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qpcr實時熒光定量pcr-文庫吧資料

2025-05-23 23:14本頁面

　　

【正文】依據(jù)反應(yīng)中所選熒光物質(zhì)的不同 ,實時熒光定量 PCR的化學(xué)反應(yīng)原理通常分為熒光染料和熒光探針兩種 : (1) SYBR熒光染料 :SYBR是一種與雙鏈 DNA小溝結(jié)合的染料。其中橫坐標(biāo)代表起始拷貝數(shù)的對數(shù)，縱坐標(biāo)代 Ct值。 Ct(cyclethreshold)值的含義是 :每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達到設(shè)定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。首先需設(shè)定一定熒光信號的域值 ,一般這個域值是以 PCR反應(yīng)的前 15個循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號 ,熒光域值的缺省設(shè)置是3~15個循環(huán)的熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的 10倍。在 PCR反應(yīng)早期 ,產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別 ,而后熒光的產(chǎn)生進入指數(shù)期、線性期和最終的平臺期。 PCR技術(shù)原理及特點實時熒光定量 PCR是將

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