【正文】 [15] [美]..《精編分子生物實(shí)驗(yàn)指南》.。再經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的純化,便可提取出高質(zhì)量的DNA。而RNP在鹽溶液中的溶解度受鹽濃度的影響較小，在低鹽溶液中溶解度較大[12]。CTAB法的基本原理是: 由于植物染色體DNA與組蛋白等結(jié)合成為脫氧核糖核蛋白復(fù)合體（deoxyribonuleoprotein, DNP）,存在于細(xì)胞核中，因而，從細(xì)胞中提取DNA時(shí)，首先需要把DNP抽提出來(lái)，其次把蛋白質(zhì)除去，然后除去細(xì)胞中的糖，核糖核酸（RNA）及無(wú)機(jī)離子等，從中分離出DNA?；谶@樣的設(shè)想，本研究就決定以油樟的根莖葉為實(shí)驗(yàn)材料，提取油樟的DNA，從而為分子生物學(xué)分析打下基礎(chǔ)。但在我們考察油樟林之后發(fā)現(xiàn)，在油樟基地油樟林樹(shù)下，幾乎很難再見(jiàn)到其他草本或木本植物，說(shuō)明油樟對(duì)其他植物的生長(zhǎng)影響很大，那么當(dāng)我們把成片的土地用來(lái)種植油樟后，莊稼也會(huì)受到嚴(yán)重影響。然而土地資源畢竟是有限的,而且油樟只適合生長(zhǎng)在酸性土壤中,因此光靠擴(kuò)大種植面積來(lái)提煉樟油是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足日愈膨脹的市場(chǎng)需求的,在不斷提高提煉樟油的技術(shù)水平的同時(shí),我們也應(yīng)該為油樟的長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展做出考慮了。大力發(fā)展油樟，對(duì)農(nóng)民致富、出口創(chuàng)匯、增加稅收、綠化荒山以及維持長(zhǎng)江上游的生態(tài)環(huán)境等都起著十分重要的作用。為了充分開(kāi)發(fā)利用油樟這一優(yōu)勢(shì)資源，國(guó)家科委于1996年將其列入了國(guó)家 “星火計(jì)劃”和名特優(yōu)經(jīng)濟(jì)林商品基地建設(shè)項(xiàng)目[6]。它含有1．8桉葉油素、α萜品醇（松香醇）和香穗烯等40多種成分，經(jīng)過(guò)深度加工可以提取多種重要的天然單離原料，是國(guó)防、輕工、香料、醫(yī)藥和高級(jí)電鍍工業(yè)的稀有原料[5]。1999年，為適應(yīng)西部大開(kāi)發(fā)的趨勢(shì)，增加長(zhǎng)江中上游綠色植被，加大力度保護(hù)油樟樹(shù)這一獨(dú)特資源，建設(shè)全國(guó)最大的木本香料油基地，宜賓縣又決定到2001年，用3年時(shí)間，㎡的油樟樹(shù)基地。宜賓縣被稱(chēng)為全國(guó)保存和發(fā)展最好的天然香料油源基地。1978年樟油產(chǎn)量增長(zhǎng)為356t,比1959年的305 %,到1985年全縣已有油樟林35130畝，采葉油樟樹(shù)達(dá)到369萬(wàn)余株，全縣樹(shù)齡達(dá)到100年以上的油樟64余株，200年以上的9株。1951年修建成渝鐵路時(shí)，油樟被成批地砍伐用作枕木；1958年大辦鋼鐵時(shí)，油樟竟老嫩不拘，被用作燒泡炭的燃料；1960年生活困難時(shí)，為了熬煮樟油，對(duì)幸存的樟樹(shù)進(jìn)行了掠奪性的采摘。宜賓是油樟的分布中心?；ㄆ?5月；果期89月[1]。圓錐花序腋生，纖細(xì)，疏散，通常長(zhǎng)10 cm以上，無(wú)毛，花梗長(zhǎng)13 cm，無(wú)毛；花被長(zhǎng)約2 mm，外側(cè)無(wú)毛，內(nèi)側(cè)密被毛，裂片卵形， mm，花后花被上部自花被管的頂端處整齊環(huán)裂脫落；雄蕊長(zhǎng)約1 mm，被柔毛，第3輪的花絲基部有1對(duì)具短柄狀的腺體， mm，被毛，近心形；雌蕊無(wú)毛，子房近圓球形狀，花柱較子房為長(zhǎng)，柱頭小，盤(pán)狀。要提取油樟的DNA，首先就必須了解油樟。為了闡明本課題的研究?jī)r(jià)值、資料來(lái)源、和技術(shù)路線，特撰寫(xiě)此綜述。再次向以上人士表示我衷心的感謝!文獻(xiàn)綜述油樟根莖葉總DNA提取研究沈志強(qiáng)摘要：本文歲撰寫(xiě)此論文的選題背景、油樟的形態(tài)學(xué)特征、油樟的歷史發(fā)展過(guò)程、對(duì)油樟綜合利用的現(xiàn)狀分析、油樟綜合利用的前景、油樟DNA的提取原理以及此課題的研究?jī)r(jià)值都做了扼要的介紹。感謝本組實(shí)驗(yàn)成員和幾位非本組實(shí)驗(yàn)成員在采集油樟材料時(shí)所給予的幫助。他一絲不茍的科研精神深深地感染了我，才使本研究獲得圓滿(mǎn)成功。參考文獻(xiàn)[1] 《四川植物志》編委會(huì).《四川植物志》第一卷（種子植物）.四川人民出版社，[2] .《農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技》.[3] .《農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技》.[4] 羅中杰，李維一，魏琴，.《四川師范大學(xué)學(xué)報(bào)》[5] .《農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技》.[6] .《農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技》.[7] 徐虹, 鄭敏, 提取.《云南植物研究》.2004 .264 . 451457[8] 周延清.《DNA分子標(biāo)記技術(shù)在植物研究中的應(yīng)用》.[9] [美]..《精編分子生物實(shí)驗(yàn)指南》.[10] 劉萍,代紅軍,張立杰等. DNA 提取方法與植物種類(lèi)的效應(yīng)比較. 《寧夏農(nóng)林科技》. [11] 顧紅雅，瞿禮佳等.《植物基因與分子操作》.[12] 周延清.《DNA分子標(biāo)記技術(shù)在植物研究中的應(yīng)用》.[13] [美].薩姆布魯克，,黎孟楓等譯,侯云德等校.《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》.[14]顧紅雅，瞿禮佳等.《植物基因與分子操作》.[15] 周延清.《DNA分子標(biāo)記技術(shù)在植物研究中的應(yīng)用》.[16] 周延清.《DNA分子標(biāo)記技術(shù)在植物研究中的應(yīng)用》.[17] 徐虹, 鄭敏, 提取.《云南植物研究》.2004 .264 . 451457[18]舒艷群等. RAPD技術(shù)在藥用植物學(xué)研究中的應(yīng)用[J].《中草藥》. 2:147[19]黃萱,高麗美,張永彥, 提取方法《西北植物學(xué)報(bào)》—1106致謝本研究能夠順利完成，是因?yàn)榈玫搅宋业睦蠋?、同學(xué)以及宗場(chǎng)鎮(zhèn)孜巖村陸場(chǎng)主提供的大力幫助和支持，我在此對(duì)他們表示衷心的感謝和誠(chéng)摯的敬意!衷心感謝羅通教授對(duì)本研究的悉心指導(dǎo)。，符合DNA 分子標(biāo)記的最適實(shí)驗(yàn)要求(在擴(kuò)增體系中達(dá)到DNA [18])，適合于科研課題對(duì)大量材料的處理，也適于教學(xué)或用于需要測(cè)序的DNA純化。經(jīng)過(guò)這些改進(jìn)后, 我發(fā)現(xiàn)在整個(gè)油樟根莖葉DNA提取過(guò)程中操作變得容易, 所提DNA 的質(zhì)量也大大提高, 比改進(jìn)前的常規(guī)法要好很多。另外, 在提取過(guò)程中經(jīng)裂解液處理后,細(xì)胞破碎, 次生代謝物被釋放出來(lái), 使提取液變得異常粘稠, 難以操作, 這不僅給提取工作帶來(lái)了很大困難, 并且在沉淀過(guò)程中這些粘稠物質(zhì)會(huì)包裹DNA 一起沉淀形成粘稠的膠狀物, 導(dǎo)致提取的DNA 質(zhì)量差, 溶解困難。通常采取的是加入多酚絡(luò)合物PVP (聚乙烯吡咯烷酮)及抗氧化劑β 巰基乙醇、VitC、DTT (二硫蘇糖醇) 和亞硫酸鈉等方法, 以防止多酚物質(zhì)氧化成醌類(lèi), 避免褐變的發(fā)生[17]。 對(duì)策：離心管蓋子不能被蓋得太嚴(yán)。 配制所有試劑溶液都使用蒸餾去離子水。 用氯仿/異戊醇（24/1）抽提時(shí)，搖晃一定要輕，否則易造成DNA斷裂降解。 對(duì)于高分子量DNA來(lái)說(shuō)，在提取DNA的各個(gè)操作過(guò)程中應(yīng)該始終避免劇烈振動(dòng)，在用槍頭轉(zhuǎn)移DNA過(guò)程中應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡