[理學(xué)]第三章酶-文庫吧資料
2025-03-28 08:56本頁面
【正文】 %)? 酶若制成干粉，可放置在室溫下保存，而處于溶液狀態(tài)時必須放在冰箱里保存。 對酶促反應(yīng)速度的影響 ? 一方面溫度升高 ,酶促反應(yīng)速度加快； ? 另一方面 ,溫度升高 ,酶變性失活性。 1 [S] + 1 V V= V[S] Km + [S] 取倒數(shù) 雙倒數(shù)作圖法(LineweaverBurk Plot) V = Vmax [S] Km + [S] K3 [S] Km + [S] [E] = V與 [E]成正比關(guān)系（ [S]足夠大， V=K3[E]） [E] V [S] Km ? 在一定的 pH下 , 酶具有最大的催化活性 ,通常稱此 pH為最適 pH， 一般酶的最適 pH為 68。 E + S ES P + E k1 k2 k3 Km值與米氏方程的實際用途 ? 在已知 Km的情況下，應(yīng)用米氏方程可計算任意 [s]時的 v， 或任何 v下的[s]。 ? Km值表示酶與底物之間的親和力 當 k k2k3時 ， km=(k2+ k3)/ k1 km≈k 2（ 分離能力） /k1（ 親合能力 ) Km越小，親和力越強，酶的催化活性越高；反之亦然。 P87 斜率 =[P]/ t = V（ 初速度） [P] t 問題：為什么要用初速度？ ① [S]降低 ②逆反應(yīng)增大 ③酶失活 ④酶受到產(chǎn)物抑制 ①底物濃度對酶反應(yīng)速度的影響 ②米氏方程 (Michaelis－ Menten equation) ——中間產(chǎn)物學(xué)說 （ 1） S與 E形成中間產(chǎn)物，且整個反應(yīng)速度 取決于 ES → P + E （ 2）產(chǎn)物濃度為 0（初速度） （ 3） [S] 》 [E] （ 4） 反應(yīng)達到平衡 E + S ES P + E k1 k2 k3 ? ?? 1kES ?? ?? 2kES ? ??3k EP ?? ? ? ?ESEt ???S ? ?ES米氏方程的推導(dǎo) ? ?? ? ? ?? ?? ?132 k kkES SESSE t ???令 ： Kmk kk ??132將（ 4）代入（ 3），則 ： ? ?? ?SKSVvm ?? m a x[ES]生成速度 ： ? ? ? ?? ?? ?SESEkv t ?? 11 ， [ES]分解速度： ? ? ? ?ESkESkv 322 ??即 ： ? ? ? ?? ?? ? ? ? ? ?ESkESkSESEkt 321 ???則 ： ? ? ? ?? ? ? ?? ?SSESESKm tE??(1) 經(jīng)整理得 ： ? ?? ?? ?SKSEmt??? ?ES由于酶促反應(yīng)速度由 [ES]決定，即 ? ?ESkv3?3kv?? ?ES， 所以 (2) 將（ 2）代入（ 1）得： ? ?? ?? ?SK SEkv m t??3 ? ?? ?? ?SK SEk m t?? 3v(3) ??當酶反應(yīng)體系處于恒態(tài)時： 21 vv ?當 [Et]=[ES]時， mVv ? ? ?tm EkV 3?(4) 所以 Km為米氏常數(shù) 一級反應(yīng) 零級反應(yīng) ③米氏常數(shù) Km ? 上式表明 ,米氏常數(shù)是反應(yīng)速度為最大值的一半時的底物濃度 , 單位為 mol/L。 (1)胰凝乳蛋白酶 ()的特點 AA殘基組成，分子量 25000 AA－ AA－ AA－ AA1 AA2－ AA－ AA－ AA N端 芳香族 AA C端 Ser195, His57, Asp102， 構(gòu)成一個氫鍵 體系 , His57成為橋梁。 (5)活性中心的低介電區(qū)域 (微環(huán)境的影響 ) ? 指酶活性部位的催化基團所處的微小環(huán)境。 （ 胰凝乳蛋白酶）胰凝乳蛋白酶通過酸堿催化使肽鍵斷裂 (4)共價催化 P80 ? 酶與底物形成反應(yīng)活性很高的共價過渡產(chǎn)物，使反應(yīng)活化能降低，從而提高反應(yīng)速度的過程，稱為共價催化。 (3)酸堿催化 ? 狹義的酸堿催化是指 H＋ 和 OH－ 的催化； ? 廣義的酸堿催化是指通過質(zhì)子酸提供部分質(zhì)子，或是通過質(zhì)子堿接受部分質(zhì)子的作用，達到降低反應(yīng)活化能的過程。 b.―誘導(dǎo)契合 ” 假說 (inducedfit hypothesis) ? 認為酶表面并沒有一種與底物互補的固定形狀，但酶的活性中心具有一定的柔性，兩者相遇底物誘導(dǎo)酶構(gòu)象發(fā)生變化，才形成了互補形狀 產(chǎn)物的釋放 P79 (1)鄰近效應(yīng)和定向效應(yīng) 靠近定向?大大提高了酶活性部位上底物的有效濃度 ?分子間反應(yīng)類似于分子內(nèi)反應(yīng)，大大提高了 ES絡(luò)合物進入過渡態(tài)的幾率。 COO— COO— │ │ CH 延胡索酸酶 HO—C—H ‖ + H2O │ HC H —C—H │
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