免疫學檢測法匯總-文庫吧資料
2025-06-30 16:56本頁面
【正文】 法，根據(jù)需要特異地消除帶某種抗原的細胞?！ ?．補體介導的細胞毒試驗各種有核細胞與針對其表面抗原的抗體相遇，所形成的免疫復合物能活化反應中的補體，引起細胞膜穿孔，在一定時間內(nèi)，細胞仍能維持一定的形態(tài)不破碎，加入水溶性染如伊紅Y（eosin Y）或臺盼藍（trypan blue）后，染料即可進入被活化補體穿孔的細胞，不帶相應抗原細胞膜保持完整的活細胞不著色?！ ?．溶血反應 抗體與紅細胞表面抗原相遇，形成紅細胞抗體復合物即可使加入反應中的補體活化，導致紅細胞溶解，此方法可用于紅細胞的各種抗原或相應抗體的檢測，此法比凝集反應敏感。也就是經(jīng)抗Ig的作用提高凝集反應的靈敏度。因抗Rh抗體是IgG只有兩個結合價，分子較?。ú蝗鏘gM結合價多，分子大）很難直接引起Rh+紅細胞凝集。 3．抗球蛋白試驗 抗球蛋白試驗（antiglobulin test,coombs test）的原理為間接凝集試驗。也可以將抗體吸附到乳膠顆粒上檢查臨床標本中的抗原，如細菌或真菌性腦膜炎抗體包被的乳顆粒，一旦與含有相應抗原的腦脊液混合，便可發(fā)生凝集，可進行快速診斷?！ ?．間接凝集 間接凝集（indirect agglutination）是用可溶性抗原包被在乳膠顆?；蚣t細胞表面，與相應抗體混合出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。可用于傳染病診斷如肥達氏反應（Widal reaction）診斷傷寒病。 圖204 用免疫印跡法檢查血清中的HIV病毒抗體第一步：經(jīng)電泳將HIV混合抗合抗原按分子量大小分離；第二步：將已分離的抗原經(jīng)電印跡轉移到硝酸纖維膜上；第三步：將待檢病人血清加入覆蓋于硝酸纖維膜上；第四步：加入標記的第二抗體使之覆蓋膜上；第五步：加入顯色底物（或放射自顯影）顯現(xiàn)第二抗體 ?。ǘ┠磻 〖毦?、紅細胞或表面帶有抗原的乳膠顆粒等都是不溶性的顆粒抗原，當與相應抗體結合，抗原與抗體結合形成凝集團塊，即稱為凝集反應（agglutination）。如果病人血清中含有與一種或幾種抗原相對應的抗體的話，則在該抗原印跡部位形成免疫復合物沉淀。第一步，為電泳分離HIV抗原，在電場中根據(jù)分子量大小不同病毒抗原各成分散開。對于免疫球蛋白缺損或增多的疾病的診斷或鑒別診斷有重要意義（圖203）。然后在適當?shù)奈恢蒙涎仉娪痉较蛲谝恢本€形槽，于槽內(nèi)加入含有針對各種抗原混合抗體液，讓各抗原成分與相應抗體進行雙向免疫擴散，可形成多答卷沉淀線?！ ?．免疫電泳 免疫電泳(immunoelectrophoresis)的方法分成兩個步驟，即先進行電泳，再進行瓊脂擴散。將瓊脂板放入電泳槽內(nèi)，使瓊脂板的兩孔沿著電場的方向，于負極側的孔內(nèi)加入抗原，于正極側的孔內(nèi)加入抗體，通電后，抗原帶負電荷向正極泳動，抗體分子雖也帶負電荷，但因分子量大，向正極的位移小，而受瓊脂中電滲作用向負極移動，抗原和抗體能較快地集中在兩孔之間的瓊脂中形成免疫復合物的沉淀線。當抗原和抗體向四周凝膠中擴散，在兩孔間可出現(xiàn)2～3條沉淀線，本法常用于抗原或抗體的定性或定量檢測，或用于兩種抗原材料的抗原相關性分析（圖202）。本法敏感、快速簡便，可取代單向擴散法定量測定免疫球蛋白的濃度。本方法簡便，易于觀察結果，可測定抗原的靈敏度（最低濃度）約為10～20μg/ml，常用于定量測定人或動物血清IgG、IgM、IgA和C3等，其缺點是需1～2天才能看結果（圖201）圖201 單向免疫擴散試驗示意圖 3．免疫比濁法 當抗體濃度高，加入少量可溶性抗原，即可形成一些肉眼看不見的小免疫復合物，它可使通過液體的光束發(fā)生散射，隨著加入抗原增多，形成的免疫復合物也增多，光散射現(xiàn)象也相應加強。將抗體混入加熱溶解的瓊脂中，傾注于玻片上，制成含有抗體的瓊脂板，在適當位置打孔，將抗原材料加入瓊脂板的小孔內(nèi)，讓抗原從小孔向四周的瓊脂中擴散，與瓊脂中的抗體相遇形成免疫復合物。將稀釋的含有可溶
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