【正文】 ⑹ 檢查和監(jiān)督實驗室各項消毒滅菌措施的落實情況。 ⑷ 在出現(xiàn)潛在感染性物質(zhì)溢出或其他事故時，協(xié)助事故調(diào)查。 ⑵ 就技術(shù)方法、程序和方案、生物因子、材料和設(shè)備進行定期的內(nèi) 51 部安全檢查。 ⑹負責對涉及感染性物質(zhì)的研究計劃、方案以及操作程序等 實施前的生物安全審查。 ⑷負責制定和實施實驗室應(yīng)急處置預(yù)案。 ⑵ 決定并授權(quán)進入本實驗室的工作人員。 ⑹ 組織生物安全知識培訓(xùn)并評估培訓(xùn)效果。 ⑸ 負責定期調(diào) 查、了解實驗室工作人員的健康狀況和健康監(jiān)護情況。 ⑷ 負責組織跟蹤國際國內(nèi)實驗室生物安全管理最新動態(tài)。 ⑵ 負責組織對涉及的生物因子、使用動物、重組 DNA 以及基因修飾物質(zhì)的研究方案進行審查和風險評估。 ⑶ 批準和發(fā)布實驗室生物安全手冊、生物危害評估等重要文件。主要職責是： ⑴ 負責建立本單位生物安全管理體系，落實生物安全管理責任部門或責任人。 適用范圍 適用于本中心所有工作人員。 實驗廢棄物，如吸頭等， 非生物降解材料，不可隨意丟棄，要裝入垃圾袋后封好袋口，統(tǒng)一交污物處理站處理。 每區(qū)每天實驗結(jié)束后紫外燈照射 60 分鐘，如有需要可延長照射時間。切記：不當使用消毒液也能散布污染。 每天更換廢液缸的 5％施康，并保證 5％施康用量為廢液缸內(nèi)總液量的 1/2 左右。若被銳器刺破時，應(yīng)立即脫下手套，盡量擠壓傷處，使血流出，然后用碘酒、酒精 47 消毒，必要時進行預(yù)防補救措施。 在實驗過程中，動物標本（血液、體液）或試劑不慎濺入眼內(nèi)應(yīng)立即用清水洗。 處理標本時應(yīng)穿工作服、戴手套，以免沾上皮膚。 工作人員在實驗過程中應(yīng)嚴格遵守相應(yīng)的操作規(guī)程。 范圍 PCR 實驗室全體工作人員。 消毒的污物集中倒入專用污物坑 （ 污物坑的深度 23 米 )）， 不許混入居民生活垃圾。 75%酒精棉球擦面部裸露部位 ， 用 3%硼酸水漱口 ， 離開實驗室。 ， 經(jīng)高壓滅菌后 ， 拿出實驗室。 ， 有疑似癥狀出現(xiàn)時 ， 應(yīng)立即向?qū)嶒炇抑魅螆蟾?，送醫(yī)院 觀察就醫(yī)。事故的情況應(yīng)報告實驗室主任和 中心 領(lǐng)導(dǎo)。 清理后的物品高壓滅菌。如出現(xiàn)身體不適現(xiàn)象 ， 應(yīng)在實驗室所在地 醫(yī)療預(yù)防控制部門 進行醫(yī)學(xué)觀察 ， 因工作原因必須離開時 ， 用口服抗 菌 藥物預(yù)防。 ， 檢查各實驗室水 、 電 、 防火設(shè)備 ， 打開防盜報警裝置。 細菌學(xué)檢驗 操作時 ， 需有兩名工作人員同時進入實驗室。 進入實驗室的規(guī)章制度 。 儀器 使用人應(yīng)經(jīng)考核合格后方可操作儀器。具備完善的質(zhì)量保證體系中應(yīng)有明確的分級責任制度 ， 以確保檢驗的工作質(zhì)量 ， 保證檢驗 ， 復(fù)核 ， 科研結(jié)果等各項報告的準確可靠性。由有專人送至實驗室 ， 標本送達后 標本運送箱及時用乙醇或 石 碳酸等化學(xué)消毒劑或高壓的辦法徹底消毒。 采集標本污染器材的處理：采集標本的 容器 等污染器材 均 需高壓處理。剖解時，要做好個人防護，嚴防操作人員感染，同時要做好尸體無害化處理和環(huán)境消毒工作，防止疫病傳播，并對樣品的來源、采集樣品和方法等作詳細記錄。 標本采集人員安全要求 標本采集人員的防護：采集 鼻 拭子 、 咽拭子等特殊標本 時 ，采集人員應(yīng)穿防護服，戴一次性口罩，帽子，戴醫(yī)用手術(shù)手套 ，采集動物尸體臟器標本時，采集人員 應(yīng)穿防護服，戴一次性口罩，帽子，戴醫(yī)用手術(shù)手套 ，腳穿鞋套或雨靴 。 在對大批量的標本和菌株進行分離培養(yǎng)和藥敏試驗前， 應(yīng)于中心 主任和實驗室主任討論，必要時加強預(yù)防措施。要嚴格遵守實驗室的一切操作規(guī)程。 實驗室應(yīng)有明顯的區(qū)域劃分，清潔區(qū)， 半 污染區(qū)和污染區(qū)。并填寫陰性血清保存記 錄表，陽性 42 標本收集血清封口包好，冷藏運送 確認實驗室。陰性結(jié)果出具 HIV 抗體篩查報考，陰性結(jié)果填寫 HIV 抗體篩查陽性送檢單。陽性及灰色反應(yīng)區(qū)標本，用原有的試劑盒另一種試劑重復(fù)試驗。小于 cutoff 值的標本為陰性，大于或等于 cutoff 值得標本為陽性，在cutoff177。 在指控圖上標出外部指控血清的 S/CO 值，判斷實驗結(jié)果是否被接受。 所用儀器在使用后及時填寫使用記錄。 終止反應(yīng) 在規(guī)定的時間內(nèi)用試劑 盒中的或根據(jù)要求自行配置的終止液終止反應(yīng)。 加酶結(jié)合物對于二步法 ELISA 實驗需加酶結(jié)合物，按試劑盒要求 41 完成。 洗板 開啟洗板機前，先檢查洗板機廢液瓶是否已排空，開啟后先用蒸餾水沖洗管道，再換上洗液瓶。 其他試驗方法也應(yīng)按照相關(guān)要求進行。加樣要準確，小心不要使吸頭碰著酶標板 孔上的 包被抗原。 加樣和稀釋 進行酶聯(lián)吸附實驗時，應(yīng) 根據(jù)樣品數(shù) 量將合適數(shù)量的酶標板條固定在板架上，為了不損壞洗扳機，每道上的酶標板條必須保持完整 （ 不足部分可用廢棄的微孔添充 ） ，檢查加樣器加樣刻度是否與試劑盒要求的加樣量相符，按照原始記錄表表明的位置加入各種質(zhì)控品和檢測樣品，注意：空白只加標本稀釋液。 40 按照試劑盒要求準備實驗原始記錄表，標明空白、陰性對照、陽性對照、外部質(zhì)控血清以及檢測樣本的位置：登記日期和實驗起止時間，記錄環(huán)境條件及試劑盒廠家、批號、效期：整個實驗過程中每一步操作都要在原始記錄表上詳細登記。 實驗準備 將試劑從冰箱中取出，按試劑盒要求時間恢復(fù)室溫。檢查并記錄樣品的質(zhì)量有無嚴重溶血、細菌污染、血脂過多以及黃疸等情況。 對從其他實驗室送來的樣品，檢查并注明送檢單與標本記錄的符合、樣品管破損、溢漏等情況。這樣同時附送檢單。試管上標明姓名、時間、編號，將試管放入專門帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下墊有軟性物質(zhì)，以免碰碎，容器外標有 HIV 檢測專用字樣和生物危害標志。同時做好記錄。采血時注 意安全，用一次性注射器謹慎操作，防止發(fā)生刺傷和造成外界污染。 適用范圍 動物病毒病病原學(xué)和免疫抗體檢測 以及細菌性疾病檢驗的實驗室檢測工作 。 ? 木材、布料、紙張、橡膠以及塑料等固體可燃材料的火災(zāi)，可采用水冷卻法； ? 易燃液體、可燃液體、易燃氣體等化學(xué)藥品火災(zāi)，使用大劑量泡沫滅火劑、干粉滅火劑滅火； ? 帶電電氣設(shè)備或電路老化 引起的火災(zāi)，應(yīng)切斷電 源后再滅火；印現(xiàn)場情況及其他原因，不能斷電主要帶電滅火時，應(yīng)使用沙子或干粉滅火器，不能使用泡沫滅火器； ? 視火情大小和發(fā)展情況，如無法控制，及時撥打“ 119”報警求救，并到明顯位置引導(dǎo)消防車。 明確火災(zāi)周圍環(huán)境，判斷出是否有重大危險源分布以及是否會帶來次生火災(zāi)發(fā)生。 實驗室火災(zāi)應(yīng)急措施 發(fā)現(xiàn)火情，現(xiàn)場工作人員立即采取處理措施，防止 火災(zāi)蔓延并 37 迅速報告。 突然停電 ，并且斷電時間較長時，要作好停電起始記錄。 對于辦公室的長期停電通知，應(yīng)事先做好準備，必要時調(diào)整班次，推遲檢測實驗，并做好相應(yīng)記錄。屬于外部故障停水的，及時與供水機構(gòu)聯(lián)系，掌握停水原因、恢復(fù)供水時間，以合理安排需要開展的檢測項目。停水時間較長的，要做好停水記錄。 對于供水機構(gòu)通知的計劃長時間停水，應(yīng)事先做好準備，必要時調(diào)整班次，推遲 檢測實驗，并做好相應(yīng)記錄 。 36 發(fā)現(xiàn)蓄意破壞情況后報告實驗室負責人及生物安全員，視破壞種類按照上述方法進行處理，并詳細填寫意外情況登記與處理記錄表。如果懷疑發(fā)生了破損，應(yīng)當將其蓋子擰松；爾后，將整個離心杯高壓滅菌。 如果實驗室的紀錄表格、其他印刷品或書面材料遭到污染，在妥善轉(zhuǎn)抄后或烤后，應(yīng)當將其棄入污染廢棄物容器。清理使用過的布、紙巾、抹布及拖把，放入污染廢棄物容器中。污染區(qū)域應(yīng)當用消毒劑清洗。 培養(yǎng)物等傳染性物質(zhì)的破碎 被傳染性物質(zhì)物質(zhì)污染的小玻璃瓶及其他容器破碎時，用布或紙巾覆蓋，爾后將消毒劑傾倒其上，放置 30 分鐘。在生物安全員的監(jiān)督下進行消毒、凈化處理；執(zhí)行這項工作時應(yīng)當穿戴合適的防護服及呼吸防護用具。至少在 1 小時內(nèi)，任何人員不得進入現(xiàn)場，以便氣溶膠的消散記空氣中較重微粒的沉降。 實驗室事故可能造成氣溶膠污染，如壓力容器或管道破裂等，立即關(guān)閉實驗室，疏散現(xiàn)場的所有人員，對所有暴露人員提出相應(yīng)的醫(yī)學(xué)建議。暴露的粘膜應(yīng)盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。 傷害事故可能導(dǎo)致被強毒微生物感染，例如針頭刺破、銳器割傷、粘膜暴露等途徑接觸到感染性液體，首先進行局部處理，用肥皂和水清洗污染的皮膚，擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂或清水沖洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。在其身體狀況未恢復(fù)之前，不得重新進入實驗室工作。受到傷害的人員應(yīng)立即就醫(yī)，并將受傷原因及接觸微生物的情況通報負責人。令受到傷害的人員立即停止工作，用消毒液清洗未破損的皮膚表面，傷口以碘伏消毒，眼睛用洗眼器反復(fù)沖洗。并填寫生物安全 一 級實驗室意外情況登記與處理 記錄表，實驗室負責人應(yīng)指導(dǎo)這些處理行動，并檢查處理效果。例如實驗過程中，由于標本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面的污染等，應(yīng)立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾，等消毒液徹底浸泡 30 分鐘后，對污染的物品進行處理。 34 職責 遇有緊急情況所有工作人員嚴格按此規(guī)程處理。 第十三 章 實驗室應(yīng)急處置 預(yù)案 目的 規(guī)范緊急情況的處理工作。 當開始滅菌時必須確信滅菌國內(nèi)水量合適，高壓溫度和時間設(shè)置正確。如果滅菌器正在使用或優(yōu)于其它原因不能馬上使用，則廢物必須放在滅菌袋內(nèi)捆好并放在實驗室內(nèi)，在存放期間確保袋子無損壞。 高壓滅菌安全操作步驟 33 在滅菌前將雙層的高壓滅菌帶包好，廢物在滅菌袋中的體積不能超過袋子體積的 3/4，滅菌袋用橡 皮帶捆好，但不能扎得太死，否則蒸汽不能進入所料袋內(nèi)影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物品后，高壓鍋的蓋子或門必須擰緊。每 1 年保養(yǎng)一次，每月檢測一次消毒效果。 在確認壓力表的顯示壓力降到 0 刻度時，打開高壓滅菌器頂蓋 ，取出滅菌樣品。 按“實行”鍵執(zhí)行滅菌程序，此時“滅菌”燈閃爍。 設(shè)定滅菌溫度，先按“編集”鍵，然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需溫度，然后按“實行”鍵，把所設(shè)溫度存進程序。 按照操作規(guī)程使用高壓鍋 接通電源，合上高壓滅菌器左側(cè)總電源開關(guān)。 廢棄物的處理：實驗的廢棄物應(yīng)放入適當?shù)娜萜鲀?nèi)，就地 120℃高壓消毒 30 分鐘，消毒后的廢棄物集中收集、焚燒處理。 紙張 消毒：應(yīng)用 80ml/m3 福爾馬林，密閉熏蒸消毒 6 小時后方可帶出。 手的消毒：用典伏或 75％的乙醇擦拭，作用 13 分鐘。 個人防護用品消毒：實驗結(jié)束，將隔離衣、口罩、帽子、手套、鞋套等 121℃高壓消毒 30 分鐘。處理時應(yīng)避免皮膚損傷。 實驗器材的分類消毒：將使用后的銳器方入防刺破、防滲漏的密閉專用銳器處置盒內(nèi)， 121℃高壓消毒 30 分鐘。 離開實驗室前，必須按有關(guān)規(guī)定消毒雙手。 當傳染性標本溢出或濺出后，應(yīng)有專業(yè)人員立即消毒和清理。 樣品離心使用密封的離心杯，以防濺出。 培養(yǎng)基、組織、體液等必須放在防漏密閉的容器中儲運。 實驗人員進入實驗室應(yīng)穿 戴好個人防護用品，如隔離衣、防護眼睛、口罩、一次性手套等。 各區(qū)域交叉處應(yīng)設(shè)置有效氯 2020mg/L 的含氯消毒劑溶液浸濕的腳墊。 職責 所有工作人員都 必須 遵從本規(guī)程。