【正文】 ? 又豬等排出的污水量約為人的 510 倍 ,其污染量頗大 ,欲區(qū)分人或畜之污染時可採用動物的腸道系統(tǒng)特有的 Fecal Streptococcus (糞便型鏈球菌 ,) 作指標 ,由 存在比率 ,進一步區(qū)分污染源。 步驟 (可加鏡檢確認特徵 ) 利用 Thoma’s Equation（陶姆斯氏公式 )可以求出 MPN 值 正發(fā)酵管數(shù) 100 MPN = √( 水樣總體積 未發(fā)酵水樣體積 ) MTF 結果 MTF 醱酵法的缺點 （約五天） ，求出的 MPN不是直接計數(shù)而是公式換算值具有統(tǒng)計的誤差 濾膜法 （ membrane filtration） MF法 ,採醋酸纖維膜 ()用磁性過濾器濾過後 ,培養(yǎng)在 EMB上視金屬綠色光澤菌落產(chǎn)生數(shù)，並計數(shù)之。 I M Vi C E. coli ＋ (紅色 ) ＋ (紅色 ) － － Enterobacter aerogenes － (黃色 ) － ＋ (桃紅色 ) ＋ (混濁 ) 何謂 coliforms 特徵 : 37 度 ， rod，無內生胞子 （ nonEndospore） Coliforms 之檢測法 : A:傳統(tǒng)的多管醱酵法 (multiple tube fermenatron) =即 MTF法 (省錢、耗時、人工 ) =》 求水中 Coliform 的最大可能數(shù)目 (MPN值 ) MTF 之步驟： a：假定試實驗 :將水樣加入 Lactose Broth 內於 37度下培養(yǎng) 24小時後，視產(chǎn)酸產(chǎn)氣否有者為正反應 b：確定試驗 :將在 a. 中呈正反應的培養(yǎng)液部份移入 BGLB內 於 37度下培養(yǎng) 24小時後，視產(chǎn)酸產(chǎn)氣否 ,有者為正反應 c：完成試驗 :將在 b. 中呈正反應的培養(yǎng)液部份移入 EMB內於 37度下培養(yǎng) 24小時後 ,視綠色金屬光澤之菌落出現(xiàn)否，並作 鏡檢 :G,桿形無內生胞子。 ?M (Methyl red test) ? glucose分解產(chǎn)酸而使指示劑 (甲基紅 )變色。現(xiàn)因這些病原菌殘存力弱 ,難監(jiān)測 (∵ 不好找到或已死了 )故失去當指標生物的條件 ,因此採用同是存於腸內且殘存力長 ,易檢測的大腸桿菌當指標生物。 三種病原菌都是革蘭氏陰性 ( G “” )。 PABA)來合成，而抗生素與 PABA結構類似，造成競爭 性抑制，或能抑制葉酸合成過程中所需酵素的作用， 進而干擾細菌所需葉酸之合成。 ＊ 抗生素：立放黴素 ( rifamycin) ?破壞細胞膜 ： 抗生素和微生物細胞膜上的磷脂結合，造成菌體細胞 結構混膜亂，而改變細胞膜原有之功能。 真核細胞大次單元體為 60S、小次單元體為 40S， 兩的次單元體組合會形成 80S的完整核糖體。 ＊ 抗生素： 鏈黴素 (streptomycin)、四環(huán)黴素 (tetracycline)、 gentamicin ?作用在細菌的 30S的小次單元核糖體 氯黴素 (chloramphenicol)、紅黴素 (erythromycin) ?作用在細菌的 50S的大次單元核糖體 ＊核糖體由大次單元體、小次單元體組成完整核糖體。 ＊ 抗生素：青黴素 (penicillins)、頭胞菌素 (cephalosporins)、 萬古黴素 (vanycin) ＊由於人體細胞沒有細胞壁 ， 所以此類化學藥劑對於細菌 便具有選擇性毒性。 ＊作用條件： 在溼度 40~50%的密閉容器中通入濃度 10~20%的 環(huán)氧乙烷，於 37℃ ，作用 5~8小時，或於 54℃ ， 作用 3~4小時，可達完全滅菌。 ?殺菌效果差，用於清潔。溶解細胞膜內之脂質。 5%次氯酸鈉 ?1小時可殺死細菌芽胞。 氯氣通入水中 ?次氯酸 ?自來水、泳池消毒。 ?鹵素： 為一種氧化劑 ，可使 蛋白質氧化 (SH氧化成 SS 、細胞膜破裂 (氯氣、漂白水 )；與蛋白質結合 (碘 酒 )而達殺菌之效果。 37~40%的甲醛溶液 ?市售福馬林溶液。 ＊ ~%的甲醛溶液 ?殺死細菌繁殖體。 ＊ 常用的有甲醛；是一種殺細菌及殺真菌劑。 ?高濃度的酒精 (95%)與菌體接觸後，使細胞表面之蛋 白質急速凝固，形成硬膜，此硬膜對菌體造成保護作 用，阻止酒精進一步滲入細菌體。 ＊乙醇以 70~75%的濃度殺菌效果最佳。 ? 石碳酸係數(shù)愈大則殺菌力愈強 ?醇類： 屬於脫水劑、蛋白質變性劑、脂溶劑，可使蛋 白質變性、脫水，損害細胞膜而達殺菌作用。食品加工用具及食品生 產(chǎn)廠所不適用。 ＊ 在極低 (2~5%)濃度下具有殺菌作用，但因具腐 蝕性，不能用於生物體 (如皮膚 )。 ?酚及其衍生物 (石炭酸 )： 作用： 具有表面活性劑之作用，可破壞微生物細胞膜之通透性，當藥劑進入細胞後，引起蛋白質變性。 ＊應用： 硫酸銅：抑制藻類生長 氯化汞 (紅藥水 ) ：傷口殺菌－優(yōu)碘取代。 ?重金屬類： 機制： 金屬離子與微生物之蛋白質結合而發(fā)生變性或 沉澱，使其失去活性 ，所以具有殺菌效果 。 ＊不同微生物對化學藥劑之感受度不同，作用 效果會因藥劑之濃度、溫度、 pH值、時間、 所處環(huán)境而異。 清潔：震落玻璃器皿等設備上之雜物或菌落， 以達清潔之效果。 ＊病毒和細菌芽胞有較強之抗性。 微生物之生長必需在有水的環(huán)境下才能進行，利 用乾燥法除去物體的水分，會直接影響微生物生長。 ＊除部份耐高滲透壓 (魯氏酵母 )及嗜鹽性微生物 (海中 )外一般微生物在鹽濃度 5~15%、糖濃度在 50~70%時生長受到抑制。 ?高滲透壓 環(huán)境 (20%NaCl溶液 )，水將從細胞內通過細胞膜進入溶液中，造成細胞脫水而引起 質壁分離 ，使細胞不能生長甚至死亡。 ＊ χ、 γ射線穿透力強，包裝完成之藥品、點滴 均可用此法達完全無菌效果。 ＊適量的紫外光照射可使 DNA架構發(fā)生些微變化，利 用此方法可培育新性狀的菌種，因此紫外線常作為 誘變劑用於培育新菌種的工作。 ＊紫外線穿透力有限 (對清水約 30cm)，無法穿透玻璃等 物體，因此只適用於物體表面之滅菌。 χ,γ,α,β射線 ；會引起水或物質之解離。 可見光： 380~760nm；藍細菌等藻類進行光合作 用之能源。 輻射光源： 無線電波：波常最長；對生物效應最弱。 ＊低溫造成菌數(shù)的減少，是由於冰晶對細胞造成物理性的破壞所致。 ?冷藏： 在 4~7℃ 的冷藏溫度下，一些細菌、黴菌、 酵母菌可存活好幾個月。 溫度 ~低溫 作用原理： 靜菌作用 ，非殺菌作用。 低溫： ６５ ℃ ， １５～３０分 高溫： ７１ ℃ or ７２ ℃ ，１５秒 ?超高溫瞬時滅菌法 (UHT)： 滅菌條件： 135~137℃ 、 3~5秒，可殺死微生物的營養(yǎng) 體和耐熱性強之芽胞細菌。如此反覆連續(xù)三次，即可達到完全滅菌 的效果。 ?煮沸法 (boiling)： 將物品在 100℃ 沸水中加熱 15分鐘以上，將不形成芽孢 的細菌消滅之方法。 ＊不適用 ： 蒸氣無法穿透之物品 ； 易受熱破壞之物品。 ?高溫 高壓滅菌法 (autoclave)： 利用密閉鍋 (滅菌釜 )產(chǎn)生之高溫高壓 ， 經(jīng)一段時間後可達 殺菌之目的。 ?灰化法及焚燒法： 利用 600℃ 以上高溫燃燒，以殺死微生物。 ?乾燥箱 (oven)滅菌法： 在乾燥箱中利用熱空氣進行滅菌 ， 作用條件： 160~180℃ 、 2~4小時 。 ?其他環(huán)境因子： 一些環(huán)境因子會干擾或影響抗菌劑之作用，須先除去。 ?時間： 當細菌死亡時，菌數(shù)隨時間之增加而降低， 菌數(shù)越多所需時間越長。 ?濃度