【正文】 黴素 (vanycin) ＊由於人體細(xì)胞沒有細(xì)胞壁 ， 所以此類化學(xué)藥劑對於細(xì)菌 便具有選擇性毒性。 真核細(xì)胞大次單元體為 60S、小次單元體為 40S， 兩的次單元體組合會形成 80S的完整核糖體。 PABA)來合成，而抗生素與 PABA結(jié)構(gòu)類似，造成競爭 性抑制，或能抑制葉酸合成過程中所需酵素的作用， 進而干擾細(xì)菌所需葉酸之合成?，F(xiàn)因這些病原菌殘存力弱 ,難監(jiān)測 (∵ 不好找到或已死了 )故失去當(dāng)指標(biāo)生物的條件 ,因此採用同是存於腸內(nèi)且殘存力長 ,易檢測的大腸桿菌當(dāng)指標(biāo)生物。 I M Vi C E. coli ＋ (紅色 ) ＋ (紅色 ) － － Enterobacter aerogenes － (黃色 ) － ＋ (桃紅色 ) ＋ (混濁 ) 何謂 coliforms 特徵 : 37 度 ， rod，無內(nèi)生胞子 （ nonEndospore） Coliforms 之檢測法 : A:傳統(tǒng)的多管醱酵法 (multiple tube fermenatron) =即 MTF法 (省錢、耗時、人工 ) =》 求水中 Coliform 的最大可能數(shù)目 (MPN值 ) MTF 之步驟： a：假定試實驗 :將水樣加入 Lactose Broth 內(nèi)於 37度下培養(yǎng) 24小時後，視產(chǎn)酸產(chǎn)氣否有者為正反應(yīng) b：確定試驗 :將在 a. 中呈正反應(yīng)的培養(yǎng)液部份移入 BGLB內(nèi) 於 37度下培養(yǎng) 24小時後，視產(chǎn)酸產(chǎn)氣否 ,有者為正反應(yīng) c：完成試驗 :將在 b. 中呈正反應(yīng)的培養(yǎng)液部份移入 EMB內(nèi)於 37度下培養(yǎng) 24小時後 ,視綠色金屬光澤之菌落出現(xiàn)否，並作 鏡檢 :G,桿形無內(nèi)生胞子。 ? 又豬等排出的污水量約為人的 510 倍 ,其污染量頗大 ,欲區(qū)分人或畜之污染時可採用動物的腸道系統(tǒng)特有的 Fecal Streptococcus (糞便型鏈球菌 ,) 作指標(biāo) ,由 存在比率 ,進一步區(qū)分污染源。 步驟 (可加鏡檢確認(rèn)特徵 ) 利用 Thoma’s Equation（陶姆斯氏公式 )可以求出 MPN 值 正發(fā)酵管數(shù) 100 MPN = √( 水樣總體積 未發(fā)酵水樣體積 ) MTF 結(jié)果 MTF 醱酵法的缺點 （約五天） ，求出的 MPN不是直接計數(shù)而是公式換算值具有統(tǒng)計的誤差 濾膜法 （ membrane filtration） MF法 ,採醋酸纖維膜 ()用磁性過濾器濾過後 ,培養(yǎng)在 EMB上視金屬綠色光澤菌落產(chǎn)生數(shù)，並計數(shù)之。 ?M (Methyl red test) ? glucose分解產(chǎn)酸而使指示劑 (甲基紅 )變色。 三種病原菌都是革蘭氏陰性 ( G “” )。 ＊ 抗生素：立放黴素 ( rifamycin) ?破壞細(xì)胞膜 ： 抗生素和微生物細(xì)胞膜上的磷脂結(jié)合，造成菌體細(xì)胞 結(jié)構(gòu)混膜亂，而改變細(xì)胞膜原有之功能。 ＊ 抗生素： 鏈黴素 (streptomycin)、四環(huán)黴素 (tetracycline)、 gentamicin ?作用在細(xì)菌的 30S的小次單元核糖體 氯黴素 (chloramphenicol)、紅黴素 (erythromycin) ?作用在細(xì)菌的 50S的大次單元核糖體 ＊核糖體由大次單元體、小次單元體組成完整核糖體。 ＊作用條件： 在溼度 40~50%的密閉容器中通入濃度 10~20%的 環(huán)氧乙烷，於 37℃ ，作用 5~8小時，或於 54℃ ， 作用 3~4小時，可達(dá)完全滅菌。溶解細(xì)胞膜內(nèi)之脂質(zhì)。 氯氣通入水中 ?次氯酸 ?自來水、泳池消毒。 37~40%的甲醛溶液 ?市售福馬林溶液。 ＊ 常用的有甲醛；是一種殺細(xì)菌及殺真菌劑。 ＊乙醇以 70~75%的濃度殺菌效果最佳。食品加工用具及食品生 產(chǎn)廠所不適用。 ?酚及其衍生物 (石炭酸 )： 作用： 具有表面活性劑之作用，可破壞微生物細(xì)胞膜之通透性，當(dāng)藥劑進入細(xì)胞後，引起蛋白質(zhì)變性。 ?重金屬類： 機制： 金屬離子與微生物之蛋白質(zhì)結(jié)合而發(fā)生變性或 沉澱，使其失去活性 ，所以具有殺菌效果 。 清潔：震落玻璃器皿等設(shè)備上之雜物或菌落， 以達(dá)清潔之效果。 微生物之生長必需在有水的環(huán)境下才能進行，利 用乾燥法除去物體的水分，會直接影響微生物生長。 ?高滲透壓 環(huán)境 (20%NaCl溶液 )，水將從細(xì)胞內(nèi)通過細(xì)胞膜進入溶液中，造成細(xì)胞脫水而引起 質(zhì)壁分離 ，使細(xì)胞不能生長甚至死亡。 ＊適量的紫外光照射可使 DNA架構(gòu)發(fā)生些微變化，利 用此方法可培育新性狀的菌種，因此紫外線常作為 誘變劑用於培育新菌種的工作。 χ,γ,α,β射線 ；會引起水或物質(zhì)之解離。 輻射光源： 無線電波：波常最長；對生物效應(yīng)最弱。 ?冷藏： 在 4~7℃ 的冷藏溫度下，一些細(xì)菌、黴菌、 酵母菌可存活好幾個月。 低溫： ６５ ℃ ， １５～３０分 高溫： ７１ ℃ or ７２ ℃ ，１５秒 ?超高溫瞬時滅菌法 (UHT)： 滅菌條件： 135~137℃ 、 3~5秒，可殺死微生物的營養(yǎng) 體和耐熱性強之芽胞細(xì)菌。 ?煮沸法 (boiling)： 將物品在 100℃ 沸水中加熱 15分鐘以上，將不形成芽孢 的細(xì)菌消滅之方法。 ?高溫 高壓滅菌法 (autoclave)： 利用密閉鍋 (滅菌釜 )產(chǎn)生之高溫高壓 ， 經(jīng)一段時間後可達(dá) 殺菌之目的。 ?乾燥箱 (oven)滅菌法： 在乾燥箱中利用熱空氣進行滅菌 ， 作用條件： 160~180℃ 、 2~4小時 。 ?時間： 當(dāng)細(xì)菌死亡時，菌數(shù)隨時間之增加而降低， 菌數(shù)越多所需時間越長。含滅菌及消毒。 ?防腐 (antisepsis) ：防腐劑 利用物理或化學(xué)方式使物體內(nèi)外之微生物 暫時處於不生 長繁殖但又未死亡 的狀態(tài)。 微生物的控制 防治微生物的目的，在有效控制微生物的生長及其影響，對有益者則加以利用，對有害者則加以設(shè)法滅除之。 利用 『 螢火蟲發(fā)螢光的原理 』， 而螢火蟲會發(fā)光的原因有 ： 螢光物質(zhì) 螢光酵素 ＡＴＰ 將螢光物質(zhì) 、 螢光酵素加在細(xì)菌 (提供 ATP)上，利用超音波振盪，反應(yīng)後測知螢光量 (光子捕捉器 ) 微生物培養(yǎng)方式 同步培養(yǎng)： 應(yīng)用不同生理調(diào)節(jié)方式或物理法，使同一 菌齡之細(xì)胞增殖以供使用。247。 不同生物種類的含量則不同 。 利用吸光計：利用固定波長 (500或 650㎜ )照射，測其 光學(xué)密度 (OD值 ) ，值越高菌數(shù)越多。 (死活菌均計 ) 主要是用來測定在某一環(huán)境下微生物的生長狀況及了解其特性 ?計量測定： ?乾燥菌體恆重測之： 將菌液經(jīng)離心使菌體沉下或經(jīng)過濾處理後 ， 菌體以低 溫真空烘乾後 ， 加以秤乾重。 每一帄盤 (9cm)菌落數(shù)以 30~300個為原則。 ?塗抹培養(yǎng) ：將預(yù)先稀釋好的菌液滴在固體培養(yǎng)基上， 再使用塗抹棒將之塗抹開。 (可動態(tài) ) ?斜面培養(yǎng) ：將菌株接種在製成斜面之固體培養(yǎng)基中。 如：培養(yǎng)基中加入高濃度鹽、抗生素 等。 培養(yǎng)基種類 ~依作用分 ? 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (basical medium)： 含微生物生長之基本營養(yǎng)素者。 ? 複合培養(yǎng)基： 於化學(xué)合成培養(yǎng)基中，再添加一些有機抽出物的成分 (如：酵母萃取液、牛肉萃取液、血清 )而組成者。 pH的改變會影響細(xì)胞內(nèi)酵素活性，因而影響細(xì)胞的生長。 ? 脂質(zhì) 主要構(gòu)成細(xì)胞膜、核膜、粒腺體膜之成分 (磷脂質(zhì) ) 。 甲烯藍(lán)與伊紅形成之複合體 可自由進出死細(xì)胞之細(xì)胞膜，與 死細(xì)胞 結(jié)合 常用鑑別染色技術(shù) 染色法 使用染劑 用途 結(jié)果 革蘭氏染色法 (Grams stain) 結(jié)晶紫、碘液 、95%酒精、番紅 分 G(+)與 G() G(+)~紫色 G()~紅色 芽胞染色 (spore stain) 孔雀綠、番紅