高二生物細(xì)胞的化學(xué)成分(參考版)
2024-11-13 23:15本頁面
【正文】 。 將人工合成的 探針 用點(diǎn)樣機(jī)點(diǎn)到玻璃或塑料基片上形成高密度的 陣列，將 樣品 DNA用限制性內(nèi)切酶切割成一定大小的片段，變性后用 熒光分子標(biāo)記， 再進(jìn)行 分子雜交操作， 這就是DNA芯片技術(shù) 的基本原理。這種現(xiàn)象稱為核酸分子雜交。 核酸的雜交及其應(yīng)用 在 DNA變性后的復(fù)性過程中，如果將不同種類的 DNA單鏈分子或 RNA分子放在同一溶液中，只要兩種單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對關(guān)系，在適宜的條件（溫度及離子強(qiáng)度）下，就可以在不同的分子間形成雜合雙鏈。 ④ 溶液的 pH過高或過低 ,復(fù)性的速度均會降低 。 DNA復(fù)性的影響因素： ①溫度和時間（緩慢冷卻到室溫） ② DNA的濃度越高 ,復(fù)性的速度越快 。 , Tm的值越大 , Tm的值較大。 DNA的熔解溫度 增色效應(yīng)達(dá)到一半時的溫度或 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)失去一半時的溫度稱為 “ 熔點(diǎn) ” 或解鏈溫度，用 Tm 表示。 RNA的結(jié)構(gòu) A 核糖 P C 核糖 P U 核糖 P P G 核糖 A A G G C U U 核酸的紫外吸收 DNA分子的變性 核酸的變性，復(fù)性及雜交 變性和復(fù)性的含義 性質(zhì)改變： ①溶液 粘度 降低 ②溶液 旋光度 發(fā)生改變 ③ 增色效應(yīng) ：與天然 DNA相比，變性 DNA因其雙螺旋結(jié)構(gòu)破壞，使 堿基充分外露 ，因此， 紫外吸收增加 ，這種現(xiàn)象叫 ~。 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的因素 （ 1）氫鍵： A=T； G≡ C （ 2）堿基堆積力 （ 3）離子鍵 DNA的三級結(jié)構(gòu) ? 定義：雙螺旋進(jìn)一步扭曲形成的更高層次的空間結(jié)構(gòu)。 核酸的化學(xué)組成 核 酸 （ RNA、 DNA） 核苷酸 核苷 磷酸 戊糖 堿基 核糖（ RNA） 脫氧核糖（ DNA） A、 G、 C、 U A、 G、 C、 T 五、核酸 胸腺嘧啶 尿嘧啶 腺嘌呤 鳥嘌呤 胞嘧啶 核苷 戊糖第 1’位的碳與嘧啶堿第 1位的 N以 糖苷鍵 相連結(jié) 戊糖第 1’位的碳與嘌呤堿 第 9位的 N以 糖苷鍵 相連結(jié) C1N1連接； C1N9連接； C1C5連接 （假尿苷） 次黃嘌呤苷（肌肉中含量最多 ） 尿苷 核苷酸 戊糖第 5’位的碳再與磷酸以酯鍵相連 核苷酸的連接方式 核苷酸之間以磷酸二酯鍵連接形成多核苷酸鏈，是 DNA和 RNA的一級結(jié)構(gòu) 。即測定時確定三種量：①加入一定量的酶；②一定時間間隔；③物質(zhì)的增減量 。 ? 酶活力 又稱為酶活性，一般把酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力稱為酶活力，通常以在一定條件下酶所催化的化學(xué)反應(yīng)速度來表示。BBBBBPP P+P O HPPBBBBPPPPPBP（ 7）核酸酶（催化核酸） ? 核酸酶是唯一的非蛋白酶（在原生動物四膜蟲體內(nèi)發(fā)現(xiàn)）。539。539。539。539。539。339。339。339。339。 A + B + ATP ===A ? B + ADP +Pi 例如，丙酮酸羧化酶催化的反應(yīng) 丙酮酸 + CO2 ? 草酰乙酸 339。 吡喃葡萄糖 呋喃果糖 (6) 合成酶 ?合成酶，又稱為連接酶，能夠催化 CC、CO、 CN 以及 CS 鍵的形成反應(yīng)。 OC H 2 O HO HO HO HO H OC H 2 O H C H 2 O HO HO HO H(5) 異構(gòu)酶 異構(gòu)酶催化各種同分異構(gòu)體的相互轉(zhuǎn)化，即底物分子內(nèi)基團(tuán)或原子的重排過程。 ? 主要包括 醛縮酶 、水化酶及脫氨酶等。 ? 主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。例如，谷丙轉(zhuǎn)氨酶催化的氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng)。 ? 如，乳酸 (C3H6O3)脫氫酶催化乳酸的脫氫反應(yīng)。 C H 3 C H C O O HO HN A D + H +C H 3 C C O O HON A D H（四）、酶的分類及命名 1. 酶的分類 (1) 氧化 還原酶 ? 氧化 還原酶催化氧化 還原反應(yīng)。其中大部分是一些無機(jī)離子和小分子簡單有機(jī)物。非竟?fàn)幮砸种撇? 能通過增大底物濃度的來消除。不是 與底物競爭活性中心，所以稱為非競爭性抑制劑。 竟?fàn)幮砸种仆ǔ？梢酝ㄟ^增大底物濃度，即提高底 物的競爭能力來消除。根椐抑制劑與 酶結(jié)合的情況，又可以分為兩類： 競爭性抑制： 某些抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)與底物相似，因而能與底物 竟?fàn)幣c酶活性中心結(jié)合。 (2)可逆抑制作用 ： 抑制劑與酶蛋白以非共價方式結(jié)合，引起酶活性 暫時性喪失。如有機(jī)磷毒劑二異丙基氟磷酸酯。 ? 式形成比較穩(wěn)定的復(fù)合體或結(jié)合物。由于酶蛋白變性造成的酶失活不屬于酶抑制劑作用。 對酶反應(yīng)的影響 ? 有些物質(zhì)能與酶分子上某些必須基團(tuán)結(jié)合 ,使 酶的活性中心 的化學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變，導(dǎo)致酶活力下降或喪失，稱為 酶的抑制作用 ? 酶抑制劑對酶有選擇性，很多藥物、毒物和用于戰(zhàn)爭的毒劑都是酶抑制劑。 ? Km值表示酶與底物之間的 親和程度 ： Km值大表示親和程度小，酶的催化活性低 。 ? 不同的酶具有不同 Km值，它是酶的一個重要的特征物理常數(shù)。 (三）影響酶促反應(yīng)的因素 產(chǎn) 物 0 時 間 初速度 ? 米氏常數(shù) Km的意義 : ? 米氏常數(shù)是 反應(yīng)速度為最大值的一半時的底物濃度 。 混合 級反應(yīng)特征 ： 隨著底物濃度的增高 反 應(yīng)速度不再成正比例加 速。
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