【正文】 。 c). 可以實現(xiàn)高分辨 。 b). 快速獲得混合肽的肽譜 . 缺點 : a). 金屬離子干擾 , Na, K； b). 離子源結構復雜 ,； c). 沒有 LC/MALDI 接口； d). 實現(xiàn) MS/MS 困難 e). 需要基質 質量范圍 : 分子量小于 500,000 Da 6). 表面增強激光解吸電離 (Surfaceenhanced laser desorption/ionization, SELDI)技術 adding the protein sample, washing, adding the energy adsorbing molecule (EAM) 質量分析器 ? 磁分析器 ? 四極桿質量分析器 (Quadrupole analyzer) ? 離子阱質量分析器 (Ion trap analyzer) ? 飛行時間質量分析器 (Time of flight analyzer) ? 傅立葉變換離子回旋共振分析器 （ Fourier transform ion cyclotron resonance analyzer ） 1). 磁質譜儀 (magicsector mass spectrometer) ? 經(jīng)典質量分析器：帶電粒子在磁場中運動受到洛倫茲力的作用 m: 離子的質量 z: 離子所帶電量 V: 離子飛行速度 B: 磁場強度 r V2rBzm22?MS MS/MS 空間串聯(lián)質譜儀 優(yōu)點： a). 高重現(xiàn)性 (穩(wěn)定性 )。 ? 可吸收激光 ,既與激光形成共振吸收 。 ? 能溶解于可溶解樣品分子的溶劑 。 5). 基質輔助激光解吸電離技術 (Matrixassisted laser desorption/ionization, MALDI) 離子化過程 ? MALDI的原理 是用激光照射樣品與基質形成的共結晶薄膜，基質從激光中吸收能量傳遞給生物分子，而電離過程中將質子轉移到生物分子或從生物分子得到質子，而使生物分子電離的過程。L/min) c). 毫微噴霧源 (? nL/min) Drying gas Nebulizer gas 電噴霧離子化 （ Electrospray Ionizsation，ESI）是在毛細管的出口處施加一高電壓，所產(chǎn)生的高電場使從毛細管流出的液體霧化成細小的帶電液滴，隨著溶劑蒸發(fā)，液滴表面的電荷強度逐漸增大，最后液滴崩解為大量帶一個或多個電荷的離子，致使分析物以單電荷或多電荷離子的形式進入氣相。 質譜儀的示意圖 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 離子檢測器 質量分析器 離子源 蛋白質 產(chǎn)生離子 按離子的質量與電荷比分離離子 離子轉換成電信號 控制整個質譜儀 高斯狀峰 棒狀峰 質譜工作流程 進樣系統(tǒng) 離子源 質量分析器 離子檢測器 質譜的構造 ? 進樣系統(tǒng)： 按電離方式的需要，將樣品送入 離子源的適當部位，分為加熱進樣和直接進樣。 質譜發(fā)展史 ? 1911年 : 世界第一臺質譜裝置（ . Thomson） ? 40年代 : 用于同位素測定和無機元素分析 ? 50年代： 開始有機物分析（分析石油） ? 60年代： 研究 GCMS聯(lián)用技術 ? 70年代： 計算機引入 生物質譜的發(fā)展 ? 80年代：快原子轟擊電離， 基質輔助激光解吸電離，電噴霧電離， 大氣壓化學電離 質譜技術因解決科學前沿難題屢次獲得諾貝爾獎： ， Thompson .（發(fā)明質譜技術）； ， Aston （利用質譜儀發(fā)現(xiàn)非放射性同位素）； ， Paul W.（發(fā)明離子阱原理與技術）； ， Curl （用質譜儀觀測到激光轟擊下產(chǎn)生的碳 60）； 2022年美國科學家約翰 .芬恩與日本科學家田中耕一由于發(fā)明了對生物大分子的質譜分析方法而獲得了諾貝爾化學獎。 質譜分析原理 質譜分析法是通過對被測樣品離子的 質荷比 的測定來進行分析的一種分析方法。 蛋白質研究技術的革命：蛋白質組學 蛋白質組學常用的兩大技術平臺 第三部分 生物質譜技術的原理及應用 質譜技術特點 ? 質譜儀是一個用來測量單個分子質量的儀器，實際上質譜儀提供的是分子的質量與電荷比 (m/z or m/e). ? 質譜法是一強有力的分析技術。 蛋白質組學定義 蛋白質組學的研究的機遇和挑戰(zhàn)： 機遇：基因組計劃的快速進行，大量基因序列和 EST的確定為蛋白質的快速鑒定提供了良好的基礎。 蛋白質組學 (Proteomics) ：是通過大規(guī)模研究蛋白質的表達水平的變化、翻譯后修飾、蛋白質與蛋白質之間的相互作用，以獲取蛋白質水平上疾病變化、細胞進程及蛋白質網(wǎng)絡相互作用的整體綜合信息的科學研究。 ? 2022年 4月 14日，科學家宣布人類基因組計劃已經(jīng)順利完成， 99%的人類遺傳密碼被破譯，人類基因組圖譜提前 2年完成。由 Proteome進一步派生出 Proteomics。 蛋白質組最早是由澳大利亞 Macquarie 大學的 Wilkins和 Williams在 1994年的意大利舉辦的雙向電泳會議上首次提出來的。 隨著人類基因組計劃重點由結構基因組到功能基因組的轉移，生命科學開始進入后基因組時代。 網(wǎng)絡 的，或平行發(fā)生，或呈級聯(lián)因果關系。 蛋白質相互作用及空間構向等問題是生命現(xiàn)象復雜性的真實體