【正文】 了兩個(gè)四肽和有利的Lys，說(shuō)明十肽中含Lys…或Arg…LysLys…或ArgLys…Lys…ArgLys…四種可能的肽段，且水解位置在4與5與6或4與8與9與10之間； （3）梭菌蛋白酶專一裂解Arg殘基的羧基端肽鍵，處理該十肽后，產(chǎn)生一個(gè)四肽和一個(gè)六肽，則可知該十肽第四位為Arg； （4）溴化氰只斷裂由Met殘基的羧基參加形成的肽鍵，處理該十肽后產(chǎn)生一個(gè)八肽和一個(gè)二肽，說(shuō)明該十肽第八位或第二位為Met；用單字母表示二肽為NP，即AsnPro，故該十肽第八位為Met； （5）胰凝乳蛋白酶斷裂Phe、Trp和Tyr等疏水氨基酸殘基的羧基端肽鍵，處理該十肽后，產(chǎn)生兩個(gè)三肽和一個(gè)四肽，說(shuō)明該十肽第三位、第六位或第七位為T(mén)rp或Phe； （6）一輪Edman降解分析N末端，根據(jù)其反應(yīng)規(guī)律，可得N末端氨基酸殘疾結(jié)構(gòu)式為：NHCH(CH2OH)C(=O)，還原為NHCH(CH2OH)COOH，可知此為Ser； 結(jié)合（1）、（2）、（3）、（4）、（5）、（6）可知該十肽的氨基酸序列為：SerGluTyrArgLysLysPheMetAsnPro一個(gè)四肽，經(jīng)胰蛋白酶水解得兩個(gè)片段，一個(gè)片段在280nm附近有強(qiáng)的光吸收，并且Pauly反應(yīng)和坂口反應(yīng)（檢測(cè)胍基的）呈陽(yáng)性。綜合（1）、（2）、（3）、（4）可得結(jié)果。試指出在該天然多肽中二硫鍵的位置。試問(wèn)此七肽的一級(jí)結(jié)構(gòu)怎樣？[它是一個(gè)環(huán)肽，序列為：PheSerAlaTyrLysProArg]解：（1）此肽未經(jīng)糜蛋白酶處理時(shí)，與FDNB反應(yīng)不產(chǎn)生αDNP氨基酸，說(shuō)明此肽不含游離末端NH2，即此肽為一環(huán)肽； （2）糜蛋白酶斷裂Phe、Trp和Tyr等疏水氨基酸殘基的羧基端肽鍵，由已知兩肽段氨基酸組成（Ala、Tyr、Ser和Pro、Phe、Lys、Arg）可得：( )( )Tyr和( )( )( )Phe； （3）由（2）得的兩肽段分別與FDNB反應(yīng)，分別產(chǎn)生DNPSer和DNPLys可知該兩肽段的N末端分別為Ser和Lys，結(jié)合（2）可得：SerAlaTyr和Lys( )( )Phe； （4）胰蛋白酶專一斷裂Arg或Lys殘基的羧基參與形成的肽鍵，由題生成的兩肽段氨基酸組成（Arg、Pro和Phe、Tyr、Lys、Ser、Ala）可得：ProArg和( )( )( )( )Lys； 綜合（2）、（3）、（4）可得此肽一級(jí)結(jié)構(gòu)為：LysProArgPheSerAlaTyr三肽Lys Lys Lys的pI值必定大于它的任何一個(gè)個(gè)別基團(tuán)的pKa值，這種說(shuō)法是否正確？為什么？[正確，因?yàn)榇巳奶幱诘入婞c(diǎn)時(shí)，七解離集團(tuán)所處的狀態(tài)是C末端COO（pKa=），N末端NH2（pKa≌），3個(gè)側(cè)鏈3（1/3ε NH3+）（pKa=）,因此pI最大的pKa值（）]一個(gè)多肽可還原為兩個(gè)肽段，它們的序列如下：鏈1為AlaCysPheProLysArgTrpCysArg ArgValCys；鏈2為CysTyrCysPheCys。這兩個(gè)肽段分別與FDNB反應(yīng)，可分別產(chǎn)生DNPSer和DNPLys。此肽未經(jīng)糜蛋白酶處理時(shí)，與FDNB反應(yīng)不產(chǎn)生αDNP氨基酸。由題，得到的一條肽（Asp、Ala、Tyr）結(jié)合（3）、（4）可得該肽的氨基酸序列為：AsnAlaTyrGluLysHisGlnVal某多肽的氨基酸序列如下：GluValLysAsnCysPheArgTrpAspLeuGlySerLeuGlu AlaThrCysArgHisMetAspGlnCysTyrProGlyGlu_GluLys。問(wèn)A肽的氨基酸序列如何？[AsnAlaTyrGluLysHisGlnVal]解：N末端分析：FDNB法得：Asp； C末端分析：羧肽酶法得：Val； 胰蛋白酶只斷裂賴氨酸或精氨酸殘基的羧基形成的肽鍵，得到的是以Arg和Lys為C末端殘基的肽斷。如果我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中將A肽用胰蛋白酶降解時(shí)，得到兩種肽，其中一種（Lys、Asp、Glu、Ala、Tyr），凈電荷為零，另一種（His、Glu以及Val）可給除DNPHis，帶正電荷。習(xí)題，含10種氨基酸，并假設(shè)每種氨基酸在該蛋白質(zhì)分子中的數(shù)目相等，問(wèn)這種蛋白質(zhì)有多少種可能的排列順序？[10100]解：1012000/120=10100 有一個(gè)A肽，經(jīng)酸解分析得知為L(zhǎng)ys、His、Asp、GluAla以及Val、Tyr和兩個(gè)NH3分子組成。近二、三十年發(fā)展起來(lái)的固相肽合成是控制合成技術(shù)上的一個(gè)巨大進(jìn)步，它對(duì)分子生物學(xué)和基因工程也就具有重要影響和意義。血纖蛋白蛋白原在凝血酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)檠宓鞍啄龎K（血塊的主要成分）。血液凝固是涉及氨基酸序列斷裂的一系列酶原被激活的結(jié)果，酶促激活的級(jí)聯(lián)放大，使血凝塊迅速形成成為可能。同源蛋白質(zhì)具有共同的進(jìn)化起源。同源蛋白質(zhì)具有明顯的序列相似性(稱序列同源),兩個(gè)物種的同源蛋白質(zhì)，其序列間的氨基酸差異數(shù)目與這些物種間的系統(tǒng)發(fā)生差異是成比例的。序列分析中的重要方法和技術(shù)有：測(cè)定N末端基的苯異硫氰酸酯（PITC）法，分析C末端基的羧肽酶法，用于多肽鏈局部斷裂的酶裂解和CNBr化學(xué)裂解，斷裂二硫橋的巰基乙醇處理，測(cè)定肽段氨基酸序列的Edman化學(xué)降解和電噴射串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，重建多肽鏈一級(jí)序列的重疊肽拼湊法以及用于二硫橋定位的對(duì)角線電泳等。小肽晶體的熔點(diǎn)都很高，這說(shuō)明短肽的晶體是離子晶格、在水溶液中也是以偶極離子存在的。多肽鏈或蛋白質(zhì)當(dāng)發(fā)生部分水解時(shí)，可形成長(zhǎng)短不一的肽段。蛋白質(zhì)的生物功能決定于它的高級(jí)結(jié)構(gòu)，高級(jí)結(jié)構(gòu)是由一級(jí)結(jié)構(gòu)即氨基酸序列決定的，二氨基酸序列是由遺傳物質(zhì)DNA的核苷酸序列規(guī)定的。一級(jí)結(jié)構(gòu)就是共價(jià)主鏈的氨基酸序列，有時(shí)也稱化學(xué)結(jié)構(gòu)。此外還可按蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能分類。蛋白質(zhì)分為兩大類：?jiǎn)渭兊鞍踪|(zhì)和綴合蛋白質(zhì)。多肽鏈?zhǔn)怯砂被嵬ㄟ^(guò)肽鍵共價(jià)連接而成的，各種多肽鏈都有自己特定的氨基酸序列。因此氨基酸的洗出順序大體上是酸性氨基酸、中性氨基酸，最后是堿性氨基酸，由于氨基酸和樹(shù)脂之間還存在疏水相互作用，所以其洗脫順序?yàn)椋篈sp, Thr, Gly, Leu, Lys。 (6)Tyr, Ala, Ser, His.[Ile lys；Phe, Ser；Leu Val Ala,；Val Pro；GluAsp；Tyr AlaSer≌His]解：根據(jù)P151 圖325可得結(jié)果。 (2)Phe, Ser (3)Ala, Val, Leu。利用在溶劑A和B之間的逆流分溶方法將甘氨酸和苯丙氨酸分開(kāi)。[[a]=+]1標(biāo)出異亮氨酸的4個(gè)光學(xué)異構(gòu)體的（R，S）構(gòu)型名稱。1L亮氨酸溶液（）在20cm旋光管中測(cè)得的旋光度為+。問(wèn)起始溶液中丙氨酸的含量為多少克？[]（mol/L）。[pI:。[]解：pH = pKa + lg2/3 pKa = pH = + = ：(a)亮氨酸鹽酸鹽；(b)亮氨酸鈉鹽；(c)等電亮氨酸。[見(jiàn)表31]表31 氨基酸的簡(jiǎn)寫(xiě)符號(hào)名稱三字母符號(hào)單字母符號(hào)名稱三字母符號(hào)單字母符號(hào)丙氨酸(alanine)AlaA亮氨酸(leucine)LeuL精氨酸(arginine)ArgR賴氨酸(lysine)LysK天冬酰氨(asparagines)AsnN甲硫氨酸(蛋氨酸)(methionine)Met M天冬氨酸(aspartic acid)AspD苯丙氨酸(phenylalanine)PheF半胱氨酸(cysteine)CysC脯氨酸(praline)ProP谷氨酰氨(glutamine)GlnQ絲氨酸(serine)SerS谷氨酸(glutamic acid)GluE蘇氨酸(threonine)ThrT甘氨酸(glycine)GlyG色氨酸(tryptophan)TrpW組氨酸(histidine)HisH酪氨酸(tyrosine)TyrY異亮氨酸(isoleucine)IleI纈氨酸(valine)ValVAsn和/或AspAsxBGln和/或GluGlsZ計(jì)算賴氨酸的εαNH3+20%被解離時(shí)的溶液PH。常用方法有離子交換柱層析、高效液相層析（HPLC）等。核磁共振（NMR）波譜技術(shù)在氨基酸和蛋白質(zhì)的化學(xué)表征方面起重要作用。比旋是α氨基酸的物理常數(shù)之一，它是鑒別各種氨基酸的一種根據(jù)。這幾個(gè)反應(yīng)在氨基酸荷蛋白質(zhì)化學(xué)中占有重要地位。胱氨酸中的二硫鍵可用氧化劑（如過(guò)甲酸）或還原劑（如巰基乙醇）斷裂。所有的α氨基酸都能與茚三酮發(fā)生顏色反應(yīng)。在這中間的某一pH（因不同氨基酸而異），氨基酸以等電的兼性離子（H3N+CHRCOO）狀態(tài)存在。氨基酸是兩性電解質(zhì)。此外還有若干種氨基酸在某些蛋白質(zhì)中存在，但它們都是在蛋白質(zhì)生物合成后由相應(yīng)是基本氨基酸（殘基）經(jīng)化學(xué)修飾而成。但堿水解得到的氨基酸是D型和L型的消旋混合物。第三章 氨基酸提要α氨基酸是蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子，當(dāng)用酸、堿或蛋白酶水解蛋白質(zhì)時(shí)可獲得它們。問(wèn)該脂蛋白中載脂蛋白和脂質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)是多少？[%載脂蛋白，%脂質(zhì)]解：設(shè)載脂蛋白的體積分?jǐn)?shù)是x,+(1－x)=,解得x=于是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為()/[ +(1－)]=14．一種低密度脂蛋白(LDL含apoB 100(M為500000)和總膽固醇（假設(shè)平均Mr為590)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為25%和50%。請(qǐng)按圖215所求椅式構(gòu)象畫(huà)出膽酸的構(gòu)象式，并以直立鍵或平伏鍵標(biāo)出 C3， C7和C12上3個(gè)羥基。 (b)動(dòng)物中從膽固醇衍生來(lái)的類固醇包括5類激素:雄激素、雌激素、孕酮、糖皮質(zhì)激素和鹽皮質(zhì)激素，維生素D和膽汁酸。②取代基的種類、數(shù)目、位置和取向（αβ）不同。(e)膽固醇。(c) 半乳糖基腦苷脂。(c)糖，長(zhǎng)鏈醇］10．指出下列膜脂的親水成分和疏水成分:(a) 磷脂酰乙醇胺。試問(wèn)(a)哪兩個(gè)成分在蠟和鞘脂脂中都存在?(b)哪兩個(gè)成分在脂肪和磷脂酰膽堿中都存在?(c)哪些(個(gè))成分只在神經(jīng)節(jié)苷脂而不在脂肪中存在?［(a)脂肪酸，長(zhǎng)鏈醇。答：(a)磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺；(b)磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油，1；雙磷脂酰甘油（心磷脂），2；(c) 磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺。(b)在中性pH時(shí)攜帶負(fù)凈電荷的甘油磷脂。試以磷酸甘油為例說(shuō)明此命名原則。(b)多不飽和脂肪酸（PUFA）中的雙鍵具有潛在的還原性，容易發(fā)生過(guò)氧化作用。自由基鏈反應(yīng)：自由基化學(xué)性質(zhì)活潑，能發(fā)生抽氫、歧化、化合、取代、加成等多種反應(yīng)，但是自由基反應(yīng)的最大特點(diǎn)是傾向于進(jìn)行鏈「式」反應(yīng)〔chain reaction ) ,鏈反應(yīng)一般包括3個(gè)階段:引發(fā)、增長(zhǎng)和終止?；钚匝酰貉趸蚝醯母叻磻?yīng)活性分子，如O[2個(gè)]解：100g油脂的物質(zhì)的量=（210100）/（3561000）=平均雙鍵數(shù)=（68/254）/≈2個(gè)6． (a)解釋與脂質(zhì)過(guò)氧化育關(guān)的幾個(gè)術(shù)語(yǔ):自由基、活性氧、自由基鏈反應(yīng)和抗氧化劑。102]解：Mr=（3561000）/（265）=1292I２ 值=100/=102 (100g油脂鹵化時(shí)吸收I２的克數(shù))5．某油脂的碘值為68，皂化值為210。測(cè)定皂化值的一份樣品消耗KOH 65 mg,測(cè)定碘值的一份樣品消耗I２ 510 。因?yàn)槿埸c(diǎn)隨鏈長(zhǎng)的增加而增加。(b) 10種]解：(a) 33=27種。不飽和脂肪酸的雙鍵位置，有一個(gè)雙鍵幾乎總是處于C9C10之間(△9)，并且一般是順式的。習(xí)題1．天然脂肪酸在結(jié)構(gòu)上有哪些共同的特點(diǎn)?答：天然脂肪酸通常具有偶數(shù)碳原子，鏈長(zhǎng)一般為1222碳。 測(cè)定脂質(zhì)組成時(shí)，脂質(zhì)可用有機(jī)溶劑從組織中提取，用薄層層析或氣液色譜進(jìn)行分離。血漿脂蛋白都是球形顆粒，有一個(gè)由三酰甘油和膽固醇脂組成的疏水核心和一個(gè)由磷脂、膽固醇和載脂蛋白參與的極性外殼。血漿脂蛋白是血漿中轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì)的脂蛋白顆粒。 脂蛋白是由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)以非共價(jià)鍵結(jié)合而成的復(fù)合體。膽固醇與動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)。膽固醇是最常見(jiàn)的一種動(dòng)物固醇，參與動(dòng)物細(xì)胞膜的組成。固醇或甾醇是類固醇中的一大類，其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是在甾核的C3上有一個(gè)β羥基，C17上有一個(gè)含8~10個(gè)碳的烴鏈。許多植物精油、光合色素和甾類的前體鯊烯都是萜。 萜類可看成是異戊二烯(CS)的聚合物，有倍半萜、雙萜、三萜、四萜等。重要的鞘糖脂有腦苷脂和神經(jīng)節(jié)苷脂，后者含有唾液酸。磷脂是兩親分子，有一個(gè)極性頭基和一個(gè)非極性尾，在水介質(zhì)中能形成脂雙層；它們主要參與膜的組成。其2位氨基以酰胺鍵與脂肪酸連接形成神經(jīng)酰胺，這是這類磷脂的母體。鞘磷脂是由鞘氨醇代替甘油磷脂中的甘油形成的磷脂。甘油磷脂是由sn甘油3磷酸衍生而來(lái)，最簡(jiǎn)單的甘油磷脂是3sn磷脂酸，它是其他甘油磷脂的母體。體內(nèi)的抗氧化劑如超氧化物歧化酶(SOD)、維生素E等是與脂質(zhì)過(guò)氧化坑衡的保護(hù)系統(tǒng)。OH、H2OˉO2等)使生物膜發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化，造成膜的損傷、蛋白質(zhì)和核酸等大分子的異常。它是典型的活性氧參與的自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。蠟還有其他的生物功能如防水、防侵襲等。天然蠟如蜂蠟是多種蠟酯的混合物。三酰甘油主要作為貯存燃料，以油滴形式存在于細(xì)胞中。三酰甘油也和游離脂肪酸一樣，它的不飽和鍵能發(fā)生氫化、鹵化和過(guò)氧化作用。天然油脂是簡(jiǎn)單和混合三酰甘油的混合物。 三酰甘油或甘油三脂 (TG)是由脂肪酸與甘油形成的三脂。必需脂肪酸是指對(duì)人體的功能不可缺少