基因工程工具酶ppt課件-文庫吧資料
2025-01-14 04:51本頁面
【正文】 CCXXXXXX 3’ 3’ XXXXTCTAGGXXXXXX 5’ BamH I Bgl II 五、限制性內(nèi)切酶反應(yīng)系統(tǒng) （一）底物 DNA 含有蛋白質(zhì)、醇等雜質(zhì)降低酶活性； 切割線狀 DNA的效率高于切割超螺旋DNA。 注意 ：由同尾酶產(chǎn)生的粘性末端序列很容易重新連接，但是兩種同尾酶消化產(chǎn)生的粘性末端重新連接形成的新片段將不能被該兩種酶的任一種所識別。 同尾酶 isocaudamers ： 來源不同，識別的核苷酸靶序列也不相同，但切割后 DNA分子產(chǎn)生的粘性末端相同的限制性核酸內(nèi)切酶。 如： HpaⅡ 和 MspⅠ 均可切割 C↓CGG。 三種酶切末端 ? 平齊末端（ 如 SmaⅠ 、 AluⅠ 、 HaeⅢ ） 5’GG CC3’ 3’CC GG5’ 5’GG CC3’ 3’CC GG5’ ? 5’粘性末端（ 如 EcoR Ⅰ ） 5’GAATTC3’ 3’CTTAAG5’ 5’G AATTC3’ 3’CTTAA G5’ ? 3’粘性末端（ 如 Pst Ⅰ ） 同裂酶和同尾酶 同裂酶 isoschizomers ： 來源不同的限制酶識別相同的核苷酸靶序列 。線狀 DNA分子，若某種限制性內(nèi)切酶有 n個識別序列，則完全切割后可獲得 n+1個片段。 也有少數(shù)在識別序列的兩端 ,如 ↓GATC, CATG ↓。 ? 在切割位點處，限制性核酸內(nèi)切酶的作用下磷酸二酯鍵會發(fā)生水解效應(yīng)，從而導(dǎo)致鏈的斷裂。 識別序列 ? 識別序列有連續(xù)的 （ 如 GATC） 和間斷的 (如GANTC)兩種 ， 它們都呈回文結(jié)構(gòu) 。限制性核酸內(nèi)切酶就是從其識別序列內(nèi)切割 DNA分子的，因此這些識別序列又叫核酸內(nèi)切酶的切割位點或靶序列。 限制性內(nèi)切酶作用過程 點擊播放 三、限制性內(nèi)切酶的識別序列 限制性內(nèi)切酶在雙鏈 DNA上識別的特殊核苷酸序列稱為識別序列。 前三個字母用斜體，其他字母用正體。 一、限制性內(nèi)切酶的命名和種類
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1