第二章-熒光和化學(xué)發(fā)光分析法(參考版)
2024-08-26 23:58本頁面
【正文】 化合物對 DNA的安全性 電泳后 點(diǎn)樣處 a b c d pUC19 (2686bp) 質(zhì)粒 DNA瓊脂糖凝膠電泳， buffer: 50mM TrisHCl/50mM NaCl (Ph ) ，化合物 （ 37℃ 1h） a: DNA空白對照 b:巰基乙胺 ()+DNA c:DNA+ d:巰基乙胺 +DNA+ 21:37:33 分子磷光分析法 特點(diǎn) ? 發(fā)光速率慢 壽命比熒光長 104— 10s ? 輻射的波長比熒光的長 ? 磷光的發(fā)光壽命和輻射強(qiáng)度對重原子 及其敏感（使用含碘甲烷的混合溶劑） ? 受溫度影響大，低溫強(qiáng)度大 21:37:33 稠環(huán)芳烴和雜環(huán)化合物 具有較大的致癌性 21:37:33 DDT等 52種農(nóng)藥 植物生長激素（ ） 血液和尿中的阿司匹林、苯巴比妥 可卡因、致幻劑、抗凝劑 21:37:33 作業(yè) ? 1. 激發(fā)態(tài)分子去激發(fā)的過程有哪些 ?熒光發(fā)射和磷光發(fā)射經(jīng)過哪些過程 ?為什么磷光發(fā)射比熒光發(fā)射慢 ? ? 2. 為什么有的分子能夠發(fā)射熒光 ,有的不能 ?有機(jī)物的熒光與其結(jié)構(gòu)的關(guān)系是怎樣的 ? ? ，寫出 2個可能發(fā)出熒光的化合物，并闡明為什么有可能發(fā)出熒光 。 儀器裝置 21:37:32 二、 磷光分光光度計結(jié)構(gòu)流程 光源 樣品池 激發(fā) 單色器 檢測器 數(shù)據(jù)處理 儀器控制 發(fā)射 單色器 斬波器（磷光鏡） 利用熒光和磷光發(fā)射壽命的差別 通常情況下，樣品池需要放在盛液氮的石英杜瓦瓶內(nèi)，來測定低溫磷光。 單色器 激發(fā)單色器： 選擇激發(fā)光波長， 用以分離出所需用的激發(fā)光。 儀器裝置 21:37:32 檢測器 一般采用硒光電池。 21:37:32 激發(fā)光源 汞燈 、 碘鎢燈 、 氙弧燈 、 激光等 。 實(shí)驗(yàn)條件對熒光強(qiáng)度的影響 21:37:32 儀器裝置 Cary Eclipse 熒光分光光度計 熒光、磷光化學(xué) /生物發(fā)光 美國瓦里安技術(shù)中國有限公司 21:37:32 一、 熒光分光光度計結(jié)構(gòu)流程 儀器裝置 光源 樣品池 激發(fā) 單色器 檢測器 數(shù)據(jù)處理 儀器控制 發(fā)射 單色器 組成： 激發(fā)光源 、 樣品池 、 雙單色器 、 檢測器 、 顯示系統(tǒng) 。 溫度升高，外轉(zhuǎn)換的幾率增加，熒光強(qiáng)度降低。 氫鍵 、 配位鍵的形成主要影響熒光分子的 存在型體 、 電離狀態(tài) ， 熒光強(qiáng)度和形狀均發(fā)生很大變化 。 溶劑 主要表現(xiàn)為 溶劑的極性 、 氫鍵 、 配位鍵 的形成對化合物的熒光發(fā)生變化 。 21:37:32 金屬離子螯合物的熒光 這類發(fā)光過程通常是螯合物首先通過 配位體的 ????躍遷激發(fā) ，接著 配位體把能量轉(zhuǎn)給金屬離子 ，導(dǎo)致 d?d? 躍遷和 f?f?躍遷，最終發(fā)射的是 d?d?躍遷和 f?f?躍遷光譜 。若這些 化合物和金屬離子形成螯合物，隨著分子的剛性增強(qiáng)，平面結(jié)構(gòu)的增大，常會發(fā)生熒光 。 有機(jī)物的熒光與其結(jié)構(gòu)的關(guān)系 21:37:32 COC O O O OCC O O O O熒光黃 Φ = 酚酞 Φ = 0 有機(jī)物的熒光與其結(jié)構(gòu)的關(guān)系 21:37:32
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