【正文】 13。? 老年癡呆癥（Alzheimer180。? 參與腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的蛋白酶有3類：絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶。五、蛋白質(zhì)降解與疾病? 腫瘤進(jìn)展與蛋白質(zhì)降解? 淀粉樣變性病與蛋白質(zhì)降解腫瘤進(jìn)展與蛋白質(zhì)降解? 細(xì)胞外基質(zhì)的降解是腫瘤細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移的條件之一，腫瘤細(xì)胞能使多種蛋白酶的表達(dá)上調(diào)。? P53蛋白分為3個不連續(xù)的結(jié)構(gòu)域：? 殘基1～99組成N端：包含兩個相鄰的轉(zhuǎn)錄激活區(qū)（1～42和43～63）和一個富含Pro/Ala區(qū)（72～91）；? 殘基100～300組成核心區(qū)域：結(jié)合特異性的DNA序列，? C端殘基301～393：包含四聚體化域（325～356）和調(diào)節(jié)區(qū)域（363～393）。– 修復(fù)基因：通過保護(hù)特定序列來維持DNA的完整性，如果突變發(fā)生在編碼修復(fù)酶的基因中，DNA就無法修復(fù)。? 與癌癥相關(guān)的三類基因：– 致癌基因：“加強(qiáng)”細(xì)胞的生長與分裂，“推動”細(xì)胞周期前進(jìn)，促進(jìn)或加劇基因突變的結(jié)果。? SCdk引發(fā)進(jìn)入S期，Cdc6被磷酸化和降解，preRC解體，DNA合成啟動，同時也能避免在同一個起始點再次發(fā)生DNA復(fù)制。DNA合成的準(zhǔn)備與啟動? G1/S期的主要特征是DNA合成。? 水解染色體黏結(jié)蛋白復(fù)合物的分離酶（sparase）與斧形蛋白（securin）結(jié)合，活化的后期促進(jìn)復(fù)合物使斧形蛋白泛素化并降解，分離酶激活，染色體黏結(jié)蛋白復(fù)合物降解，染色體分離。周期蛋白B調(diào)節(jié)細(xì)胞M期? 周期蛋白B在前期合成，在M期與Cdk1結(jié)合，誘導(dǎo)細(xì)胞有絲分裂；? 同時激活后期促進(jìn)復(fù)合物APC/C，使周期蛋白被蛋白酶體泛素系統(tǒng)識別和降解；? 進(jìn)入只有游離Cdk1的后期和間期。– S期出現(xiàn)周期蛋白A，激活依賴S周期蛋白的激酶SCdk，即Cdk2。? 細(xì)胞周期受周期蛋白（cyclin）控制，不同的時相出現(xiàn)不同的周期蛋白。四、蛋白質(zhì)降解與細(xì)胞周期? 蛋白質(zhì)參與細(xì)胞的各種運作，一些蛋白質(zhì)的降解與細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。? 蛋白質(zhì)Wnt能與細(xì)胞表面的卷曲家族成員和低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白質(zhì)（LRP）等二種受體結(jié)合，引發(fā)一系列信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，使Wnt應(yīng)答基因表達(dá)。? 核因子κB抑制劑（IκB）的磷酸化和降解誘導(dǎo)NFκB 的活化。? 核因子κB的激活與核因子κB抑制劑的降解? 蛋白質(zhì)Wnt引發(fā)的信號傳導(dǎo)? 刻缺蛋白的限制性降解引發(fā)信號傳導(dǎo)NFκB信號途徑? 核因子κB（NFκB）：是細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)通路中的重要成員之一，NFκB途徑與前炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。與Ⅱ類MHC分子有關(guān)的抗原提呈? 病原體蛋白質(zhì)被抗原提呈細(xì)胞內(nèi)吞，在晚期內(nèi)體中降解成肽段，并與抗原提呈細(xì)胞中的Ⅱ類MHC分子結(jié)合，完成抗原提呈。蛋白質(zhì)和肽類的抗原性僅與其分子中的某些肽段有關(guān)，并經(jīng)常位于蛋白質(zhì)分子表面，與淋巴系統(tǒng)抗原提呈細(xì)胞的表面免疫球蛋白樣受體結(jié)合，還需經(jīng)過蛋白酶的降解作用，將蛋白質(zhì)抗原降解為大小合適的肽段，進(jìn)而誘發(fā)抗體的產(chǎn)生。? tmRNA能使熄火的核糖體重新工作。第四節(jié) 蛋白質(zhì)降解的生物學(xué)意義? 一、細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的質(zhì)量控制? 二、蛋白質(zhì)降解與蛋白抗原提呈? 三、蛋白質(zhì)降解與細(xì)胞信號傳導(dǎo)? 四、蛋白質(zhì)降解與細(xì)胞周期? 五、蛋白質(zhì)降解與疾病一、細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的質(zhì)量控制? 錯誤折疊的新生肽鏈的降解清除? 非天然結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的清除? tmRNA及其作用熄火核糖體與tmRNA? 核糖體合成新生肽鏈的過程中，當(dāng)mRNA缺失終止密碼子時，肽鏈的合成無法終止，形成熄火（stalled）核糖體，即攜帶肽鏈的tRNA滯留在核糖體的P位，肽鏈合成不能繼續(xù)，新生肽鏈的合成就此“堵塞”。? 參與異常蛋白的再生或分解反應(yīng)，其中11S調(diào)節(jié)子能顯著提高20S蛋白酶體的肽酶活性。? 體外抗原加工反應(yīng)的分析發(fā)現(xiàn)，免疫蛋白酶體是內(nèi)源性抗原加工的蛋白酶。? 蛋白水解功能分別由ββ2和β5上的3個催化亞基Y、Z和X承擔(dān)，即Y/βZ/β2 和X/β5上Thr的OH對底物進(jìn)行親核攻擊。? 蛋白酶體提供了一種全新的蛋白酶，即蘇氨酸蛋白酶。? DNA修復(fù)作用：核苷酸切除與修復(fù)活性。– 類胰蛋白酶(Trypticlike)活性：水解堿性氨基酸羧基端肽鍵。– 類胰凝乳蛋白酶(Chymotrypticlike)活性：水解疏水性氨基酸羧基端肽鍵。VHLCBC類E3 VHLCBC類E3：由連接蛋白Elongin B和C、環(huán)指蛋白RbxCullin類蛋白CulⅡ和底物識別蛋白VHL組成。? 發(fā)現(xiàn)100多種Fbox，都具有WD40重復(fù)序列或富亮氨酸重復(fù)序列。? APC在細(xì)胞有絲分裂末期激活，降解有絲分裂和紡錘體相關(guān)蛋白，使細(xì)胞進(jìn)入分裂后期。環(huán)指（ring finger）結(jié)構(gòu)蛋白? 環(huán)指結(jié)構(gòu)：由8個保守半胱氨酸和組氨酸[CysX2CysX(939)CysX(13)HisX(23)CysX2CysX(448)CysX2Cys)]組成。泛素蛋白連接酶E3的種類? 根據(jù)E3含有的特定結(jié)構(gòu)域，分為三類：– HECT（ Homologous to E6AP carboxyl terminus） E3– 環(huán)指(ring finger)結(jié)構(gòu)蛋白 – U盒型HECT E3? 源于對致瘤病毒HPV的研究，HPV編碼的蛋白E6與細(xì)胞內(nèi)結(jié)合蛋白(E6AP)結(jié)合，并與腫瘤抑制蛋白p53結(jié)合，導(dǎo)致p53的泛素化和降解。 ? 分布廣：存在于細(xì)胞質(zhì) 、細(xì)胞核和細(xì)胞器。哺乳動物細(xì)胞至少有25種E2基因；? 大多數(shù)E2有一個14～16kD的核心，不同E2的核心有35%的同源性，E2核心參與E2與E3的結(jié)合。泛素激活酶和泛素結(jié)合酶? 泛素激活酶E1：? 細(xì)胞內(nèi)只有單一的E1基因，利用不同的轉(zhuǎn)錄起始點產(chǎn)生E1a和E1b，發(fā)揮不同的作用。? 作用：直接影響蛋白質(zhì)的活性和細(xì)胞定位。? 其功能知之甚少，至今才發(fā)現(xiàn)ISG15蛋白修飾相關(guān)的E1酶（ISG15活化酶）和E2酶（即ISG15連接酶），被Ⅰ型干擾素誘導(dǎo)表達(dá)。? ISG15蛋白是第一個被發(fā)現(xiàn)的UBL蛋白。? ? 泛蛋白與其他蛋白質(zhì)之間形成的是異肽鍵（isopeptide bond），泛蛋白C末端Gly的羧基不與目標(biāo)蛋白質(zhì)中的α氨基形成肽鍵，而是與目標(biāo)蛋白質(zhì)Lys（K）側(cè)鏈的ε氨基形成肽鍵。泛素的結(jié)構(gòu)特點? 立體結(jié)構(gòu)外形猶如蝌蚪，即β抓握折疊（βgrasp fold）結(jié)構(gòu)；? 左下方是一個緊密的球狀頭部，由5個β折疊（11014045和6472）和1個α螺旋（2334）組成，N末端在頭部的中間；? 右上方是一條尾巴，尾部的末端即是肽鏈的C端（RGG，ArgGlyGly）。? 泛素氨基酸序列保守性高，在已知的各種物種的泛蛋白中，至多發(fā)現(xiàn)3個氨基酸殘基的改變。羅斯發(fā)現(xiàn)，并獲得2004年度諾貝爾化學(xué)獎。切哈諾沃、阿夫拉姆泛素蛋白水解酶復(fù)合體通路? 細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核內(nèi)ATP依賴性的非溶酶體蛋白質(zhì)降解系統(tǒng)，高效并高度選擇性進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)。? 真核生物形成由生物膜界定的區(qū)域化，如溶酶體；原核生物由蛋白水解酶亞基裝配成一個桶形復(fù)合物，需降解的蛋白質(zhì)進(jìn)入桶內(nèi)水解，即自身區(qū)域化的蛋白水解酶。? 需要考慮因素：一是靶酶容易接近；二是抑制劑對靶酶的抑制不可逆或可逆性很小，即抑制常數(shù)應(yīng)是1010mo1/