【正文】 注入２～３毫升清水于管中，加幾滴５％福爾馬林溶液，置于２４～２６℃恒溫箱中，培養(yǎng)１５～２０天。加入清水，經(jīng)攪勻后，再行離心，蟲卵比水的比重大，因而下沉于管底。（注意：加入食鹽水量不得少于沉淀物的２０倍）。經(jīng)２５００轉(zhuǎn) /分離心３分鐘后，倒去上清液。 ２．過濾 倒去沉淀上面的清水，用６０孔燉口寸金屬篩子過濾于另一５００毫升錐形量杯中，棄去阻留在篩上的泥渣。用玻璃棒攪拌后靜置之。然后放于冰箱內(nèi)，以防微生物的繁殖和抑制蛔蟲卵的發(fā)育。然后，將樣品裝入廣口瓶中，貼上標(biāo)簽，標(biāo)明樣品號(hào)碼、醫(yī)院名稱、采樣日期和處理前或處理后的情況等。攪拌均勻，并挑去固體夾雜物，再從中取出５００克置于塑料袋或其他容器中，帶回實(shí)驗(yàn)室。 五污泥蛔蟲卵的檢驗(yàn)方法 一、污泥樣品的采集： 先把泥堆盡量劃為四等份，而后在每份的中間，用鐵鍬或小鏟各采污泥約５００ 中國最龐大的下資料庫 (整理 . 版權(quán)歸原作者所有 ) 第 13 頁 共 26 頁 克。按陽性管數(shù)查糞大腸菌值檢索表（附表１．２）即得出每升（１０００克）糞大腸菌值。置于４４℃恒溫箱培養(yǎng)２４小時(shí)。 １．伊紅美蘭培養(yǎng)基上的菌落色澤； （１）深紫黑色，具有金屬光澤的菌落； （２）紫黑色，不帶或略帶金屬 光澤的菌落； （３）淡紫紅色，中心色較深的菌落； ２．品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上的菌落色澤； （１）紫紅色，具有金屬光澤的菌落； （２）深紅色，不帶或略帶金屬光澤菌落； （３）淡紅色，中心色較深的菌落。挑選符合下列特征菌落的一小部分。 二、平板分離：經(jīng)培養(yǎng)２４小時(shí)后產(chǎn)酸產(chǎn)氣及只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的發(fā)酵管，分別劃線接種于伊紅美蘭培養(yǎng)基或品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上。 四污泥糞大腸菌值的檢驗(yàn)方法 中國最龐大的下資料庫 (整理 . 版權(quán)歸原作者所有 ) 第 12 頁 共 26 頁 一、初發(fā)酵試驗(yàn)：按圖１所示將污泥稀釋，分別將污泥樣品接種于裝有１０毫升乳糖膽鹽培養(yǎng)液的內(nèi)有倒管的試管中。置于３７℃恒溫箱，培養(yǎng)６小時(shí)。置于３７℃或４１℃恒溫箱，培養(yǎng)２４小時(shí)。 乙、 污泥 一、樣品處理 用滅菌匙稱取污泥３０克，放入滅菌容器內(nèi)，加入３００毫升滅菌水，充分混勻制成１∶１０混懸液。志賀氏菌屬均為陰性反應(yīng)。對(duì)甘露醇、麥芽糖的發(fā)酵及靛基質(zhì)的產(chǎn)生，則因菌株不同而異。志賀氏菌屬能分解葡萄糖，但不 產(chǎn)氣（福氏志賀氏菌６型有時(shí)產(chǎn)生少量氣體），一般不能分解乳糖及蔗糖，宋內(nèi)氏志賀氏菌對(duì)乳糖及蔗糖遲緩發(fā)酵產(chǎn)酸。 中國最龐大的下資料庫 (整理 . 版權(quán)歸原作者所有 ) 第 11 頁 共 26 頁 ２．志賀氏菌屬：在三糖鐵培養(yǎng)基上，葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，無動(dòng)力，不產(chǎn)生硫化氫，上層斜面乳糖不分解。除雞、雛沙門氏菌和傷寒沙門氏菌的Ｏ型菌株無動(dòng)力外，通常均有動(dòng)力。 生化試驗(yàn)：應(yīng)進(jìn)行葡萄糖、甘露醇、麥芽糖、乳糖、蔗糖、靛基質(zhì)、硫化氫、動(dòng)力、尿素試驗(yàn)。有動(dòng)力者，先與沙門氏菌Ａ～Ｆ群Ｏ多價(jià)血清作玻璃片凝集，凡與多價(jià)Ｏ血清凝集者，再與Ｏ因子血清凝集，以確定其所屬群別，然后用Ｈ因子血清，確定血清型。 ３．每個(gè)平板最少挑?。祩€(gè)以上可疑腸道病原菌菌落，轉(zhuǎn)種三糖鐵或其他鑒別培養(yǎng)基中，置于３７℃恒溫箱；培養(yǎng)１８～２４小 時(shí)。 四、挑選菌落 １．沙門氏菌屬：挑取在ＳＳ平板上，呈無色透明或中間有黑心，直徑１～２毫米的菌落；挑取在ＨＥ平板上，呈藍(lán)綠色，有或無黑心，直徑１～２毫米的菌落；挑取在ＢＳ平板上，呈黑色，培養(yǎng)基周圍具有金屬光澤的菌落。也可接種亞硫酸鉍（ＢＳ）平板，置于３７℃恒溫 中國最龐大的下資料庫 (整理 . 版權(quán)歸原作者所有 ) 第 10 頁 共 26 頁 箱，培養(yǎng)４８小時(shí)。 ２．志賀氏菌屬：吸取樣品處理后的沉淀物２０毫升，加于２０毫升雙料革蘭氏陰性（ＧＮ）增菌液內(nèi)，置于３７℃恒溫箱，培養(yǎng)６小時(shí)。 二、增菌培養(yǎng) １．沙門氏菌屬：吸取樣品處理后的沉淀物２０毫升，加于２０毫升雙料亞硒酸鹽（ＳＦ）增 菌液內(nèi)，也可加于亞硒酸鹽甘露醇（ＳＦＭ）或氯化鎂孔雀綠（ＭＭ）增菌液內(nèi)。靜置１小時(shí)，傾去上清液（沉淀物約為４０毫升左右）。１得知１００毫升污水中總大腸菌群數(shù)為４９個(gè)，即１０００毫升污水中總大腸菌群數(shù)為４９１０＝４９０個(gè)。此ＭＰＮ表中所列數(shù)值系指１００毫升水樣中的細(xì)菌數(shù)，因此需將表中的數(shù)值再乘１０、為每１０００毫升水中的細(xì)菌數(shù)。 中國最龐大的下資料庫 (整理 . 版權(quán)歸原作者所有 ) 第 9 頁 共 26 頁 根據(jù)證實(shí)有大腸菌群存在的陽性管數(shù)，查對(duì)總大腸菌群近似數(shù)（ＭｐＮ）檢索表（附表１ ２．品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上的菌落色澤： （１）紫紅色，具有金屬光澤的菌落； （２）深紅色，不帶或略帶金屬光澤的菌落； （３）淡紅色，中心色較深的菌落。 （二）平板分離：經(jīng)培養(yǎng)２４小時(shí)后，將產(chǎn)酸產(chǎn)氣及只產(chǎn) 酸不產(chǎn)氣的發(fā)酵管，分別接種于伊紅美蘭培養(yǎng)基或品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上，置３７℃恒溫箱培養(yǎng)１８～２４小時(shí)，挑選符合下列特征的菌落，取菌落的一小部分，進(jìn)行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。 （一）初發(fā)酵試驗(yàn)：以無菌操作將各盛有３倍濃縮乳糖蛋白胨培養(yǎng)液５毫升的５支發(fā)酵管內(nèi)，各接種污水樣１０毫升，將各盛有單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液約１０毫升５支的發(fā)酵管內(nèi)，各接種污水樣１毫升，再將各盛有單料乳糖蛋白臟培養(yǎng)液約１０毫升的５支發(fā)酵管內(nèi)，各接種１∶１０稀釋的污水樣１毫升（相當(dāng)于原污水樣０．１毫升）。 二、檢驗(yàn)方法 中國最龐大的下資料庫 (整理 . 版權(quán)歸原作者所有 ) 第 8 頁 共 26 頁 總大腸菌群系指一群需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌在３ ７℃恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)２４小時(shí)，能使乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣。污水中余氯更高時(shí)，就按比例增加試劑。把最后１滴碘液的體積（約為 ０．０５毫升）從讀數(shù)中減去。加入５００毫升０．００５６４Ｎ硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，１毫升５％碘化鉀溶液和１毫升醋酸鹽緩沖液，使ｐＨ保持在３．５～４．２之間。 三、步驟： １．污水水樣中余氯小于１０毫克燉升時(shí)，?。玻埃昂辽鬯畼?； 余氯多時(shí)，應(yīng)按比例減少水樣體積。 ８、１％淀粉溶液 稱?。埃悼丝扇苄缘矸塾冢玻埃昂?升燒杯內(nèi)，加少量蒸餾水調(diào)成糊狀，加入剛煮沸的蒸餾水１００毫升。所需加入標(biāo)定后 中國最龐大的下資料庫 (整理 . 版權(quán)歸原作者所有 ) 第 7 頁 共 26 頁 的０．１Ｎ碘標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，按下式計(jì)算： 為了測(cè)定更準(zhǔn)確，最好每天用０．１０００Ｎ亞砷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液按上述操作標(biāo)定一次（預(yù)計(jì)用去５～１０毫升０．１０００Ｎ亞砷酸鈉溶液即可）。 ７、０．０２８２Ｎ碘標(biāo)準(zhǔn)溶液 將２５克分析純碘化鉀放入１０００毫升容量瓶中，加入少量蒸餾水使之溶解。用待標(biāo)定的０．１Ｎ碘溶液滴定，以淀粉作指示劑，滴至剛顯淡藍(lán)色為終點(diǎn)。將配好 的亞砷酸鈉溶液轉(zhuǎn)入５００毫升容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。 ５、０．１０００Ｎ亞砷 酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 稱取預(yù)先在干燥器內(nèi)經(jīng)濃硫酸干燥的分析純?nèi)趸椋ǎ粒?２ Ｏ ３ ）２．４７２８克于３００毫升燒杯中，加入２０毫升１Ｎ氫氧化鈉溶液，攪拌使溶解（注意Ａｓ ２ Ｏ ３ 劇毒！）。 ４、０．１Ｎ碘溶液 溶解４０克分析純碘化鉀于２５毫升蒸餾水中，加入１３克分析純碘片，不斷攪拌到溶解為止。如發(fā)現(xiàn)溶液顏色變黃，應(yīng)予重配。