【正文】 ， 熱值為 8500～ 10000kcal/m3。 建設(shè)周期總時(shí)間 工程建設(shè)周期自 項(xiàng)目建議書 審批后至全部投產(chǎn)定為 24 個(gè)月。 第四部分項(xiàng)目實(shí)施方案 項(xiàng)目開發(fā)計(jì)劃 本工程分以下幾個(gè)階段進(jìn)行：前期規(guī)劃階段 、 設(shè)備及材料采購(gòu)階段、 裝置安裝階段、人員培訓(xùn)階段、調(diào)試投產(chǎn)階段。有一點(diǎn)非常難做到，就是我們還要努力打開國(guó)外市場(chǎng)，從而獲得更大的利潤(rùn)，不斷的提高我公司的在醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)中競(jìng)爭(zhēng)能力。所以，在該產(chǎn)品銷售初期會(huì)占有比我們大的份額，但是由于我廠的人才管理模式、企業(yè)精神和對(duì)疫苗生產(chǎn)的多年經(jīng)驗(yàn)會(huì)在相當(dāng)短的時(shí)期內(nèi)適應(yīng)該產(chǎn)品市場(chǎng)， 并打開廣闊的銷路，從而與其平分該地區(qū)的市場(chǎng) 。尤其是在經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)人口的集中，流動(dòng)的速率快，卡介苗的需求量也大。并且他們的生產(chǎn)技術(shù)上比我們先進(jìn)，國(guó)外的基礎(chǔ)研究時(shí)間比我們時(shí)間長(zhǎng)，在有些領(lǐng)域我們知道的還很少。現(xiàn)在每年的入伍人數(shù)也不斷在上升，根據(jù)要求也要接種卡介苗。在這年的 9 月大約有 1800 萬名嬰兒降生，據(jù)國(guó)家民政部門統(tǒng)計(jì)，奧運(yùn)會(huì)期間大約有 1000 萬對(duì)新人結(jié)婚，那么在 09 年嬰兒的降生率在 08年基礎(chǔ)上將上升 25%，由于居民生活水平顯著提高，對(duì) 卡介苗 的 需求 不斷增長(zhǎng)，加上城鎮(zhèn)大多數(shù)家庭現(xiàn)在只有一個(gè)孩子， 家長(zhǎng)更是細(xì)心的照顧，不敢有一點(diǎn)馬虎。據(jù)中國(guó)第五次人口普查發(fā)布的統(tǒng)計(jì)公告，中國(guó) 0－ 3歲新生兒用品家庭月消費(fèi)為 900多元，加上廣大農(nóng)村城鎮(zhèn)地區(qū)嬰幼兒，中國(guó)的嬰幼兒市場(chǎng) ， 而目前這個(gè)市場(chǎng)卻只開發(fā)了 一小部分。 由于我國(guó)政府對(duì)疾病預(yù)防的投入不斷加大，以及消費(fèi)者越來越多，接受自費(fèi)注射疫苗預(yù)防疾病的觀念，考慮到我國(guó)龐大的人口技術(shù)以及國(guó)內(nèi)疫苗市場(chǎng)正處于剛剛起步階段，因此可預(yù)計(jì)，國(guó)內(nèi)疫苗行業(yè)將會(huì)有很大的成長(zhǎng)空間。 2021 年我國(guó)第二類疫苗市場(chǎng)規(guī)模約 30 億元，預(yù)計(jì)未來以 15%的年增長(zhǎng)率高速增長(zhǎng)，高于全球疫苗市場(chǎng)約 10%的增長(zhǎng)速度。 市場(chǎng)潛力 概念引入期概念引入期 初步發(fā)展期 下滑迷茫期 穩(wěn)定發(fā)展期 快速發(fā)展期 1980 1990 2021 2021 2021 在我國(guó)，疫苗一般分為第一類疫苗（即“計(jì)劃免疫疫苗”）和第二類疫苗（即“有價(jià)疫苗”）兩種。 法律的制定和有效的執(zhí)法對(duì)生物制品產(chǎn)業(yè)是經(jīng)濟(jì) 利益的保障，對(duì)消費(fèi)者是安全和有效性的保障。它具有審核、發(fā)行執(zhí)照、停止運(yùn)營(yíng)生物制品研究和企業(yè)的執(zhí)法權(quán)力。疫苗的研究、生產(chǎn)和接受一切相關(guān)的質(zhì)量檢測(cè)應(yīng)該有專門的部門來執(zhí)行 ，由國(guó)家立法部門頒布一切有關(guān)的法律。美國(guó) FDA 對(duì)疫苗產(chǎn)業(yè)的職責(zé)是制止有害的、不純的、假的、質(zhì)量差的疫苗生產(chǎn)和流通；保證疫苗產(chǎn)品標(biāo)簽的準(zhǔn)確性。在中國(guó)，政府制定疫苗價(jià)格上限來控制企業(yè)對(duì)價(jià)格的壟斷。比如疫苗的價(jià)格統(tǒng)一后，廠家對(duì)偏遠(yuǎn)的疫苗運(yùn)輸實(shí)際是虧損的，這樣政府就要利用公共醫(yī)療場(chǎng)所或配齊私人醫(yī)療設(shè)施保障統(tǒng)一的疫苗服務(wù)的供應(yīng)。 市場(chǎng)銷售有無行業(yè)管制 政府管理市場(chǎng)的原則是讓民眾有統(tǒng)一的、充足的和合理價(jià)格的免疫服務(wù)。保證受試者的安全，盡量的避免不必要的副反應(yīng)，使受試者放心的使用。這樣會(huì)產(chǎn)生很大的副作用，嚴(yán)重時(shí)甚至死亡。入伍新兵大學(xué)新生邊遠(yuǎn)地區(qū)派出人員也應(yīng)列為接種對(duì)象邊遠(yuǎn)地區(qū)兒童和青少年在進(jìn)入城市之前 23個(gè)月應(yīng)接種卡介苗。 預(yù)防重于治療，接種卡介苗可以使人體產(chǎn)生對(duì)結(jié)核病的抵抗力，以預(yù)防結(jié)核病 (俗稱肺癆 )?，F(xiàn)用于治療惡性黑色素瘤，或在肺癌、急性白血病、惡性淋巴瘤根治性手術(shù)或化療后作為輔助治療，均收到一定療效。發(fā)現(xiàn)在以前未能發(fā)現(xiàn)的極少數(shù)或非預(yù)測(cè)事件。疫苗的最佳應(yīng)用；某些高危人群中有效性；長(zhǎng)期效果和安全性監(jiān)控。對(duì)于偶發(fā)疾病及罕見疾病，需調(diào)查整個(gè)群體以保證統(tǒng)計(jì)學(xué)的可信性，但一般研究常局限于分組人群。世界衛(wèi)生組織發(fā)表了關(guān)于疫苗國(guó)際包裝和運(yùn)輸?shù)脑敿?xì)準(zhǔn)則，包括檢測(cè)表格的使用，例如運(yùn)輸物品到達(dá)目的地時(shí)應(yīng)填寫“疫苗到達(dá)報(bào)告”。還有隨機(jī)檢測(cè)和定期再評(píng)估程序，以確保生產(chǎn)的持續(xù)質(zhì)量。 項(xiàng)目產(chǎn)品的可靠性 眾多的規(guī)定能確保疫苗的安全性和質(zhì)量，從精確地起始材料到最后的允許疫苗出廠。 在中間試制階段，生產(chǎn)工藝基本定型，產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)率相對(duì)穩(wěn)定，能放大 生產(chǎn)；有產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、檢定方法 、保存穩(wěn)定性資料，并有效測(cè)定效價(jià)用的參考品或?qū)φ掌罚惶峁┳詸z和中國(guó)藥品生物檢定所復(fù)檢合格，并能滿足臨床研究用量的連續(xù)三批產(chǎn)品；制定較完善的制造檢定試行規(guī)程和使用說明書。 項(xiàng)目的產(chǎn)品成熟性 在實(shí)驗(yàn)室研究階段，生產(chǎn)用的菌毒種的構(gòu)建、選用、培養(yǎng)、遺傳穩(wěn)定性、生物組織的選擇、有效成分的提取、純化及其理化特性、生物特性的分析等研究，取得制造和質(zhì)量檢定的基本條件和方法。檢查項(xiàng)目主要有效價(jià)、色澤、透光度、水分、灰分、 pH等。在發(fā)酵過程中各階段中控制效價(jià)、pH、總氮、氨基氮、總糖、還原糖、總磷、溶解磷等變化和利用的情況。從事卡介苗制造的工作人員及經(jīng)常 進(jìn)入卡介苗制造室的人員必須身體健康經(jīng)Χ射線檢查無結(jié)核病， 為了控制好生產(chǎn)的技術(shù)過程，必須及時(shí)對(duì)各個(gè)階段中間體進(jìn)行必要的分析，便于發(fā)現(xiàn)問題，及時(shí)采取有效措施，以指導(dǎo)生產(chǎn)和保證產(chǎn)品質(zhì)量。 項(xiàng)目的技術(shù)成熟性 根據(jù)生物制品中的要求 生產(chǎn)、檢定用設(shè)施、原料及輔料、水、器具、動(dòng)物等應(yīng)符合“凡例”的有關(guān)要求。在經(jīng)過動(dòng)物模型初步篩選后，結(jié)核新疫苗還需進(jìn)行Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期臨床試驗(yàn)。當(dāng)前的研 究方向技術(shù)難度大，短期內(nèi)難以成功。由于卡介苗具有經(jīng)濟(jì)性等優(yōu)點(diǎn)，因而在今后相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)，其仍然會(huì)在全世界尤其是發(fā)展中國(guó)家繼續(xù)使用。 近期的發(fā)展趨勢(shì) 目前進(jìn)行 BCG 重組 DNA 疫苗、營(yíng)養(yǎng)缺陷型結(jié)核減毒活疫苗、結(jié)核亞單位疫苗及結(jié)核 DNA 疫苗等的研究。可經(jīng)黏膜接種，對(duì)于經(jīng)黏膜感染的病原體，能刺激分泌型免疫球蛋白 A 的疫苗會(huì)產(chǎn)生更好的預(yù)防作用。單次注射劑可產(chǎn)生保護(hù)，有研究表明，若一種疫苗如乙肝疫苗需注射 3針，注射完 3 針的人數(shù)僅為注射 1 針人數(shù)的 60%。耐熱，翡冷鏈運(yùn)輸和保存可顯著降低疫苗的應(yīng)用成本。因此，研制新型的有效疫苗對(duì)防治結(jié)核病已迫在眉睫。同時(shí)，卡介苗接種面臨的新問題：對(duì)純蛋白衍生物接種可誘導(dǎo)遲發(fā)超敏反應(yīng)，造成不能與結(jié)核菌感染相區(qū)別，從而降低純蛋白衍生物的診斷效率；卡介苗是減毒活疫苗，不能用于 HIV 感染個(gè)體；進(jìn)來研究顯示致病性結(jié)核桿菌的一些編碼抗原能夠增強(qiáng) 誘導(dǎo)保護(hù)性免疫，但卡介苗卻缺少編碼這些抗原的基因，在卡介苗減毒和反復(fù)傳代時(shí)缺少而導(dǎo)致免疫效果下降，加上結(jié)核桿菌多重抗藥株在許多國(guó)家（包括中國(guó)）明顯增加，目前全國(guó)大約有 500 萬人感染的是結(jié)核桿菌 MDR；此外，我國(guó)城市農(nóng)村來源的流動(dòng)人口中，有部分人在兒童未接受卡介苗免疫，致使現(xiàn)在對(duì)結(jié)核菌易感染。但是用卡介苗作為載體表達(dá)外源基因的疫苗在Ⅰ期和Ⅱ期臨床試驗(yàn)中的初步結(jié)果不十分理想，主要原因是因?yàn)榭ń槊绫旧頃?huì)在接種疫苗者的體內(nèi)刺激產(chǎn)生很強(qiáng)的針對(duì)分枝桿菌的免疫反應(yīng)，而針 對(duì) 外源性基因編碼的抗原反應(yīng)卻不太理想，這使得重組卡介苗載體疫苗的臨床進(jìn)展緩慢。疫苗誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)可長(zhǎng)達(dá) 5~50 年，因而卡介苗成了表達(dá)外源基因的理想載 體，并以此來構(gòu)建可預(yù)防其他傳染病的重組活載體疫苗。 捷克自 1950 年使用鼠型菌苗 (M菌苗 )， 在布拉格有 69,000 多人分別接種了鼠型菌苗及卡介苗 ,硯察期簡(jiǎn)征明免疫效果完全相同 。因此選擇菌種以及分離卡介菌的鈍菌種簡(jiǎn)題對(duì)提高卡介苗工作質(zhì)量有重 要 關(guān)系 。 Dubos 總結(jié) 了丹麥、巴西、蘇聯(lián)等 n 株卡介菌 ,敲明共培養(yǎng)性能、菌落形態(tài)、免疫效能有很大不同。 近年來國(guó)外有關(guān)卡介苗進(jìn)展情況 ， 越南民主共和國(guó)取得了很大的進(jìn)展。據(jù)最新公布發(fā)改委公布的數(shù)據(jù)，2021 年全國(guó) 醫(yī)藥工業(yè)實(shí)現(xiàn)銷售收入 4271 億元?？ń槊缭谌祟愵A(yù)防和控制結(jié)核病的長(zhǎng)期過程中有巨大貢獻(xiàn)，尤其是對(duì)結(jié)核性腦膜炎和全身粟粒性結(jié)核等重癥結(jié)核病的預(yù)防。由于我國(guó)出現(xiàn)了結(jié)核病“卷土重來”的嚴(yán)峻現(xiàn)實(shí)，早在 1996 年，我國(guó)結(jié)核病疫情管理已由丙級(jí)升為乙級(jí)。 目前我國(guó)屬于全球 22個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一。多人同時(shí)患一種傳染病則為“疫”，人類為了生存，必須防疫。 1996 年， WHO 和國(guó)際防癆肺 病聯(lián)合會(huì)議決定把每年的 3 月 24 日定為“世界防治結(jié)核病日”。因此研制新型的有效疫苗防治結(jié)合并具有重大研究意義。我國(guó)至少有 5 億以上人口感染了結(jié)核菌，每年死于結(jié)核病的約有 25萬之多。全世界每秒鐘就有 1 個(gè)新的結(jié)核病感染者出現(xiàn)，約 1/3 的人感染了結(jié)核菌，現(xiàn)有結(jié)核病人 2021 萬， 300 萬人死于結(jié)核病，是其他傳染病死亡人數(shù)的總和。再現(xiàn)的傳染病中結(jié)核病的回升疫情最為嚴(yán)重。另外對(duì)于卡介苗的研究已經(jīng)不再僅僅拘泥于預(yù)防結(jié)核病原菌 分離 菌株 檢定 菌種 減毒 病毒菌種 配制培養(yǎng)基原 料 滅菌 培養(yǎng)基 培養(yǎng) 菌苗原液 死菌原液 活疫苗 死菌菌苗 殺菌 稀釋檢定 毒素 過濾 類毒素 精制類毒素 吸附精制類毒素 Al(OH)3吸附檢定 卡介苗的制備工藝流程 病，醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)τ诳ń槊绲难芯恳恢痹诶^續(xù)，一直在發(fā)展。 1921 年， Wellhalle首次將此用于一名死于結(jié)核產(chǎn)婦的乳嬰，經(jīng) 6 個(gè)月觀察嬰兒健康無恙，從此開始人群預(yù)防和接種。他們從 1906 年開始采用這個(gè)方法，約每 2～ 3星期傳代一次，前后共傳了 231 代，經(jīng)約 13年時(shí)間，終于獲得一株毒力穩(wěn)定地減毒株。 Calmette 和 Guerin 二人觀察到，如果向培養(yǎng)這株結(jié)合桿菌的甘油土豆培養(yǎng)基中加入牛膽汁。結(jié)核病的特異性預(yù)防是接種卡介苗，我國(guó)規(guī)定新生兒出生后2～ 3 天內(nèi)接種卡介苗， 7歲復(fù)種，在農(nóng)村 12歲時(shí)再?gòu)?fù)種一次。據(jù)世界衛(wèi)生組織（ WHO）報(bào)道，目前全世界約有 1/3 的人口感染結(jié)核分枝桿菌，有 2 億多活動(dòng)性結(jié)核病患者，每年約有 800 萬新增結(jié)核病例發(fā)生，至少有 300 萬人死于結(jié)核病。在行業(yè)快速發(fā)展的背景下，近年來本公司業(yè)務(wù)規(guī)模不斷擴(kuò)大，整體競(jìng)爭(zhēng)力持續(xù)增強(qiáng)。 該項(xiàng)目的國(guó)內(nèi)外發(fā)展現(xiàn)狀 在國(guó)家產(chǎn)業(yè)政策的支持下，我國(guó)疫苗行業(yè)取得了快速發(fā)展。 保存與效期 保存于 2～ 8℃暗處。每只皮下注射相當(dāng)于 50人份的凍干皮內(nèi)注射用卡介苗，每 2 周稱重一次，觀察 6周后，解剖檢查每只動(dòng)物，若肝、脾 、肺等臟器無結(jié)核病變，該批菌苗即可發(fā)出使用。 安全試驗(yàn) 同一代菌種生產(chǎn)的各批凍干卡介苗應(yīng)抽 1 個(gè)亞批做安全試驗(yàn)。此試驗(yàn)可與參考菌苗同時(shí)進(jìn)行（參考菌苗加入試驗(yàn)的目的為檢查培養(yǎng)基的質(zhì)量）。 熱穩(wěn)定性試驗(yàn) 取凍干后菌苗放置 37℃ 28 天進(jìn)行加速失 活試驗(yàn)，測(cè)定活菌數(shù)，與 4℃保存的同一批菌苗同時(shí)進(jìn)行比較，計(jì)算降低的百分離。凍干菌苗活菌數(shù)應(yīng)在 100 萬 /mg 以上。 活菌計(jì)數(shù) 同一代菌種制造的各批凍干卡介苗應(yīng)抽 1 批做干前活菌計(jì)數(shù)。 鑒別試驗(yàn) 每批菌苗須做涂片檢查，抗酸染色應(yīng)是抗酸桿菌。殘余水分不應(yīng)超過 3%。 成品檢定 物理化學(xué)檢查 凍干卡介苗應(yīng)為白色疏松體或粉末狀。干燥完畢后立即進(jìn)行真空封口。 。 分裝 分裝過程中勿使苗混合均勻。 純菌試驗(yàn) 用于制造卡介苗的培養(yǎng)物、原液、以及稀釋后的菌苗均應(yīng)按《生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程》抽樣做純菌試驗(yàn)。加入適量無致敏原保護(hù)液稀釋成一定濃度的原液。 原液制造 收集 培養(yǎng)瓶應(yīng)逐瓶檢查，若有污染、濕膜、混濁等情況應(yīng)廢棄。馬鈴薯培養(yǎng)基上培育的菌種放冰箱保存不超過 2個(gè)月。培養(yǎng)基所用的原料應(yīng)符合《中國(guó)生物制品主要原材料試行標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定。 卡介苗制造的工作人員及經(jīng)常進(jìn)入卡介苗制造室的人員，必須身體健康，經(jīng) X線檢查無結(jié)核病，且以后每年經(jīng) X線檢查 1～ 2 次，可疑者暫不在卡介苗制造室工作，其檢查記錄必須保存?zhèn)洳?。所需?具如高壓鍋、冰箱及玻璃器皿等，均須單獨(dú)設(shè)置并專用。 菌種保存 凍干菌種保存于 2～ 8℃。 免疫力試驗(yàn) 用原代種子批以 1/100 人份的劑量免疫豚鼠，以 103～ 104強(qiáng)毒人型結(jié)核分枝桿菌感染，免疫組與對(duì)照組動(dòng)物的病變指數(shù)及脾臟毒菌分離數(shù)的對(duì)數(shù)值經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，應(yīng)有顯著差異。若未滿 3 個(gè)月試驗(yàn)豚鼠因其他病患死亡應(yīng)解剖檢查，依上法處理。若證明系結(jié) 核病變，該菌種即應(yīng)廢棄。 6 周時(shí)解剖 3只，滿 3個(gè)月將另 3 只豚鼠解劑，檢查各臟器應(yīng)無肉眼可見的結(jié)核病變。 毒力試驗(yàn) 用結(jié)素試驗(yàn)（ PPD 100IU）陰性，體重 300～ 400g 的同性健康豚鼠 6 只，于肌內(nèi)側(cè)皮下各注射 1ml 菌液（ 10mg/ml），注射前稱體重，注射后每周觀察 1次注射部位及局部淋巴結(jié)的變化。在雞蛋培養(yǎng)基上有 突起的皺型和擴(kuò)散型兩類菌落，且?guī)\黃色。在蘇通馬鈴薯培養(yǎng)基上發(fā)育的卡介菌應(yīng)是干皺成團(tuán)略呈淺黃色。培育溫度在 37～ 39℃之間。 菌種檢定 新收到的菌種或新制備種子批應(yīng)進(jìn)行下列檢定。嚴(yán)禁使用通過動(dòng)物的菌種制造卡介苗。菌膜收集后壓平，移入盛有不銹鋼珠瓶?jī)?nèi)，可加入適量稀釋液，低溫下研磨，研磨好的原液稀釋成各種濃度的菌苗。 項(xiàng)目的工藝路線 菌種 傳代檢定（培養(yǎng)特性、毒力試驗(yàn)、安全試驗(yàn)、免疫力試驗(yàn)） 生產(chǎn)培養(yǎng)（ 37~39℃ 培養(yǎng)一段時(shí)間） 收菌 合并 原液檢定（純菌試驗(yàn)、濃度測(cè)定） 半成品配置（稀釋、加速干保護(hù)劑） 檢定（純菌試驗(yàn)、濃