凝膠層析原理ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-01-23 16:25本頁(yè)面
【正文】 體積 ， 它可從干凝膠顆粒重量和吸水重量求得 。 凝膠層析過程的數(shù)理關(guān)系 柱床體積 (VT) VT = 1/4 ?D2h 洗脫體積 （ Ve） ? 即欲分離物質(zhì)通過層析柱洗脫下來(lái)所需洗脫液的總體積 。n, Mosbach, 1962) 排阻層析 （ exclusion chromatography） (Pedersen, 1962) 指混合物隨流動(dòng)相經(jīng)固定相的層析柱時(shí)，混合物中各組份按其分子大小不同而被分離的技術(shù)。 純化生物物質(zhì)的純度 取決于混合物中各組分 K 值的差異程度 混合物中各組分若 K值相差較大 , 則能較易地把混合物中的生物物質(zhì)分離 。 有選擇性 ， 吸附速度較慢 ， 不易解吸 （ 1）吸附層析 在單位時(shí)間內(nèi)被吸附于吸附劑的某一表面積上的分子和同一單位時(shí)間內(nèi)離開此表面的分子之間可以建立動(dòng)態(tài)平衡，吸附層析就是不斷地產(chǎn)生平衡與不平衡，吸附與解吸 吸附層析 ? 常用的吸附劑 硅膠 堿性 :碳?xì)浠衔? 中性 :醛 ,酮 ,醌 ,酯 ,內(nèi)酯酸性 :酸性色素 ,醛 ,酸 聚酰胺 氧化鋁 活性炭 磷酸鈣 粉末 :吸附力大 ,流速慢 顆粒 :吸附力中 ,流速易控 錦綸 活性炭 :吸附力弱 錦綸 66或錦綸 6 酰胺基團(tuán) 對(duì)酚 ,DNP氨基酸 , 醌 ,羧酸 氫鍵：羥基與羰基 唯一用于生物活性物質(zhì) 羥基磷灰石 （ 2） 分配層析 —— 利用不同組分 在流動(dòng)相和固定相中的分配系數(shù)不同 而進(jìn)行分離的方法 。 層析的發(fā)展 1931年 ， Kuhn采用柱色譜分離了類胡蘿卜素 1941年 ， Martin和 Synge提出分配色譜法 1944年 ， Martin等又提出紙色譜法 1952年 ， Martin和 James發(fā)明了氣液色譜法 1955年 ， 第一臺(tái)商品氣相色譜問世 ， 標(biāo)志著現(xiàn)代 色譜分析的建立 1956年 ， Stahl系統(tǒng)研究了薄層色譜法 (TLC) 1958年， Stein和 Moore研制出氨基酸分析儀，確定了核糖核酸的分子結(jié)構(gòu) 1967年， Horvvath和 Huber等研制了高效液相色譜 (highperformance liquid chromatography,HPLC)儀 1975年， Small等提出離子色譜 20世紀(jì) 80年代，超臨界色譜 20世紀(jì) 90年代，毛細(xì)管電泳（ 1809年 Re?ss第一次電泳實(shí)驗(yàn)） 21世紀(jì)，聯(lián)用技術(shù)、大分子色譜分離、制備色譜可望取得更大的發(fā)展 層析法進(jìn)行時(shí)有
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