11dna重組技術(shù)的基本工具(高中生物選修三教案系列)(已改無錯(cuò)字)
2022-12-21 14:05:03 本頁面
【正文】 無論是 6個(gè)堿基還是 4個(gè)堿基，都可以找到一條中心軸線（如下圖所示） ，中軸線兩側(cè)的雙鏈 DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的。 思考 ： 為什么限制酶不剪切細(xì)菌本身的 DNA？（教材《思考與探究》 師總結(jié)： 細(xì)菌中 的 限制酶 對(duì)于外源入侵的 DNA 可以降解掉 ，起到保護(hù)自身的作用 。 之所以不切斷自身 DNA，是因?yàn)槲⑸镌陂L(zhǎng)期的進(jìn)化過程中形成了一套完善的防御機(jī)制 。 生物 含有某種限制酶的細(xì)胞 ，其 DNA 分子中 ① 或者不具備這種限制酶的識(shí)別切割 和 序列， ② 或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識(shí)別序列的堿基上，使限制酶不能將其切開。這樣，盡管細(xì)菌中含有某種限制酶也不會(huì)使自身的DNA 被切斷， 同時(shí) 可以防止外源 DNA的入侵 。 師： 單純的 DNA片段很難導(dǎo)入受體細(xì)胞。 切割下來的 DNA片 段，要送入受體細(xì)胞，必須與運(yùn)載體 DNA連接，怎樣才能將切割下來的 DNA片段與運(yùn)載連接起來呢？ 生答： DNA連接酶。 師：正確。 引導(dǎo)學(xué)生閱讀教材 P5~6《 DNA連接酶 — “分子縫合針”》 師： DNA連接酶有哪幾種？來源于哪里？分別起何種作用？ 生答： Ecoli DNA 連接酶 （來源于大腸桿菌）和 T4 DNA 連接酶 （來源于 T4噬菌體）。作用： Ecoli DNA 連接酶只能將雙鏈 DNA片段黏性末端之間連接起來，不能將雙鏈 DNA片段平末端之間連接起來。 T4 DNA 連接酶既可 “縫合 ”雙鏈黏性末端， 也可 “縫合 ”雙鏈 DNA的平末端，但平末端之間連接的效率比較低。 師： DNA連接酶作用的實(shí)質(zhì)是什么？ 生答：將被限制酶切開了的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵連接起來。 師：引導(dǎo)學(xué)生觀察圖書室 4《 DNA分子的切割和連接》。 思考： DNA 連接酶和 DNA 聚合酶都能催化兩個(gè)核苷酸之間形成磷酸二酯鍵， DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回事嗎？生答：略 師總結(jié)
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