【正文】 精確稱取冷凍干燥恒重的菊苣根多糖30mg，水溶解后定容到100ml容量瓶中，搖勻，作為多糖儲(chǔ)備液。己糖在490nm處（戊糖及糖醛酸在480nm）有最大吸收，吸收值與糖含量呈線性關(guān)系[27]。第三章 實(shí)驗(yàn)部分 原料菊苣根，由長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)功能食品與生物技術(shù)研究所提供。通過(guò)驗(yàn)證結(jié)果顯示其簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確。 超臨界萃取法利用CO2等氣體在超臨界的條件下呈現(xiàn)特殊的液相特性，來(lái)提取原料中的糖類物質(zhì)。 超聲波提取法這種方法是利用超聲波對(duì)細(xì)胞組織的破碎作用過(guò)來(lái)提高的破碎作用過(guò)來(lái)提高糖類在提取液中的溶解度和浸出率，從而有利用提高多糖的提取率。此法操作簡(jiǎn)便，但由于水做溶劑難以完全溶出其中的多糖物質(zhì)，所以一般需要多次浸提，操作時(shí)間長(zhǎng)。 多糖的幾種提取方法熱水浸提法是多糖提取的傳統(tǒng)方法，用水作為溶劑浸取多糖，溫度一般控制在50~90℃，在恒溫水浴上回流浸提2~4h過(guò)濾后的濾液和濾渣。袁學(xué)干等以環(huán)磷酰胺l00mg∕kg制造出了免疫抑制小鼠模型，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明單用菊苣根多糖可明顯增強(qiáng)小鼠脾臟和腸系膜淋巴細(xì)胞數(shù)目，脾臟白髓總體積和淋巴皮質(zhì)總體積也有所增加，從而證實(shí)了菊苣根多糖能使免疫器官細(xì)胞數(shù)目增加[32]，謝氏等報(bào)道菊苣根多糖能使小鼠l 分泌細(xì)胞顯著增加菊苣根多糖對(duì)免疫抑制及放射線引起的白細(xì)胞降低有明顯的保護(hù)作用。臨床上，菊苣根多糖可減輕由環(huán)磷酞胺引起的毒副反應(yīng)，并對(duì)因骨髓移植而致免疫缺損有重建作用，為菊苣根多搪臨床應(yīng)用開辟了廣闊的前景。 菊苣根多糖是一種免疫活性多糖，通過(guò)對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用，增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能而實(shí)現(xiàn)抗腫瘤作用，被認(rèn)為是抗腫瘤作用機(jī)理之一。表明ASPS對(duì)膜PI轉(zhuǎn)換具有顯著抑制作用。結(jié)果表明，ASPS對(duì)S180細(xì)胞膜PI轉(zhuǎn)換具有顯著抑制作用，并與ASPS濃度相關(guān)。降低腫瘤組織中花生四烯酸含量，減少自由基損傷，具有一定的抗腫瘤作用。尤其是花生四烯酸降低更為明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，ASPS作用后，膜中性脂肪酸組成無(wú)明顯變化，但膜鱗脂脂肪酸組成發(fā)生顯著改變。腫瘤細(xì)胞膜脂肪酸組成明顯異常，與腫瘤細(xì)胞膜的許多表型改變及伴隨的惡性行為密切相關(guān)。磷酯酰肌醇轉(zhuǎn)換增強(qiáng)還與羰基有關(guān)，黃添友等 研究顯示菊苣根多糖能顯著抑制S細(xì)胞膜磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)換。磷酯酰肌醇存在TItt胞膜與內(nèi)質(zhì)上，在其激酶催化r發(fā)生磷酸化反應(yīng)的過(guò)程稱為磷酯酰肌醇的轉(zhuǎn)換。 對(duì)細(xì)胞信使系統(tǒng)的影響腫瘤細(xì)胞膜的許多表變化，例如腫瘤細(xì)胞膜唾液酸含暈的變化與腫瘤K系密切莉等的研究證實(shí)菊苣根多糖可以提高唾液酸(sA)細(xì)胞膜表面含帚，從而改變細(xì)胞膜的生化特性，可能與抗腫瘤特定聯(lián)系。研究表明，菊苣根多楠有促誘生干擾素作用。說(shuō)明小鼠對(duì)腫瘤產(chǎn)生r免疫并且還報(bào)道過(guò)菊苣根多還能增強(qiáng)crL括性和r刺激小鼠牌細(xì)胞產(chǎn)生L2有研究報(bào)道菊苣根多糖可作為I細(xì)胞活性增強(qiáng)劑從而有抗腫瘤作用。分析原因，可能與所用口服液劑量小，個(gè)體反應(yīng)差異較大以及致癌劑毒性較強(qiáng)有關(guān)。對(duì)小鼠腹水型肝癌(HEPA)%，但對(duì)小鼠白血病L615存活時(shí)間無(wú)顯著影響. ML Shen等人將腫瘤細(xì)胞接種JCR小鼠，發(fā)現(xiàn)對(duì)二種瘤細(xì)胞均有顯著抑制作用。 程秀娟等人的實(shí)驗(yàn)證明，ASPS給接種S37及Sl8。結(jié)果表明，給藥組小鼠腫瘤體積顯著小于對(duì)照組((P)，給藥時(shí)間越長(zhǎng)差別越大。謝蜀生等將C57BL/6小鼠皮下接種1X l0179。體外對(duì)ASPS的抗癌作用研究較少，結(jié)果也不完全一致，這可能與所用細(xì)胞株、ASPS作用時(shí)間、檢測(cè)方法敏感性不同有關(guān)。終麗等將ASPS與瘤細(xì)胞直接接觸24h，通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞唬拍酸脫氫酶活性的MTT比色法，觀察ASPS對(duì)動(dòng)物腫瘤細(xì)胞(S180)和人白血病細(xì)胞(K562)的直接作用。（1）體外抗癌作用菊苣根屬扶正固本類中藥，國(guó)內(nèi)外有關(guān)菊苣根抗癌作用報(bào)道甚多。謝蜀生等人利用小鼠胸腺瘤皮卜移植模型進(jìn)一步證實(shí)了菊苣根多糖的抗腫瘤作用。但對(duì)6l5白血病無(wú)顯著作用。 菊苣根多糖抗腫瘤作用目前許多實(shí)驗(yàn)都證實(shí)了菊苣根多糖只有較強(qiáng)的抗腫瘤作用。半乳糖存在16及13連接方式，多數(shù)萄糖糖以16糖昔鍵連接，少數(shù)葡萄糖出現(xiàn)在分子非還原末端。帶有分支，約每4個(gè)已糖殘基帶有一個(gè)側(cè)鏈。AS2經(jīng)部分水解、酶解、高碘酸氧化、Smith降解反應(yīng)、完全甲基化、GC, GCD的分析結(jié)果表明，以I3(13)葡萄搪及a(14)葡萄糖構(gòu)成分子的主鏈。菊苣根多糖級(jí)分AS2為均一級(jí)分。AS H經(jīng)完全甲基化與水解、部分甲基化與水解、GC, IR分析，結(jié)果表明，AS I(是一個(gè)簡(jiǎn)單的((16)a葡聚糖，在每第十五個(gè)葡萄糖固架單位的末端C:上連接、葡萄糖殘基。ASⅡ主要為a糖鏈，而ASⅢ主要為糖鏈。 菊苣根多糖ASⅡ和ASⅢ經(jīng)分析證明為均一多糖，平均分子量分別為150000和30000,比旋光值分別為+167186。氣相色譜()分析表明，PFSA的單糖摩爾比葡萄糖。和+176。除金絲桃苷外,其它3 種為刺五加葉中尚未報(bào)道的黃酮類成分,經(jīng)測(cè)定[23] %。從根和根皮的水提物中分得反式4,4′二羥基3,3二甲氧基芪和7 羥基6,8二甲基香豆素即異嗪皮啶[21]。衛(wèi)平等[19 ] 的分析結(jié)果表明短柄五加莖中含16種氨基酸,其中7種為人體必需的。了解菊苣根多糖與腫瘤細(xì)胞的凋亡及其 相互作用的關(guān)系，探討細(xì)胞凋亡發(fā)生氣制，選擇性地促進(jìn)或抑制細(xì)胞凋亡的發(fā)生，將有助于為菊苣根多糖治療腫瘤提供新的依據(jù)。菊苣根多糖對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用機(jī)理復(fù)雜，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡并 非其抗腫瘤作用的唯一途徑。菊苣為多年生草本植物，具有益氣健脾，抗高溫、抗 放射、抗腫瘤和增強(qiáng)機(jī)體反抗力的功能。 抗腫瘤作用腫瘤的發(fā)生不僅與細(xì)胞的過(guò)度增殖有關(guān)，而且與細(xì)胞凋亡受抑制從而使已轉(zhuǎn)化的細(xì)胞生存期延長(zhǎng)有關(guān)[4]。由于菊苣根具有對(duì)血液循環(huán)提升與促進(jìn)的作用，即加速氧氣運(yùn)送至各處細(xì)胞，緩解因缺氧造成醣類行無(wú)氧代謝產(chǎn)生乳酸等物質(zhì)造成的疲倦感與昏睡增強(qiáng)機(jī)體抵抗力。菊苣根注射液可促進(jìn)側(cè)支循環(huán)，改善缺血的心、腦、腎組織的微循。有學(xué)者用菊苣根治療冠心病206 例，有效率為84%。 調(diào)節(jié)心腦血管的功能其提取物可擴(kuò)張腦血管，改善大腦的供血，并對(duì)血壓有雙重調(diào)節(jié)作用，既可使高血壓降低，又可使低血壓升高，這就是典型的“雙向調(diào)節(jié)”。 菊苣根的功能 抗衰老作用它能調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)、脂肪的代謝，促進(jìn)核酸和蛋白質(zhì)的合成，還有清除氧自由基的作用。然而，更進(jìn)一層的研究卻驚人地發(fā)現(xiàn)，給予較高劑量的菊苣根反而會(huì)傷肝。菊苣根對(duì)放射性損傷有保護(hù)作用，有抗緊張作用在最新以大白鼠的研究發(fā)現(xiàn)，地塞米松致肝損傷大鼠喂飼含菊苣根粉的飲食，可降低大鼠肝臟總脂質(zhì)、三酰甘油等，減輕病變。 （2）藥理的研究研究證實(shí)，％，多吃能有助睡眠，是有病治病、沒(méi)病養(yǎng)身的良藥補(bǔ)品。 《拜他依藥書》載:“菊苣根，是菊苣的根；原植物分家生和野生兩種，野生的葉比家生的葉較寬；家生的又分兩種，一種的葉較寬，與萵苣葉相似，另一種的葉較細(xì)，較長(zhǎng)，味辛；根味淡、”根據(jù)以上維吾爾醫(yī)本草所述植物特征和實(shí)物對(duì)照，與現(xiàn)代的菊苣根一致 菊苣根研究現(xiàn)狀（1）活性成分及其功能的研究現(xiàn)代研究證實(shí)，菊苣根中的苷類物質(zhì)、多糖等活性成分，具有抗衰老、抗疲勞、抗癌，和調(diào)節(jié)神經(jīng)、內(nèi)分泌、心血管功能，提高機(jī)體對(duì)物理、化學(xué)、生物等有害剌激的抵抗能力等藥理作用。在炎熱的南方生長(zhǎng)旺盛，在寒冷的北方氣溫在零下8t時(shí)仍青枝綠葉，5月份開花，花期長(zhǎng)達(dá)4個(gè)月，花呈紫藍(lán)色。20世紀(jì)80年代我國(guó)引進(jìn)后又培育出大葉型品種，由于它品質(zhì)優(yōu)良，成為最有發(fā)展前途的飼料和經(jīng)濟(jì)作物新品種。本論文為以后進(jìn)一步研究菊苣根多糖結(jié)構(gòu)奠定基礎(chǔ)，為進(jìn)一步開發(fā)菊苣根產(chǎn)品提供了理論依據(jù)，其實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及實(shí)驗(yàn)方法也為其他領(lǐng)域的研究提供了平臺(tái)和參考。本文主要研究在水浴提取過(guò)程中溫度，時(shí)間，料液比對(duì)菊苣根多糖提取率的影響，并用苯酚硫酸法測(cè)定了其產(chǎn)品含量。在臨床上治療腎虛咳喘、糖尿病、風(fēng)濕、精神分裂癥、腫瘤等。菊苣嫩葉可食用，鹽漬后制成醬菜，曬成干菜等。研究證實(shí)，菊苣根之所以有較高的藥用價(jià)值其主要含有多種多糖，黃酮等活性成分，以及人體所必需的16中氨基酸和微量元素。根的乙醇或乙醚提取物有抗菌作用,其有效成分可能是一種倍半萜。菊苣根具有很高的藥用價(jià)值，野生菊苣根的浸劑給動(dòng)物注射,可興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)并增強(qiáng)心臟活動(dòng)(振幅加大而頻率減慢)；煎劑有抗菌、收斂作用。瘦果先端截形，冠毛短，鱗片狀，先端細(xì)齒裂?；~倒向羽狀分裂至不分裂，但有齒，長(zhǎng)620cm，先端裂片較大，側(cè)裂片三角形，基部漸狹成有翅的葉柄；莖生葉漸小，少數(shù)，披針狀卵形至披針形，上部葉小，全緣，全部葉的下面被疏粗毛或絹毛。根肥大。關(guān)鍵詞：菊苣根多糖；熱水浴浸提法；提取工藝；