【正文】 鐘內(nèi)完成 200個(gè)樣品的數(shù)據(jù)處理（得到溶出量），每一溶出量數(shù)據(jù)直接從軟件中拷貝出、粘貼至 Excel軟件中、畫出溶出曲線圖的全部過程。 (9) 如采用超高速液相測定，效果自然更好！但由于色譜柱粒徑較小，樣品液若不過濾，恐堵塞色譜柱，建議試驗(yàn)時(shí)驗(yàn)證后予以酌情考慮。 因?yàn)樵谌狱c(diǎn)位置處，吸取這么小體積攜帶出輔料的可能性極小，即便有少量存在，靜置后使其沉淀，就不會(huì)影響到測定，更不會(huì)堵塞色譜柱。 如何準(zhǔn)確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品 (7) HPLC法測定時(shí)取樣量 1~2ml即可。且對于小規(guī)格制劑，為提高精密度，縮短保留時(shí)間，使色譜峰 “變細(xì)變尖（銳） ”更為重要。 (6) 進(jìn)樣量可依據(jù)對照品溶液的精密度予以靈活調(diào)節(jié)。色譜柱最高承受溫度為 80℃ ，在60℃ 以下操作沒有問題。如此，雖然有雜質(zhì)與主成分未能分離的擔(dān)憂，但考慮到樣品已被稀釋 1000倍（溶出介質(zhì)體積通常為 900~1000ml），在此條件下，存在的微量雜質(zhì)響應(yīng)值已微乎其微，即便有所表現(xiàn)，其影響對于結(jié)果而言亦是完全在誤差范圍之內(nèi)，可忽略不計(jì)。一者可排除輔料 /薄膜衣 /腸溶衣 /膠囊殼等易對紫外測定產(chǎn)生干擾的情況；二者，由于線性范圍寬，樣品均可直接進(jìn)樣測定，省略了紫外測定要求吸收度值在 ~、樣品需稀釋的繁瑣步驟，大大提高了工作效率。第 1份樣品抽取 10~20ml后，過濾使濾膜吸附飽和，并將濾液沿溶出杯壁緩慢注回，再抽取所需體積（如 HPLC法、1~2ml即可）即可，其后所有樣品無需再棄去初濾液，直接收集。 ? 目的是防止劑量傾瀉（ dosedumping）現(xiàn)象發(fā)生 ！ ? 目的是觀測仿制制劑是否能像原研制劑那樣、收放自如！ 某一原研制劑 添加不同有機(jī)溶劑時(shí)的溶出曲線 某一仿制制劑 添加不同有機(jī)溶劑時(shí)的溶出曲線 紅色為原研制劑；藍(lán)色為仿制制劑 (11) 投樣方式（槳板法） 采用每間隔固定時(shí)間（如 30秒）投樣。 ? 日本 在最具區(qū)分力的溶出介質(zhì)中，還要增加 100或 200 轉(zhuǎn)比較研究；腸溶制劑還要增加 5倍后的比對研究。 體外溶出曲線比對的附加要求 ? 還要有添加酶液溶出介質(zhì)的研究。 體外溶出曲線比較的具體操作 f1因子和 f2因子的判定標(biāo)準(zhǔn) f1因子應(yīng)介于 0~15； f2因子應(yīng)至少大于 50（ 65）。 對于本身變異性較大的品種， n可增至 12~18。 體外溶出曲線比較的具體操作 ? 對于所選時(shí)間點(diǎn)溶出結(jié)果變異系數(shù)的規(guī)定 ?（精密度的代表性）： 對于 原研制劑 以上所選用的第一時(shí)間點(diǎn)溶出結(jié)果變異系數(shù) (RSD)應(yīng)不得過 20%，自第二時(shí)間點(diǎn)至最后時(shí)間點(diǎn)溶出結(jié)果變異系數(shù) (RSD)均應(yīng)不得過 10%。 因 f2因子計(jì)算結(jié)果有依賴于比較時(shí)間點(diǎn)個(gè)數(shù)的特性（列舉 Excel軟件計(jì)算具體實(shí)例，本人可提供）。 n對于計(jì)算結(jié)果的貢獻(xiàn)尤甚！ ???????????????????????n)(11005 0 l o gn1i2ttTRf2? 比較時(shí)間點(diǎn)的確定 (1) 溶出量在 85%（緩控釋制劑 80%）以上的時(shí)間點(diǎn)僅能選取一個(gè)。 體外溶出曲線比較的具體操作 F1 因 子 計(jì) 算 公 式 Rt和 Tt分別表示兩制劑在第 n個(gè)取樣點(diǎn)的平均累積溶出率。 ? 對應(yīng)于參比制劑平均溶出率分別為 60％和 85％兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，兩者平均溶出量差均在 177。 15%范圍內(nèi)。 論斷：對于創(chuàng)新藥、謹(jǐn)慎考慮，酌情申報(bào)！ 體外溶出試驗(yàn)參數(shù)的“極端條件” ? 原研制劑曲線類型 參比制劑 15分鐘溶出量達(dá) 85%以上時(shí) 無需采用 f1和 f2因子比較。 有機(jī)溶劑：對比剖析時(shí)可加入，但最終擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)決不允許添加。 ? 絕非用該數(shù)據(jù)來推導(dǎo)溶出度試驗(yàn)用體積和溶出介質(zhì)中添加的表面活性劑濃度！ 溶 解 度 的 測 定 意 義 ? 對原研制劑的剖析： 試驗(yàn)參數(shù)的放寬 ? 在某溶出介質(zhì)中最終溶出量未達(dá)要求、無法進(jìn)行比較時(shí) ? 精密度差、必須提高精密度以使數(shù)據(jù)更具代表性時(shí) 轉(zhuǎn)速：增加至 75~100轉(zhuǎn)。 漏槽條件對溶出度試驗(yàn)的意義 ? 講述如何測定溶解度（日本橙皮書中收載）。 漏槽條件對溶出度試驗(yàn)的意義 現(xiàn)今，溶出介質(zhì)體積已固定、通常選用900~1000ml。 體外溶出曲線比較的具體操作 漏漕條件的定義：溶出介質(zhì)體積要大于溶解藥物主成分（該量為制劑最大規(guī)格量）所需體積的至少3倍量，以保證藥物溶出不受其溶解性的顯著影響。 溶出介質(zhì) 不建議采用小杯法， 一律采用 900ml或 1000ml。 體外溶出曲線比較的具體操作 ? 對原研制劑的剖析： 裝置與轉(zhuǎn)速 片劑：槳板法 /50轉(zhuǎn)起始。 當(dāng)連續(xù)兩點(diǎn)溶出率均達(dá) 90%（緩控釋制劑為85%）以上、且差值在 5%以內(nèi)時(shí)，試驗(yàn)則可提前結(jié)束。 在日本橙皮書中，就羅列了該藥物在各種溶出介質(zhì)中的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。 (2) 表面活性劑加入時(shí)，一定采用煮沸法配制，絕對不要采用超聲法（鹽的溶解方式亦如此）。 體外溶出曲線比較的具體操作 ? 溶出介質(zhì)配制方法： (1) 各國不盡相同、建議根據(jù)原研制劑生產(chǎn)廠商的國別而定。 (3) 無論何種制劑都不建議采用 ；如確有必要，應(yīng)提供充足理由。 ，以更好地把握該制劑的溶出特性。 (2) 如該藥物 pKa177。 ＃與美國作法有所不同：美國統(tǒng)一采用 、 、 。 ? 選用的樣品應(yīng)在重量 /裝量差異所規(guī)定范圍的 1/2內(nèi) 。 對仿制制劑樣品的要求 ? 生產(chǎn)規(guī)模 10萬單位或今后最大生產(chǎn)規(guī)模的 1/10。 也許在低轉(zhuǎn)速、或是在其他介質(zhì)中，差異就會(huì)顯示出來了！ 兩個(gè)不同藥廠生產(chǎn)的 氟芬那酸膠囊 pH 介質(zhì)中，槳板法、 100轉(zhuǎn) 血 藥 濃 度 不相關(guān) 造成以上不相關(guān)的原因： 也許是生物等效性試驗(yàn)的受試者體內(nèi)環(huán)境正常；對于體內(nèi)環(huán)境非正常者，尤其是胃酸缺乏者，差異就會(huì)顯示出來了！ 0 20 40 60 80 100 0 60 120 180 Time (h) % dissolved C D 0 2 4 6 8 10 0 2 4 6 8 Time (h) Concentration (ug/ml) Capsule C Capsule D 對參比制劑樣品批號(hào)的遴選 ? 原則上從市場上購買來不同時(shí)間點(diǎn)的不同批號(hào)，分別測定，觀測溶出曲線波動(dòng)情況。 (1)已幫助眾多企業(yè)尋找到這種差異； (2)越來越多的企業(yè)開始進(jìn)行二次開發(fā)； (3) 介紹今年“國家評價(jià)性抽驗(yàn)工作”結(jié)果； (4) USP七種溶出度試驗(yàn)法的由來。 因 BE試驗(yàn)是采用年輕男性、是人體的最佳狀態(tài)、這也是 BE試驗(yàn)的局限性所在！ 而原研制劑在臨床階段經(jīng)過大量病例驗(yàn)證。給予仿制藥廠一定時(shí)間、更改處方與工藝，使多條溶出曲線與原研品一致！ 體內(nèi)外相關(guān)性的最新理解 (Ⅱ ) pH 7 溶出度 pH 1 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 . . 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 Time (min) 0 2 4 6 0 5 10 15 20 25 Time (h) 0 2 4 6 0 5 10 15 20 25 胃酸正?；颊? 預(yù)測體內(nèi)血藥濃度 實(shí)測體內(nèi)血藥濃度 胃酸缺乏患者 不同廠家生產(chǎn)的 甲硝唑片 體外溶出度與體內(nèi)學(xué)藥濃度的相關(guān)性 A藥廠產(chǎn)品 B藥廠產(chǎn)品 0 1 2 3 4 5 6 7 0 10 20 30 40 Time (h) 0 1 2 3 4 5 6 7 0 10 20 30 40 Time (h) 年 輕 人 老 年 人 pH 兩不同藥廠生產(chǎn)的 地西泮片 體外溶出度試驗(yàn)與體內(nèi)血藥濃度的相關(guān)性 0 20 40 60 80 0 10 % dissolved pH 0 20 40 60 Time (min) A B 胃酸缺乏者 胃酸正常者 0 50 100 150 200 250 300 350 0 2 4 6 Time (min) Concentration (ng/ml) 0 2 4 6 Time (min) Time (min) A B ? 日本規(guī)定： 如不一致、 BE試驗(yàn)受試者必須酌情進(jìn)行針對性選??！ 故日本 《 橙皮書 》 中，在已結(jié)束的 586個(gè)品種中、約有 10個(gè)品種為兩套溶出曲線。 國家新藥審評中心 2022年 4月 12日最新發(fā)布 ? 體外不一致 → 體內(nèi)多數(shù)不一致、 BE試驗(yàn)成功率低！ 《 日本藥品品質(zhì)再評價(jià)工程 》 就是充分利用了該點(diǎn)。 ? 我國新藥審評中心 2022年 9月發(fā)布了“關(guān)于仿制藥 通用技術(shù)文件 （簡稱 :CTD）申報(bào)資料提交要求征求意見的通知”，其中明確規(guī)定“需進(jìn)行多溶出介質(zhì)中的比對研究”！ 各國對仿制藥申報(bào)要求 ?《仿制藥藥學(xué)研究主要信息匯總表》 中寫到： 需提供自研產(chǎn)品與已上市對照藥品在處方開發(fā)過程中進(jìn)行的質(zhì)量特性對比研究結(jié)果，例如： （ 1）口服固體制劑的溶出度：樣品批號(hào)、對照藥品批號(hào)和生產(chǎn)廠；溶出條件，取樣點(diǎn)；說明自研產(chǎn)品與對照藥品在不同溶出條件下的溶出曲線比較研究結(jié)果，推薦采用 f2相似因子的比較方式。并根據(jù)藥物特性，如 BE試驗(yàn)需分別進(jìn)行“進(jìn)食”和“禁食”兩種狀態(tài)，則體外溶出研究還需針對性進(jìn)行加消化酶溶出介質(zhì)中的比對試驗(yàn)。 ? 機(jī)械參數(shù)的選擇一定要具有區(qū)分力。 ? 如果某制劑，僅在 pH 出較好，在 pH ，結(jié)果也許只能保證對于胃酸正常的患者吸收良好，而對胃酸缺乏的患者可能就會(huì)很差了。 ? 優(yōu)質(zhì)藥品，可在任何體內(nèi)環(huán)境下 （即 pH值的寬范圍內(nèi)） 都有一定的崩解、溶出，即對任何人群均有較高的生物利用度。 ? 一個(gè)低品質(zhì)藥品 （ 如仿制制劑 ） ， 可能只會(huì)對患有該疾病的某一部分人群有效 （ 如體內(nèi)環(huán)境正常者 ） ， 而對另一部分病人療效甚微 （ 如胃酸缺乏者 、 年老體弱者 ） ， 即有效性低 。 ? 結(jié) 果： 通過對溶出度（釋放度）試驗(yàn)的嚴(yán)格要求，大大推動(dòng)了制藥企業(yè)對制劑工藝的充分、詳盡研究；提升了藥品的內(nèi)在品質(zhì)和臨床療效！ 我們已經(jīng)走得太遠(yuǎn)，以至于忘記了為什么而出發(fā)。 ● 工作理念 —— 通過控制藥品質(zhì)量的決定性、關(guān)鍵性評價(jià)指標(biāo)， “ 一針見血式地 ” 實(shí)現(xiàn)國家管理部門的各種職能！ ? 目 的： 保證口服固體制劑對于不同患者均能具有較高的生物利用度；使不同企業(yè)生產(chǎn)的同一藥品均能具有相同的生物等效性 。 因此，該項(xiàng)技術(shù)愈來愈受到各方面的矚目與期待！ —— 絕非一個(gè)介質(zhì)、一個(gè)時(shí)間點(diǎn)、一個(gè)限度的測定！ 溶出度核心理念 ? 多條溶出曲線是 —— 口服固體制劑的 “