11dna重組技術(shù)的基本工具(高中生物選修三教案系列)(參考版)
2024-11-12 14:05本頁面
【正文】 師：一般來說，天然載體往往不能滿足人類的所有要求，因此人們根據(jù)不同目的和需要，對某些天然的載體進行人工改造；限制酶切點所處的位置必須在所需的標記基因之外， 這樣才能有利于目的基因的檢測。 師：目前通常利用的載體是“質(zhì)?！保|(zhì)粒是能“友好”寄宿在細菌細胞內(nèi)的小型的環(huán)狀 DNA分子，具備上述條件。載體不能分離，就不能獲得更多帶有目的基因的載體。 ，這樣，在載體進入受體細胞后，就可通過標記基因的表達來檢測。為什么呢？ 請大家閱讀教材 P6《基因進入受體細胞的載體 — “分子運輸車”》，并思考以下問題： ？ ？ ，你如何去察覺？ ？不能分離會怎樣？ 生： ，將在細胞增殖中丟失。 師：將切割下來的含有目的基因的 DNA片段與運載體結(jié)合后，就構(gòu)成了一個“分子運輸車”，可以將目的基因送 入受體細胞 。因此 DNA 連接酶不需要模板。 思考： DNA 連接酶和 DNA 聚合酶都能催化兩個核苷酸之間形成磷酸二酯鍵， DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回事嗎？生答：略 師總結(jié)： （ 1） DNA 聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核酸片段的 3′末端的羥基上，形成磷酸二酯鍵；而 DNA 連接酶是在兩個 DNA 片段之間形成磷酸二酯鍵，不是在單個核苷酸與 DNA片段之間形成磷酸二酯 鍵。 師： DNA連接酶作用的實質(zhì)是什么？ 生答：將被限制酶切開了的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵連接起來。coli DNA 連接酶只能將雙鏈 DNA片段黏性末端之間連接起來，不能將雙鏈 DNA片段平末端之間連接起來。coli DNA 連接酶 （來源于大腸桿菌）和 T4 DNA 連接酶 （來源于 T4噬菌體）。 師：正確。 師： 單純的 DNA片段很難導入受體細胞。 生物 含有某種限制酶的細胞 ，其 DNA 分子中 ① 或者不具備這種限制酶的識別切割 和 序列， ② 或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識別序列的堿基上，使限制酶不能將其
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