生物顯微技術(shù)第五章原位雜交-文庫(kù)吧資料
2025-01-22 18:45本頁(yè)面
【正文】 雜交的溫度 時(shí)間： 16－ 20小時(shí) ? 探針的濃度 ： 應(yīng)用最低探針濃度以達(dá)到與靶核苷酸的最大飽和結(jié)合度。 L值可用公式計(jì)算： L＝ B／ I。 L用以校正雙鏈長(zhǎng)度對(duì) Tm的影響。 ? F：是由甲酰胺引起的 Tm下降常數(shù)，在 DNA： DNA、DNA： RNA和 RNA： RNA雜交中， F值分別為 、 。 DNA： DNA 10 DNA： RNA 5 RNA： RNA 0 ? ％ GC：雜交體中 G十 C堿基的百分比。 甲酰胺可降低雜交 Tm： 反應(yīng)液中每增加 1%的甲酰胺濃度， Tm值可降低 ℃ 。 雜交 雜交的溫度 Tm： 能使 50%的核苷酸變性解鏈所需的溫度，叫解鏈溫度或融解溫度（ melting temperature, 簡(jiǎn)稱(chēng)）。 ? 用特異性的細(xì)菌或病毒的核酸作為探針對(duì)組織或細(xì)胞進(jìn)行雜交，以確定有無(wú)病原體的感染。 應(yīng)用 ? 特定的核酸序列在染色體中的精確定位。 優(yōu)點(diǎn) ? 不需要從組織中提取核酸，對(duì)組織中含量極低的靶序列具有極高的敏感性。原位雜交組織化學(xué) 核酸分子雜交技術(shù) 固相雜交 : ? 菌落原位雜交（ colony in situ hybridization） ? 斑點(diǎn)雜交法（ Dot blot） ? Southern印跡雜交（ Southern blot） ? Northern印跡雜交（ Northern blot） ? 組織原位雜交（ Tissue in situ hybridization） 液相雜交 定義： 特定標(biāo)記的
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