20xx人教版高中生物選修3專題1第1節(jié)dna重組技術的基本工具(參考版)
2024-11-21 22:43本頁面
【正文】 [ 答案 ] (1) 篩選 ( 鑒別 ) 目的基因是否導入受體細胞 (2) 目的基因 — G AA T TC — ?? — G AA TTC — — CT T AA G — ?? — CT T AA G — (3) 磷酸二酯 兩種限 制酶 ( Bam H I 和 Bgl Ⅱ ) 切割得到的黏性末端相同 (4) 能抗氨芐青霉素，但不能抗四環(huán)素 pB R322 質粒 。 (4)由題意知：由于與圖三空圈相對應的大腸桿菌能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長 ， 而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長 ， 故可推知與圖三空圈相對應的圖二中的菌落能抗氨芐青霉素 ， 但不能抗四環(huán)素 。 [ 解析 ] (1) 質粒作為基因表達載體的 條件之一是要有抗性基因，以便于篩選 ( 鑒別 ) 目的基因是否導入受體細胞。 再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上 ， 使絨布面沾上菌落 ， 然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng) ， 得到如圖三的結果 (空圈表示與圖二對照無菌落的位置 )。 若在某目的基因的兩側各有 1個 EcoR I的切點 ， 請畫出目的基因兩側被限制酶 EcoR I 切 割 后 所 形 成 的 黏 性 末 端 ：__________________________________________。 (1)構建人工質粒時要有抗性基因 ， 以便于 _________。 而限制酶不會切斷自身 DNA， 是因為在原核生物細胞中 ， 其 DNA分子或者不具備這種限制酶的識別序列 ， 或者通過甲基化酶將甲基轉移到所識別序列的堿基上 ， 使限制酶不能將其切開 。 2． 限制酶在原核生物中的作用 原核生物容易受到自然界外源 DNA的入侵 ， 但是 ， 生物在長期的進化過程中形成一套完善的防御機制 ， 以防止外來病原微生物的侵害 。 ② DNA連接酶只能在兩個 DNA片段間形成磷酸二酯鍵 ， 而 DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有 DNA片段上 ， 且需要以一條 DNA鏈為模板 。 質粒是小型環(huán)狀雙鏈 DNA分子而不是細胞器 ， 也不會有堿基 U。 而自然存在的質粒 DNA分子并不完全具備上述條件 ， 都要進行人工改造后才能用于基因工程操作 。 質粒在受體細胞中能隨受體細胞 DNA的復制而復制 ， 能進行目的基因的擴增和表達 。 現(xiàn)在所用的質粒幾乎都是人工改造的 。 ⑤ 大小適中 ， 便于操作 。 ③ 帶有標記基因 ， 便于篩選 。 (2)作為載體必須具備的條件： ① 具有一個或多個限制酶切割位點 ， 該切割位點必須位于載體本身必需的基因序列之外 。 所以本題應該選 C。 如果該線性 DNA分子在 3個酶切位點上都被該酶切斷 ， 則會產(chǎn)生 a、 b、 c、 d四種不同長度的 DNA片段 。 [答案 ] (1)③ 平 T4DNA連接酶 (2)② ④ 黏性 E [解析 ] 分析以上 4個 DNA片段 ， 可清楚分析出 ①③ 為平末端 ， 連接酶應用 T4DNA連接酶； ②④ 為黏性末端且相同 ， 連接時應用 E ① GC ? ② AA T TC ? ③? GC ④? CT T AA CG ? G ? ? CG ? G (1) 其中 ① 和 ________ ____ 是由一種限制酶切割形成的____________ 末端，兩者要重 組成一個 DNA 分子，所用 DNA連接酶通常是 ________ 。 coli DNA 連接酶????? 來源：大腸桿菌作用：使黏性末端之 間連接T4DNA 連接酶??????? 來源： T4噬菌體作用：既能連接黏性末端 也能連接平末端， 但
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