌之一，在厭氧的環(huán)境下能產(chǎn)生強烈的外毒素。它們能同編碼腸毒素有關的基因序列雜交，這類探針能檢測腸毒素 A、 B、 C和 E。 ② 美國 3M公司，利用耐熱核酸酶特性，設計出紙片法，能在 24h快速檢測出金黃色葡萄球菌。 1 ℃ ， 2 4 h 3 6 ℃ 177。 1 ℃ ， 2 4 h 3 6 ℃ 177?？蓱?8個型的凝固酶抗血清進行分型試驗，用來研究葡萄球菌的流行病學情況。血漿凝固酶具有抗原性，可分為 8型。腸毒素是一種可溶性蛋白質(zhì)純化的腸毒素，能耐高溫。 ? 金黃色葡萄球菌某些菌株能產(chǎn)生一種能引起急性腸胃炎的腸毒素，當這些菌株污染了食物，在溫度條件適宜時，即可產(chǎn)生相當數(shù)量的腸毒素，根據(jù)腸毒素的血清型別不同，分為 A、 B、C、 D、 E五型。產(chǎn)生葡萄球菌腸毒素的還可引起食物中毒。它的致病力的強弱與其產(chǎn)生的毒素及酶類有關。 此方法只在臨床檢測中應用，尚未用于食品檢測。靶順序為 rRNA。 ③ 熒光酶標試劑盒 檢測彎曲桿菌的探針是用非放射性物質(zhì)標記的。發(fā)光儀讀數(shù)大于或等于 CUTOFF值的為陽性，低于 CUTOFF值的為陰性。選擇試劑將未雜交和雜交探針分開。 檢驗方法 （ 1）常規(guī)方法 檢 樣改 良 C a m p B A P 布 氏 桿 菌 培 養(yǎng) 基直 接 相 差 鏡 檢過 氧 化 氫酶 試 驗氧 化 酶試 驗動 力 試 驗革 蘭 氏 染 色血 瓊 脂 平 板4 2 ℃ ， 4 8 h ， 微 需 氧1 ％ 甘 氨酸 試 驗硫 化 氫試 驗3 . 5 ％ 氯 化鈉 試 驗生 長 溫度 試 驗馬 尿 酸試 驗硝 酸 鹽 還原 試 驗奈 啶 酸試 驗T T C 試 驗血 清 分 型生 物 分 型報 告（ 2）現(xiàn)代檢驗技術 ① 基因探針法 核酸雜交試驗是以互補核酸鏈能夠特異性結合并形成穩(wěn)定的雙鏈復合物為基礎。 ? 彎曲菌以病原菌和共生菌廣泛存在于動物中，家禽家畜是主要的貯存宿主和傳染源，在傳染或帶菌動物的腸道和生殖道內(nèi)容物中含有大量的彎曲菌。 ⑤ 血清學多價鞭毛（ H）試驗 ⑥血清學多價菌體（ O）試驗 ⑦ 菌體（ O）群試驗 ⑧ 鞭毛（ H）試驗陰性培養(yǎng)物的誘導 （ 3）結果判定 彎曲菌 ? 彎曲菌是一組人畜共患的病原微生物，能引起人的腹瀉和食物中毒，在國外已被廣泛的重視，同時也被公認為新發(fā)現(xiàn)的病原菌之一。 ④ 純培養(yǎng)物 將每個可疑陽性的 TSI瓊脂斜面培養(yǎng)物，分別接種于尿素肉湯中， 35℃ 培養(yǎng) 24h，獲取多量的瓊脂斜面培養(yǎng)物接種于快速尿素肉湯中，于 37℃ 水浴培養(yǎng) 2h。 在 TSI瓊脂中，典型的沙門氏菌培養(yǎng)物可使斜面呈堿色（紅色），底層呈酸色（黃色），產(chǎn)生 H2S（瓊脂變?yōu)楹谏┗虿划a(chǎn)生 H2S。 ? 選擇性增菌 ? 選擇性平板分離 混勻培養(yǎng)物，用直徑 3mm的接種環(huán)， 1滿環(huán)（ 10ul）分別劃線接種于亞硫酸鉍（ BS）瓊脂、木糖賴氨酸去氧膽酸鹽（ XLD）瓊脂和HEKTONE氏腸道菌（ HE）瓊脂平板上，于 35℃培養(yǎng) 24h后，根據(jù)沙門氏菌在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征挑取典型或可疑菌落。 ⑤ 血清學技術鑒定培養(yǎng)物菌種 。 ③ 選擇性平板分離： 采用固體選擇培養(yǎng)基，抑制非沙門氏菌的生長，提供肉眼可見的疑似沙門氏菌純菌落的識別。 檢測方法 從食品中分離和鑒定沙門氏菌，當前通常采用的方法共分5個步驟： ① 前增菌： 食品樣品在含有營養(yǎng)的非選擇性培養(yǎng)基中增菌，使受損傷的沙門氏菌細胞恢復到穩(wěn)定的生理狀態(tài)。 ? 帶殼蛋類 在流水下用刷子刷洗蛋類，并瀝干。 檢樣處理 ? 冷凍的檢樣 在檢樣前最好不要解凍，將沙門氏菌的損傷降低到最低限度。因其加工方式不同，導致性狀各異。 （ 4）慢性腸炎 沙門氏桿菌可引起慢性、持久性腸炎。病程較短，一般 2~4d, 可完全恢復。 （ 2）食物中毒 沙門氏菌屬引起的食物中毒，主要以腸炎桿菌、鼠傷寒桿菌、豬霍亂桿菌、丙型副傷寒桿菌和湯普遜桿菌等最為多見。根據(jù)侵入機體沙門氏菌菌種的不同，在臨床上引起四種不同的疾病?？纱嬖诙喾N食物中，包括生肉、禽、蛋、奶制品、蝦、魚和田雞腿等。 ? 沙門氏菌不產(chǎn)生外毒素，但能產(chǎn)生毒力較強的內(nèi)毒素。它屬于革蘭氏陰性桿菌。因此，沙門氏菌的檢測是各國檢驗機構對多種進出口食品的必檢項目之一。 沙門氏菌屬（ Salmonella) ?沙門氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。 ?GeneTARK研制出用浸染棒檢測大腸桿菌中16SrRNA的探針，樣品需前增菌處理，以異硫氰熒光素（ FITC）標記探針，再用辣根過氧化物酶標記抗 FITC抗體檢測雜交復合物。查 MPN表，報告每 ml(g)樣品中大腸菌群的 MPN值。 2h，觀察是否產(chǎn)氣。 ? 證實試驗：將產(chǎn)氣管培養(yǎng)物接種煌綠乳糖膽鹽（ BGLB）肉湯管中， 36177。 1℃ 培養(yǎng) 48177。本方法采用兩步法： ? 推測試驗：樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管 LST肉湯。 ? 報告：根據(jù)證實為大腸桿菌陽