蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)ppt課件-文庫吧資料
2025-05-13 13:46本頁面
【正文】 ?螺旋的中央棒狀區(qū)和兩側(cè)的非螺旋區(qū)構(gòu)成 (角蛋白 初原纖維 微原纖維 大原纖維 ) * 角蛋白具有良好的伸縮性能，毛發(fā)纖維在濕熱時可以拉長到原有長度的兩倍，由 ?螺旋轉(zhuǎn)變?yōu)??構(gòu)象 * 角蛋白相鄰分子的螺旋由 Cys殘基間的二硫鍵交聯(lián)，作為使纖維復(fù)原的恢復(fù)力 原有卷發(fā) 涂還原劑、加熱 涂氧化劑、冷卻 新的卷發(fā) ??? 三、蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu) (4) 無規(guī)卷曲 （ Random coil） 概念 ： 沒有確定規(guī)律性的肽鍵構(gòu)象 特點： 常見于球狀蛋白質(zhì)分子中，在其它類型二級結(jié)構(gòu)肽段之間起連接作用，有利于整條肽鏈盤曲折疊 H2N COOH 蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)總結(jié) 多肽鏈折疊的規(guī)則方式 二級結(jié)構(gòu) 剛性 /柔性 氫鍵數(shù)目 重復(fù)結(jié)構(gòu) 形狀 ?－螺旋 剛性較強 多 有 ?－折疊片 剛性較強 多 有 ?－ 轉(zhuǎn)角等 柔性較強 少 沒有 無規(guī)卷曲 柔性較強 少 沒有 超二級結(jié)構(gòu) 超二級結(jié)構(gòu) (Supersecondary Structure, Motif) 是指若干相鄰的二級結(jié)構(gòu)中的構(gòu)象單元彼此相互作用，形成有規(guī)則的，在空間上能辨認的二級結(jié)構(gòu)組合體。 構(gòu)象： 肽鍵的特點 酰胺鍵中 CN鍵 具有部分雙鍵 (40%)性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn) 。 請分析該七肽的一級結(jié)構(gòu)怎么樣？ 概念： 蛋白質(zhì)中 多肽鏈主鏈自身盤繞折疊 形成的在一維方向上有規(guī)律性的結(jié)構(gòu) 基本類型： ?螺旋、 ?折疊、 ?轉(zhuǎn)角、無規(guī)結(jié)構(gòu) 穩(wěn)定二級結(jié)構(gòu)的作用力： 氫鍵 三、蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu) Secondary structure 構(gòu)型與構(gòu)象 構(gòu)型： 化合物分子中原子和基團在空間的取向，構(gòu)型的改變涉及共價鍵的形成與破壞，但與氫鍵無關(guān)。 (3) 經(jīng)糜蛋白酶處理后可以得到兩個肽段，其氨基酸組成分別為 Ala、 Tyr、 Ser和 Pro、 Phe、 Lys、 Arg，這兩個肽段與FDNB反應(yīng)后分別得到 DNPSer和 DNPLys。肽鏈完全水解后，可用層析法加以鑒定 ? Sanger早期采用該法鑒定胰島素 A鏈和 B鏈的 C端殘基 H N C H C O O HRL i B H 4H N C H C H 2 O HR水 解混 合 氨 基 酸 H 2 N C H C H 2 O HR+C 端羧肽酶法 主要方法 根據(jù)氨基酸釋放的 動力學(xué)曲線 ， 可確定該肽鏈的 C端氨基酸順序 氨基酸 C末端分析 羧肽酶 (Carboxypeptidas)法 AB 氨基酸 C末端分析 4種羧肽酶的來源和專一性 羧肽酶 來源 專一性 CpA 牛胰臟 能釋放除 Pro、 Arg和 Lys以外的所有 C端氨基酸 CpB 豬胰臟 主要水解 C端為 Arg或 Lys的肽鍵 CpC 植物或微生物 相當(dāng)廣泛 ， 幾乎能釋放 C端的所有氨基酸 CpY 面包酵母 可釋放 C端所有氨基酸 則其氨基酸排列順序為： ThrValLysAlaAlaTrpGlyLys ?如測一個八肽 測得 N端氨基酸殘基為 Thr 又分別測得片斷 : AlaAlaTrpGlyLys ValLysAlaAlaTrp ThrAsnValLys 二硫鍵的定位 二硫鍵的定位 將含二硫鍵的肽段進行酶解，分離出含二硫鍵的肽，對該肽進行氧化或還原，切斷二硫鍵，生成二個小肽段，將這兩個小肽段與原肽鏈氨基酸順序進行比較，即可確定二硫鍵位置 二硫鍵位置的確定 對角線電泳 1. 胃蛋白酶水解 (專一性低，切點多，作用 pH在酸性范圍，有利于保持二硫鍵完整 ) 2. 對角線電泳 (a) pH 一相電泳 (b) 暴露于過甲酸蒸汽后，斷裂二硫鍵 ,形成含磺基丙氨酸的肽，進行第二相電泳 如何區(qū)分分子間和分子內(nèi)的二硫鍵？ 問題： 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定流程 完整蛋白 拆分亞基 亞基蛋白 多肽片段 水解分離片段 多肽序列 亞基蛋白序列 多肽序列測定 片段重疊 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu) 二硫鍵測定 氨基酸組成分析 末端測序 蛋白質(zhì)測序新方法 ? 生物質(zhì)譜法 軟電離方式結(jié)合惰性氣體碰撞的多級串聯(lián)質(zhì)譜 (MS/MS or MSn) ? 核酸序列測定法 通過基因中核苷酸的序列推測蛋白質(zhì)的氨基酸順序 HPheValAsnGlnHisLeuCysGlySerHis LeuVal Glu Ala Leu Tyr –Leu ValCysGly GluArgGlyPhePheTyrThrProLysAlaOH B鏈 1 5 7 10 15 19 20 21 25 30 HGlyIleValGluGlnCysCysAlaSerValCysSerLeuTyrGlnLeuGluAsnTyrCysAsnOH 1 5 10 20 15 A鏈 7 11 6 21 S S S S 牛胰島素的化學(xué)結(jié)構(gòu) — S———— S—— 蛋白質(zhì)測序舉例
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