實(shí)驗(yàn)三葡聚糖凝膠柱層析純化蛋白質(zhì)-文庫(kù)吧資料
2025-05-23 01:47本頁(yè)面
【正文】 含三個(gè)組分）： ① 藍(lán)色葡聚糖 2021， ② 溶菌酶， ③ Trp 上樣量： 。 常用 ％ 疊氮鈉 或 20%乙醇溶液 作防腐劑 。 、凝膠層析法的應(yīng)用： 生物分子的分離提純； 測(cè)定高分子物質(zhì)的分子量 ； 脫鹽工具； 高分子溶液的濃縮 ； 用于去除熱原物質(zhì) 。 今天洗脫流速控制在 1ml/min。流速過(guò)快，會(huì)使色譜峰變形， 流速過(guò)慢，樣品擴(kuò)散傾向加劇。 今天選用的是 1cm 30cm的層析柱。 今天的上樣量 （ ） 約為 1%柱床體積 。 、樣品的體積、粘度： 分析分離時(shí) ， Vsample=14%Vbed； 制備分離時(shí) ， Vsample=1030Vbed. 相對(duì)粘度 樣品液粘度與洗脫液粘度的比值 。 Kd值的計(jì)算： Kd=(VeVo)/Vi 幾個(gè)特征 Kd值意義： ① Kd=0,則 Ve=Vo ， 全排阻 ； ② Kd=1,則 Ve=Vo+Vi , 全摻入 ； ③ 0＜ Kd1,則 Ve=Vo+Kd Vi ， 部分摻入 ； ④ Kd1，則 VeVo+Vi ，如某些芳香族化 合物（ Phe,Tyr,Trp等）， Sephadex G25對(duì)它們 有吸附作用 。 ③ 當(dāng)樣品體積很大時(shí)，洗脫體積計(jì)算可以從應(yīng)用樣品開(kāi)始到洗脫峰升高的彎曲點(diǎn)（或半高處）。
畢業(yè)設(shè)計(jì)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1