實驗八親和層析分離純化蛋白質(14)-文庫吧資料
2025-01-24 19:31本頁面
【正文】 1．洗凈玻璃板，用蒸餾水沖洗干凈后吹干，安裝制膠器。 ? 電泳時， Cl快， Gly慢，在快慢離子間形成了一個低離子濃度的高壓區(qū)，區(qū)內的蛋白質加速移動。 ? 蛋白質的遷移速度只取決于分子大小。 8．將讀數最大的一管用于 SDSPAGE分析。 6． PBS 緩沖液洗柱子 3遍，關閉出口。 4．加入 1ml 洗脫液。 2．將混合蛋白質溶液加到柱子中。 注意：始終保持柱內的液面高于 GST樹脂。 3．用滴管取 ml GST填料，加入柱子中。 （四）裝 GST柱子 1．清洗和裝好層析柱，封閉出口。 2．分取 50 uL上清液， 4℃ 保存。 （菌液始終保持在冰浴中） 3．重復 810遍，直至菌液清澈。 （二）細胞破碎 1．倒掉上清，加 30 ml PBS緩沖液懸浮菌體。 2． 5000 rpm離心 5 min，倒掉上清。實驗八 親和層析分離純化目標蛋白 實驗目的 ? 掌握 GST親和層析分離純化目標蛋白的原理和實驗方法（第一部分） ? 掌握 SDSPAGE檢測目標蛋白原理和方法（第二部分） 第一部分 G
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