20xx人教版高中生物選修三11dna重組技術(shù)的基本工具ppt精講課件-資料下載頁(yè)
2024-11-18 07:14本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】①識(shí)別雙鏈DNA分子的某種_______________。②切割特定核苷酸序列中的特定位點(diǎn)。列,并選____之間作切口進(jìn)行“切割”。酶既可以連接黏性末端又可以連接平末端,所以必須進(jìn)行選擇。限制酶和DNA解旋酶的作用部位相同。旋酶作用于堿基對(duì)的兩個(gè)堿基之間的氫鍵。DNA連接酶起作用時(shí)不需要模板。影響受體細(xì)胞的生命活動(dòng),甚至破壞受體的生命活動(dòng)。端都能催化其“縫合”,重新形成DNA分子。和600bp兩種長(zhǎng)度的DNA分子。首先要會(huì)讀圖、析圖,所給選項(xiàng)中有線形DNA、環(huán)狀DNA兩種。從題干中“用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ酶切后。酶切圖譜分析可知,此DNA分子是環(huán)狀,故A、B排除。如圖為四種限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、箭頭表示每一種限制酶的特定。同理可推,C項(xiàng)中也不互補(bǔ),只有D項(xiàng)中才互補(bǔ)。色體DNA上,隨染色體DNA進(jìn)行同步復(fù)制。作為運(yùn)輸工具,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。
【正文】 說(shuō)明 。 (4)為了檢測(cè)上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無(wú) ampR和 tetR的大腸桿菌 ,將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng) ,得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上 ,使絨布面沾上菌落 ,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng) ,得到如圖三的結(jié)果 (空圈表示與圖二對(duì)照無(wú)菌落的位置 )。與圖三空圈相對(duì)應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是 ,圖三結(jié)果顯示 ,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是 。 【 解題關(guān)鍵 】 解答本題應(yīng)明確以下兩點(diǎn) : (1)基因工程中工具酶的作用及特點(diǎn)。 (2)質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)組成及其作用。 【 解析 】 (1)質(zhì)粒作為基因表達(dá)載體的條件之一是要有抗性基因 ,以便于篩選 (鑒別 )目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。 (2)同一限制酶切割 DNA分子產(chǎn)生的黏性末端相同 ,根據(jù)題意可知 :該目的基因兩側(cè)被限制酶 EcoRⅠ 切割后所形成的黏性末端為 : (3)DNA連接酶催化兩個(gè) DNA片段形成磷酸二酯鍵 。而通過(guò) DNA連接酶作用能將兩個(gè) DNA分子片段連接 ,表明經(jīng)兩種限制酶(BamHⅠ 和 BglⅡ) 切割得到的 DNA片段 ,其黏性末端相同。 (4)由題意知 :由于與圖三空圈相對(duì)應(yīng)的大腸桿菌能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng) ,而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng) ,故可推知與圖三空圈相對(duì)應(yīng)的圖二中的菌落能抗氨芐青霉素 ,但不能抗四環(huán)素。由圖二、圖三結(jié)果顯示 ,多數(shù)大腸桿菌都能抗氨芐青霉素 ,而經(jīng)限制酶 BamHⅠ 作用后 ,標(biāo)記基因 tetR被破壞 ,而不能抗四環(huán)素 ,故多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是 pBR322質(zhì)粒。 答案 :(1)篩選 (鑒別 )目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 (2) (3)磷酸二酯 兩種限制酶 (BamHⅠ 和 BglⅡ) 切割得到的黏性末端相同 (4)能抗氨芐青霉素 ,但不能抗四環(huán)素 pBR322質(zhì)粒 【 互動(dòng)探究 】 (1)圖一中有多個(gè)限制酶作用位點(diǎn) ,其作用是什么 ? 提示 :供外源 DNA(或目的基因 )插入其中。 (2)本題中將經(jīng) BamHⅠ 處理后的質(zhì)粒與用 EcoRⅠ 處理得到的目的基因 ,通過(guò) DNA連接酶是否一定能連接 ,為什么 ? 提示 :不一定。 BamHⅠ 和 EcoRⅠ 處理得到的 DNA黏性末端如果相同則可以連接 ,否則不能連接。
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