【正文】 的選擇若選用正相色譜柱，常規(guī)或梯度淋洗，其所用的流動(dòng)相體系主要有以下兩類：Ⅰ.甲醇乙腈水；Ⅱ.正己烷異丙醇磷酸。（二）色譜條件色譜柱：Kromasil SIL 柱,5μm填料粒度，250；流動(dòng)相：甲醇/異丙醇/正己烷（60/35/5）；流速：1ml/min；檢測(cè)波長：205nm；柱溫：℃。（3）利用生物技術(shù)進(jìn)行改性強(qiáng)化利用生物技術(shù)進(jìn)行改性強(qiáng)化，這是技術(shù)進(jìn)步必然，也是人們生活水平提高及工業(yè)化發(fā)展需求的結(jié)果，磷脂的發(fā)展必然走向生物技術(shù)。（2）磷脂分提高純度不同磷脂組分的提取正成為研究的熱點(diǎn)，尤其是生產(chǎn)高含量的卵磷脂產(chǎn)品?，F(xiàn)有水平一般采用溶劑法進(jìn)行富集如丙酮乙醇法；用超臨界技術(shù)提取高純蛋黃磷脂已有產(chǎn)品，但主要限于藥用。如HPLC和快速原子轟擊質(zhì)譜儀(FAB MS)分析花生磷脂的PE有五種分子種,PC和PI各有六種分子種。31P核磁共振法在磷脂檢測(cè)領(lǐng)域是一種新的定性、定量分析方法,它有待于進(jìn)一步探索和發(fā)展。因此它具有快速、靈敏、干擾因素少以及準(zhǔn)確度較高等優(yōu)點(diǎn)。該法所用儀器是31P核磁共振光譜儀,其原理是：由于不同磷脂組分的磷酸根上所連的基團(tuán)不同,對(duì)Ｐ的作用也就不同,導(dǎo)致不同磷脂組分在磁場中的化學(xué)位移不同,從而達(dá)到定性、定量分析磷脂中的不同組分的目的。從發(fā)展的眼光來看, 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器大有取代傳統(tǒng)的UV檢測(cè)器的態(tài)勢(shì)。它是把流動(dòng)相噴入有熱氣流的檢測(cè)器中,流動(dòng)相蒸發(fā)而不揮發(fā)性的脂質(zhì)形成微小液滴。折光指數(shù)檢測(cè)器同樣不能用于有梯度洗脫的HPLC分析。在分析和檢測(cè)磷脂各部分組成時(shí),用單一的流動(dòng)相不能把所有的磷脂分離得很好,較為合理的解決方案是用流動(dòng)相梯度洗脫。HPLC法常用的檢測(cè)器有:紫外檢測(cè)器(UV)、紅外檢測(cè)器(IR)、示差折光檢測(cè)器(RI)、火焰離子(FI)檢測(cè)器和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)。反相的含義就是固定相為非極性液體,而流動(dòng)相為極性溶劑；正相的含義就是固定相為極性液體,而流動(dòng)相為非極性溶劑。HPLC法高效、快速、準(zhǔn)確，并且還具有系統(tǒng)密閉避免不飽和鍵氧化、不需高溫操作等特點(diǎn)。該法可同時(shí)對(duì)磷脂種類進(jìn)行定性、定量分析,但是其干擾因素多,必須嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,重復(fù)性較差。雙向?qū)游隹蓪⒘字鹘M分完全分開,兩次展開選用不同的溶劑系統(tǒng)達(dá)到不同的分離效果,非常有效，但一塊高效層析板一次只能分析一個(gè)樣品,多個(gè)樣品的分析就要耗費(fèi)大量昂貴的高效薄層板,并且費(fèi)時(shí)。磷脂的薄層層析可分為單向及雙向?qū)游?。?FTIR 法分析磷脂含量其準(zhǔn)確度仍需增加,需要更多的研究工作來解釋其他非磷脂成分。傅立葉變換紅外光譜法(FTIR)：該法所用儀器是傅立葉變換紅外光譜儀,由于 C=O、POPOC 的吸收振動(dòng),在磷脂定量分析過程中產(chǎn)生5個(gè)譜帶,其中可用于測(cè)定毛油和脫膠油中含磷量的譜帶是譜帶4(1200～970 nm),這個(gè)譜帶的振動(dòng)是由 POC 和 PO2 基團(tuán)產(chǎn)生的。即當(dāng)用一適當(dāng)波長的單色光照射卵磷脂的溶液時(shí)，其吸光度A與溶液的濃度C和透光液層厚度L的乘積成正比。重量法：利用油脂溶于丙酮,而磷脂不溶于丙酮的性質(zhì),用丙酮萃取樣品,脫油磷脂干燥稱重后計(jì)算即可得總磷脂的含量,該法適用于植物油脂中磷脂總量的測(cè)定,其優(yōu)點(diǎn)是所用儀器均為玻璃儀器,價(jià)格低廉,操作簡單,適于企業(yè)應(yīng)用,但其測(cè)定值并非磷脂真實(shí)測(cè)定值。（1）總磷脂量的分析測(cè)定鉬藍(lán)比色法：樣品經(jīng)灼燒后酸化灰分,磷酸根、硫酸聯(lián)氨和鉬酸根間形成一種有色復(fù)合物。經(jīng)過數(shù)十年的發(fā)展，磷脂的檢測(cè)日臻成熟。溶劑的蒸發(fā)消耗大量能源,以及產(chǎn)品中的溶劑殘留都是這種方法的缺點(diǎn)。將粗磷脂用乙醇溶解，該溶液通過氧化鋁填充的層析柱，由于氧化鋁對(duì)肌醇磷脂、腦磷脂和卵磷脂吸附能力不同，當(dāng)用乙醇淋洗層析柱時(shí)，被洗下來的為卵磷脂，而肌醇磷脂、腦磷脂、中性油和色素等幾乎不被淋洗，因此可得含量高于95%的卵磷脂。例如用己烷異丙醇混合溶劑溶解的粗磷脂溶液通過聚丙烯半透膜，收集流過膜的溶液，蒸發(fā)，%提高到51%，雜質(zhì)大大減少。不少學(xué)者試圖用超臨界萃取技術(shù)提純卵磷脂，但單純的超臨界CO2流體不溶解磷脂，如果在CO2中加入夾帶劑乙醇，就可改變超臨界CO2溶解特性，使其對(duì)磷脂中卵磷脂有更好的選擇性，從而達(dá)到分離提純目的。離心分離，收集ZnCl2卵磷脂復(fù)合物，加入冷卻的丙酮，攪拌過濾后蒸脫溶劑，可得純度達(dá)99%的卵磷脂。具體方法是加ZnCl2使之與卵磷脂生成復(fù)合物，然后再用丙酮沉淀。由于乙酸乙酯是安全溶劑，用這種純化技術(shù)得到的產(chǎn)品可以用于食品、醫(yī)藥和化妝品。（3）乙酸乙酯純化法將粗磷脂溶于乙酸乙酯中，將溶液冷卻至10℃。目前,用于磷脂提取的低碳醇主要有乙醇、異丙醇及正丙醇。利用它們?nèi)芙舛鹊牟町惪蛇_(dá)到分離提純磷脂酰膽堿的目的。 可供選擇的溶劑有：乙醚丙酮、氯仿丙酮、三氯乙烯丙酮等。磷脂的精制方法（1）丙酮精制法丙酮能溶解油脂和游離脂肪酸，但不溶解磷脂。另外，磷脂生產(chǎn)工藝和技術(shù)設(shè)備在歐洲、美國、日本等國家和地區(qū)已日趨成熟，廣泛采用連續(xù)真空濃縮工藝提取大豆磷脂，而在國內(nèi)大豆磷脂提取技術(shù)仍停留在間歇式生產(chǎn)水平，遠(yuǎn)低于國際先進(jìn)水平。一些化學(xué)法改性法如乙?；?、羥基化、氫化等方法現(xiàn)都已實(shí)用化。磷脂改性通常采用物理法、化學(xué)法和酶法。磷脂研究現(xiàn)狀1980年在意大利首都羅馬召開的第一屆國際大豆磷脂的專題研討會(huì)，其后基本每隔一年召開一次，1989年在美國芝加哥召開的第四屆國際磷脂會(huì)議上成立了國際磷脂研究集團(tuán)（The International Lecithin Study Group），每年都舉行一次會(huì)議，互通科研、生產(chǎn)、應(yīng)用與銷售方面的信息。正在建設(shè)的有上海真大卵磷脂廠和山西得裕生物工程有限責(zé)任公司（南通華安超臨界萃取技術(shù)有限公司提供）。由于諸如設(shè)備、技術(shù)等種種原因，我國磷脂的生產(chǎn)及研究未能形成產(chǎn)品的系列化和規(guī)模效益。目前,國內(nèi)大豆磷脂產(chǎn)品主要有濃縮磷脂、粉狀磷脂、卵磷脂、改性磷脂、高純度磷脂、腦磷脂、磷脂營養(yǎng)乳、磷脂片劑、卵磷脂膠囊等。這些成果包括濃縮磷脂和粉狀磷脂的制取工藝與設(shè)備的研究，磷脂在面包、速溶乳粉、醫(yī)藥、化妝品、皮革、涂料等方面的應(yīng)用研究。我國60年代以來不斷出現(xiàn)磷脂研究單位，但多數(shù)限于單一產(chǎn)品或初級(jí)分離階段。英國的磷脂生產(chǎn)商有Quest international 、John Fseyfried、Ｋ＆ｋ Greef、Porum Holdings等公司。德國的Lucas Meyer公司（產(chǎn)品全,應(yīng)用領(lǐng)域廣,向全球供應(yīng)磷脂總消耗量的30%）；Nattermann公司（以生產(chǎn)藥用和化妝品用卵磷脂著稱）。因此，國內(nèi)外市售的卵磷脂均以大豆磷脂為主，其市場占有率為90%以上，而蛋黃磷脂主要用于醫(yī)藥制品和化妝品，也有少量以復(fù)配型產(chǎn)品形式用于食用膠囊生產(chǎn)中。相比而言，大豆磷脂發(fā)展迅猛，而蛋黃磷脂發(fā)展較為緩慢，這主要?dú)w咎于生產(chǎn)加工成本上。早在20世紀(jì)30年代，德國已開始進(jìn)行磷脂的研究；60年代以后美國、歐洲和日本等國將其粗磷脂、精磷脂工業(yè)化；80年代下半葉磷脂在美、歐、日已成熱點(diǎn)研究課題。后經(jīng)大量研究，發(fā)現(xiàn)磷脂并不是一種單純物質(zhì)，而是一種混合物；Thudichum 證實(shí)了磷脂的化學(xué)結(jié)構(gòu)，分離并分析出磷脂中磷與氮的比例，從而鑒定了PC、PE和神經(jīng)鞘磷脂（Sphingomyelin）；1912年Gournean 和 Peittee 報(bào)道了磷脂按其分子中磷集團(tuán)處于丙三醇的1或2位可分為α磷脂和β磷脂，絕大多數(shù)天然磷脂都是α磷脂；磷脂的萃取技術(shù)始于1910年，方法是利用乙醇使其從天然物質(zhì)中浸出，然后將浸出物用丙酮處理；1920年開始從大豆油中提取磷脂，先用乙醇和苯等溶解，再用丙酮處理得到一定數(shù)量磷脂，但是這些方法成本高，均無實(shí)用價(jià)值；大豆磷脂的工業(yè)化生產(chǎn)始于1923年Bollmunn取得專利之后，該法的要點(diǎn)是先將大豆油用熱水或水蒸汽處理，使大豆磷脂凝集，實(shí)現(xiàn)油腳與油分離，再將其干燥得到產(chǎn)品，該方法中由于使用苯、石蠟油、無水乙醇等混合溶劑，浸出磷脂含有一定的糖類和苦味物質(zhì)，品質(zhì)低劣；隨后，Sonensen 與 Bed 等人在大豆浸出時(shí)采用己烷溶劑，從而得到僅含少量