【正文】 附錄 《 藥物制劑人體生物利用度和生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則 》 規(guī)定一般RSD應(yīng)小于 15%， 在 LOQ附近 RSD應(yīng)小于 20%。 批間精密度：是不同次測(cè)定的精密度 。 批內(nèi)精密度：是同一次測(cè)定的精密度 。 專(zhuān)屬性： 要考查輔料、有關(guān)物質(zhì)或降解產(chǎn)物對(duì)主藥的色譜峰是否有干擾，如有干擾應(yīng)設(shè)法排除 99： 73. 精密度是指 （ ） A. 測(cè)得的測(cè)量值與真值接近的程度 B. 測(cè)得的一組測(cè)量值彼此符合的程度 C. 表示該法測(cè)量的正確性 D. 在各種正常試驗(yàn)條件下 ， 對(duì)同一 樣品分析所得結(jié)果的準(zhǔn)確程度 E. 對(duì)供試物準(zhǔn)確而專(zhuān)屬的測(cè)定能力 B 99x： 76． 精密度是指該法 （ ） A. 測(cè)得的測(cè)量值與真值接近的程度 B. 測(cè)得的測(cè)量值與回收率接近的程度 C. 測(cè)量的正確性 D. 測(cè)得的一組測(cè)量值彼此符合的程度 E. 對(duì)供試物準(zhǔn)確而專(zhuān)屬的測(cè)定能力 D 96： 138． 在藥物分析中 ， 精密度是表示該法的 （ ） A. 測(cè)量值與真值接近程度 B. 一組測(cè)量值彼此符合程度 C. 正確性 D. 重現(xiàn)性 E. 專(zhuān)屬性 95： [106— 110]應(yīng)要求的效能指標(biāo)： A. 檢測(cè)限 B. 定量限 C. 兩者均要求 D. 兩者均不要求 95： 106. 含量測(cè)定方法評(píng)估 （ D） 95： 107. 雜質(zhì)限量檢查 （ A） 95： 108. 雜質(zhì)定量測(cè)定 （ B） 95： 109. 溶出度測(cè)定 （ D） 95： 110. 中間體含量測(cè)定 （ D） 97： 126． 藥物雜質(zhì)檢查所要求的效能指標(biāo)為 （ ） A. 準(zhǔn)確度 B. 精密度 C． 選擇性 D. 檢測(cè)限 E. 耐用性 98： 138． 評(píng)價(jià)藥物分析所用的測(cè)定方法的效能指標(biāo)有 （ ） A. 含量均勻度 B. 精密度 C. 準(zhǔn)確度 D. 粗放度 E. 溶出度 例 [1～ 5] A． 精密度 B． 定量限 C． 兩者皆是 D． 兩者皆不是 1. 某法測(cè)得一組測(cè)量值間彼此符合程度 （ A） 2. 測(cè)量值和真值接近的程度 （ D） 3. 測(cè)定結(jié)果的重現(xiàn)性 （ A） 4. 可定量測(cè)得被測(cè)藥物的最低水平參數(shù) （ B） 5. 藥物分析方法的效能指標(biāo)（ C） 例 6. 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差表示 （ ） A. 準(zhǔn)確度 B. 回收率 C. 精密度 D. 純凈度 E. 限度 例 7. 精密度的一般表示方法有 ( ) A. 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差 B. 相對(duì)平均偏差 C. 相對(duì)誤差 D. 絕對(duì)誤差 E. 標(biāo)準(zhǔn)差 例 8. 檢測(cè)限的表示方法有 （ ） A. 百分?jǐn)?shù) B. ppm C. ppb D. 181。 3. HPLC法： 要求 RSD2％， 回收率 98％～ 102％ 之間。 線性： 吸光度 A一般在 ～ ，濃度點(diǎn) n＝ 5。 2. UV法 ： 用適當(dāng)濃度的精制品進(jìn)行測(cè)定，其RSD一般不大于 1％ 。 不同分析方法對(duì)驗(yàn)證參數(shù)的要求 驗(yàn)證項(xiàng)目 鑒別 雜檢 溶釋出放度度 含量測(cè)定 生物樣品測(cè)定 定量 定性 精密度 + + + 準(zhǔn)確度 + + + 檢測(cè)限 + + 定量限 + + 專(zhuān)屬性 + + + + + 線性范圍 + + + 重復(fù)性 + + + 耐用性 + + + + + + （ 十 ） 各種含量測(cè)定方法對(duì)效能指標(biāo)的要求 1. 容量分析法 ： 用原料藥精制品 (含量 ％ )或?qū)φ掌房疾旆椒ǖ木芏?， 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差一般應(yīng)不大于 ％ ； 進(jìn)行回收率試驗(yàn) 。 3. 含量測(cè)定及溶出量測(cè)定除檢測(cè)限、定量限外，其它都要求。 目的 為常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù) . 體現(xiàn)耐用性因素： ? 被測(cè)溶液的穩(wěn)定性 ? 樣品提取次數(shù) ? 時(shí)間 ? 試劑來(lái)源 耐 用 性 指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí) ,分析相同樣品所測(cè)得的試驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)程度 . 2. 雜質(zhì)的限量檢查除專(zhuān)屬性、檢測(cè)限、耐用性外，其它都不要求。 （八） 耐用性 (robusness) 指測(cè)定條件稍有變動(dòng)時(shí)，結(jié)果不受影響的承受程度，為常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。對(duì)于含量測(cè)定要求濃度上限為樣品最高濃度的 120%,下限為樣品最低濃度的 80%,但應(yīng)高于 LOQ。 線 性 第一章 方法 用作圖法或計(jì)算回歸方程建立。 數(shù)據(jù)要求： 應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。 生物藥物分析 中考慮 :內(nèi)源性物質(zhì)干擾 ,代謝產(chǎn)物的干擾 ,同時(shí)服藥時(shí)的干擾 。是在分析復(fù)雜樣品混合物時(shí)衡量其是否受到干擾及其程度的一種方法。是指該法用于復(fù)雜樣品分析時(shí)相互干擾程度的度量。 常用信噪比法確定定量限，一般以信噪比（ S/N）為 10∶ 1時(shí)相應(yīng)的濃度或注入儀器的量進(jìn)行確定，也可用儀器所測(cè)空白背景響應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)差（ SD）的 10倍為估計(jì)值，再經(jīng)試驗(yàn)確定。 （四）定量限 （ 1imit of quantitation，LOQ） 指樣品中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。一般以信噪比 （ S/N） 3∶ 1或 2∶ 1時(shí)的相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測(cè)限。 1． 非儀器分析目視法 用已知濃度的被測(cè)物 ， 試驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量 。是限度試驗(yàn)參數(shù)，無(wú)需定量測(cè)定。 精密度高 準(zhǔn)確度較差， 即系統(tǒng)誤差較大； 甲 乙 丙 準(zhǔn)確度高， 但精密度較差， 即偶然誤差較大； 精密度比較好 準(zhǔn)確度比較好， 稱(chēng)為精確度高， 偶然誤差比較小 系統(tǒng)誤差比較小 用打靶時(shí)彈著點(diǎn)為例，說(shuō)明上述二個(gè)詞的意義。 ?（ 1）精密度是保證準(zhǔn)確度的先決條件。 ?應(yīng)當(dāng)指出的是，測(cè)定的精密度高，測(cè)定結(jié)果也越接近真實(shí)值。 批內(nèi) RSD ——每一濃度 5～ 6個(gè)樣品 ， 每個(gè)樣品測(cè)定 1次 ， 用隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線分別計(jì)算 3個(gè)濃度及每 1濃度的 RSD 批間 RSD ——每 1分析批內(nèi)每一濃度制備 1個(gè)樣品 ， 每個(gè)樣品測(cè)定 1次；用隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 3個(gè)濃度 (每一濃度 5～ 6個(gè)分析批數(shù)據(jù) )的 RSD 2. 測(cè)定法 —— 連續(xù)測(cè)定法 (Ⅱ) 若實(shí)際樣品測(cè)定所用的分析批次少于 5批 ， 也可進(jìn)行 3個(gè)批次的連續(xù)分析 (每 1濃度的每 1批次為 5～ 6個(gè)樣本 )——方差分析法 批間 RSD = 批內(nèi) RSD = = (%)1001)((%)100112???????????????XIXXnXISSIiiA）（ %100(%)100 ?????????? XINSSSSXINSS At o te）（）（%100)(1 1212???????? ???????? ??XINXXnXXIiIiinjij第四章 分析方法的建立與驗(yàn)證 第三節(jié) 分析方法的驗(yàn)證與要求 例 2 用 ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定）法檢測(cè) veroE6，細(xì)胞培養(yǎng)上清正常標(biāo)本 10份的結(jié)果（ 100 OD490值）為2， 3， 3， 4， 4， 5， 5， 5， 6， 8，求標(biāo)準(zhǔn)差。 例 1：計(jì)算下面這一組測(cè)量值的平均值（ ），平均偏差（ d平均 ），相對(duì)偏差（ d平均 ﹪ ） , , , , 解： 平均值 =∑ xi/n 平均偏差 =∑ ︱ di︱ /n=∑ ︱ xi ︱ /n =(++++)/5 = =(++++)/5= 平均相對(duì)偏差 = ∑ ︱ di︱ /n 100% = 100% = ﹪ 表示方法 精密度一般用 標(biāo)準(zhǔn)偏差 (standard deviation， SD或Ｓ )或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 (relative standard deviation， RSD)表示 若設(shè)供試品的測(cè)定值為 Xi， 則其平均值為 ， 且有 n個(gè)測(cè)定值 ， SD= ? ?112?????nXXniii RSD=