[理學]第三章酶(參考版)
2025-03-25 08:56本頁面
【正文】 (2)酶活力單位 (active unit) ? 酶活力單位 P102——量度酶催化能力大小 ? 習慣單位 （ U） ： 每 h催化 1g底物的酶量 ? 國際單位 （ IU） ： 每 min催化 1μmol底物的酶量 ? Katal（ Kat） ： 每 s催化 1mol底物的酶量 (3)酶的比活力 (specific activity) ? 酶的比活力 P102——量度酶純度 比活力 = 總活力單位 總蛋白 mg數(shù) = U(或 IU) mg蛋白 ?選材 ?破碎細胞 （ 研磨 、 搗碎 、 凍融 、 自溶等 ） ?抽提 ?分離純化 （ 鹽析法 、 有機溶劑沉淀法 、 親和層析法等 ） 酶的分離提純步驟及測定記錄 步驟 總體積 蛋白質(zhì)總量 蛋白質(zhì)濃度 酶活力 總活力 比活力 (ml) (mg) (mg/ml) (單位 /ml) (單位 ) (單位 /mg蛋白 ) 粗提液 1000 12022 5 50℃ 變性 1000 8000 分級沉淀 250 750 離子交換 25 225 其它步驟 4 3 計算方法 12 8 3 9 蛋白質(zhì)總量 /總體積 5000 4800 2750 2200 150 總體積酶活力 50 總活力 蛋白質(zhì)總量 。 ? 酶分子被其它的酶催化進行共價修飾，從而在活性形式與非活性形式之間相互轉(zhuǎn)變。 (適應酶 ) ? 根據(jù)酶的合成與代謝物的關系，把酶相對地區(qū)分為結構酶和誘導酶 。 當 [S]=9,v=90%Vmax。 當 [S]=9時 ,v=90%Vmax。 當 [S]=9時 ,v=90%Vmax。 非底物分子的調(diào)節(jié)物對別構酶的調(diào)節(jié)叫異促效應 . ? 別構酶具有協(xié)同效應 酶的一個亞基結合了底物 (或效應物 )后 ,會使其他尚未結合底物 (或效應物 )的亞基對底物的親和力發(fā)生影響 ,這種越過亞基的相互作用稱為協(xié)同效應 ， 有正協(xié)同效應和負協(xié)同效應 。 ? 具有別構效應：別構酶與效應物結合后，隨著構象的變化 ,其催化活性也相應發(fā)生變化的現(xiàn)象稱為別構效應 (變構效應 )；引起別構效應的物質(zhì)稱效應物 (調(diào)節(jié)物 )，有正效應物和負效應物。 ? 具有別構效應：引起別構效應的物質(zhì)稱效應物 (調(diào)節(jié)物 )， 有正效應物和負效應物 ；別構酶與效應物結合后，隨著構象的變化，其催化活性也相應發(fā)生變化的現(xiàn)象稱為別構效應 (變構效應 )。 V＝ Vmax[S] ( 1+ ) [I] Ki (Km+ [S]) 1 V ＝ （ 1 + ） Km Vmax [S] 1 + Vmax 1 [I] Ki （ 1 + ） [I] Ki 競爭性抑制劑 非競爭性抑制劑 八、 別構酶、誘導酶及共價調(diào)節(jié)酶 ? 在多酶體系中反應序列的第一步往往是整個反應的限速步驟，反應的終產(chǎn)物往往起到特異性的抑制作用叫終產(chǎn)物或反饋抑制 ； ? 某些酶的相應部位與底物或底物以外的物質(zhì)非共價結合后，能改變其自身的分子構象從而影響酶本身的活性，這些酶稱別構酶 。 ? 如某些金屬離子（ Cu2+、 Ag+、 Hg2+） 以及 EDTA等，通常能與酶分子的調(diào)控部位中的 SH基團作用，改變酶的空間構象，引起非競爭性抑制。 琥珀酸 延胡索酸 戊二酸 草酰乙酸 丙二酸 動力學方程式及雙倒數(shù)圖 P9495 ? 加入競爭性抑制劑后， Km變大， Vmax不變 ， 酶促反應速度減小。 ? 根據(jù)抑制劑與底物的關系，可逆抑制可分為 2種類型：競爭性抑制、非競爭性抑制 ① 競爭性抑制 ? 這類抑制的抑制劑結構與底物的結構相似，它有同底物競爭與酶的活性部位結合的作用，因而妨礙底物與酶結合，減少酶的作用機會 P89。 ?常見的不可逆抑制劑 重金屬離子、有機汞、有機砷化合物、碘乙酸、碘乙酰胺等 (對 SH酶 )；氰化物 (與Fe2+結合 )；有機磷化合物（對含 SerOH的酶）。 P93 ? 能夠引起酶的抑制作用的化合物稱為抑制劑。 對酶促反應速度的影響 ? 酶的失活：因酶蛋白變性而引起酶活力喪失的現(xiàn)象。 按分子大小分為： ① 金屬離子或其它無機離子 ② 有機分子 （ SH酶的還原劑 、 EDTA等 ） ③ 蛋白質(zhì)分子 （ 如腸激酶之對胰蛋白酶 ） 酶分子中的金屬離子 ? 酶的輔助因子 ? 與酶蛋白結合緊密，在酶促反應中傳遞電子，原子或功能團，如 Fe2+/ Fe3+ 、 Cu+/Cu3?、Zn2+ 、 Mn2+、 Co2? 等 。 10 20 30 40 50 60 70 80 90020406080100T e m p e r a t u r e OCRelative Activity (
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1