20xx人教版高中生物選修三11dna重組技術(shù)的基本工具ppt精講課件(參考版)
2024-11-22 07:14本頁面
【正文】 。 (2)本題中將經(jīng) BamHⅠ 處理后的質(zhì)粒與用 EcoRⅠ 處理得到的目的基因 ,通過 DNA連接酶是否一定能連接 ,為什么 ? 提示 :不一定。由圖二、圖三結(jié)果顯示 ,多數(shù)大腸桿菌都能抗氨芐青霉素 ,而經(jīng)限制酶 BamHⅠ 作用后 ,標(biāo)記基因 tetR被破壞 ,而不能抗四環(huán)素 ,故多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是 pBR322質(zhì)粒。而通過 DNA連接酶作用能將兩個 DNA分子片段連接 ,表明經(jīng)兩種限制酶(BamHⅠ 和 BglⅡ) 切割得到的 DNA片段 ,其黏性末端相同。 【 解析 】 (1)質(zhì)粒作為基因表達(dá)載體的條件之一是要有抗性基因 ,以便于篩選 (鑒別 )目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。 【 解題關(guān)鍵 】 解答本題應(yīng)明確以下兩點 : (1)基因工程中工具酶的作用及特點。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上 ,使絨布面沾上菌落 ,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng) ,得到如圖三的結(jié)果 (空圈表示與圖二對照無菌落的位置 )。 (3)pBR322分子中另有單個的 BamHⅠ 限制酶作用位點 ,現(xiàn)將經(jīng)BamHⅠ 處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶 BglⅡ 處理得到的目的基因 ,通過 DNA連接酶作用恢復(fù) 鍵 ,成功獲得了重組質(zhì)粒 ,說明 。 (2)pBR322分子中有單個 EcoRⅠ 限制酶作用位點 ,EcoRⅠ 只能識別序列 — GAATTC— ,并只能在 G與 A之間切割。 【 典例訓(xùn)練 2】 目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒 ,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體 ,其主要結(jié)構(gòu)如下圖所示。 (2)功能不同 :細(xì)胞膜上的載體功能是協(xié)助細(xì)胞膜控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞 。 【 思維拓展 】 細(xì)胞膜上的載體與基因工程中的載體的區(qū)別 (1)化學(xué)本質(zhì)不同 :細(xì)胞膜上的載體化學(xué)成分是蛋白質(zhì) 。 : (1)作為運輸工具 ,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。 (3)具有標(biāo)記基因 :具有特殊的標(biāo)記基因 ,供重組 DNA的鑒定和選擇。 : (1)能自我復(fù)制 :能夠在受體細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制 ,或整合到染色體 DNA上 ,隨染色體 DNA進(jìn)行同步復(fù)制。 二、基因工程中常用的載體 —— 質(zhì)粒 :是一種裸露的、小型、雙鏈、環(huán)狀 DNA分子。B項 HindⅢ 酶切出的末端序列為 AGCT,與 B
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