【正文】 樣品池 I0 It If 樣品池四面透光。 化合物 量子產率 φF λex（ nm） λem（ nm） 苯 萘 蒽 丁省 205 286 365 390 有機物的熒光與其結構的關系 278 321 404 480 21:37:32 C 分子共平面效應 芴 Φ = 1 聯(lián)苯 Φ = 熒光分子的共平面性增加，則共軛體系大，有利于 π→ π* 躍遷。 ? 基態(tài)與激發(fā)態(tài)兩者的振動能級結構 相似，激發(fā)與去激發(fā)組成相反的兩個過程。 傳遞途徑 輻射躍遷 熒光 磷光 內轉換 系間跨越 振動弛豫 非輻射躍遷 延遲熒光 外轉換 返回速度快的途徑，發(fā)生幾率大 ! B 分子去激發(fā)過程及熒光的產生 熒光及其產生 21:37:32 S2S0e h v（ 1） . 振動弛豫： 同一電子能級 內以 熱能量交換 形式由高振動能級至低相鄰振動能級間的躍遷 。 基態(tài)： 在正常狀態(tài)下，分子處于 最低能級 的分子軌道上稱為基態(tài)。 發(fā)射熒光的能量比分子吸收的能量小 ， 波長長 。 猝滅 （ 3）、 能量轉移 M* + Q → M + Q* 激發(fā)態(tài)的分子與猝滅劑作用，能量發(fā)生轉移，猝滅劑被激發(fā)。 氫鍵 、 配位鍵的形成主要影響熒光分子的 存在型體 、 電離狀態(tài) ， 熒光強度和形狀均發(fā)生很大變化 。 化合物對 DNA的安全性 電泳后 點樣處 a b c d pUC19 (2686bp) 質粒 DNA瓊脂糖凝膠電泳， buffer: 50mM TrisHCl/50mM NaCl (Ph ) ，化合物 （ 37℃ 1h） a: DNA空白對照 b:巰基乙胺 ()+DNA c:DNA+ d:巰基乙胺 +DNA+ 21:37:33 分子磷光分析法 特點 ? 發(fā)光速率慢 壽命比熒光長 104— 10s ? 輻射的波長比熒光的長 ? 磷光的發(fā)光壽命和輻射強度對重原子 及其敏感（使用含碘甲烷的混合溶劑） ? 受溫度影響大，低溫強度大 21:37:33 稠環(huán)芳烴和雜環(huán)化合物 具有較大的致癌性 21:37:33 DDT等 52種農藥 植物生長激素（ ） 血液和尿中的阿司匹林、苯巴比妥 可卡因、致幻劑、抗凝劑 21:37:33 作業(yè) ? 1. 激發(fā)態(tài)分子去激發(fā)的過程有哪些 ?熒光發(fā)射和磷光發(fā)射經過哪些過程 ?為什么磷光發(fā)射比熒光發(fā)射慢 ? ? 2. 為什么有的分子能夠發(fā)射熒光 ,有的不能 ?有機物的熒光與其結構的關系是怎樣的 ? ? ，寫出 2個可能發(fā)出熒光的化合物，并闡明為什么有可能發(fā)出熒光 。 溶劑 主要表現(xiàn)為 溶劑的極性 、 氫鍵 、 配位鍵 的形成對化合物的熒光發(fā)生變化 。 熒光效率 21:37:32 熒光分子與其他分子相互作用引起熒光強度降低甚至熒光消失的現(xiàn)象為 熒光猝滅 ， 又稱熒光熄滅 。 外轉換使熒光或磷光減弱或 “ 猝滅 ” 。光 21:37:32 熒光分析法 熒光分析法基本概念 熒光強度及影響因素 儀器裝置 定量