乙肝表面抗原的elisa法定量分析方法學(xué)驗證doc(參考版)
2025-07-20 15:53本頁面
【正文】 懇請閱讀此篇論文的老師、同學(xué)多予指正不勝感激。最后要感謝我的家人以及我的朋友們對我的理解、支持、鼓勵和幫助正是因為有了他們我所做的一切才更有意義也正是因為有了他們我才有了追求進(jìn)步的勇氣和信心。在此向幫助和指導(dǎo)過我的各位老師及同學(xué)表示最衷心的感謝！還有要感謝這篇論文所涉及到的各位學(xué)者。在此我特別要感謝我的導(dǎo)師,無論從論文的選題、文獻(xiàn)的采集、框架的設(shè)計、結(jié)構(gòu)的布局到最終的論文定稿從內(nèi)容到格式從標(biāo)題到標(biāo)點她都費盡心血。致 謝致 謝 論文的寫作是枯燥艱辛而又富有挑戰(zhàn)的。標(biāo)準(zhǔn) 曲線R2=，%，低濃度樣品（）的檢測在準(zhǔn)確性和精密度方面都低于高濃度樣品，不適合低濃度樣品的檢測。本實驗對上海酶聯(lián)生物生產(chǎn)的HBsAg的ELISA法定量分析試劑盒進(jìn)行準(zhǔn)確度，精密度和檢測限等方法學(xué)驗證。ELISA法即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。參考文獻(xiàn)【1】魏來，陶其敏．努力規(guī)范肝臟疾病的免疫學(xué)診斷．中華檢驗雜志，2003，26：69—71【2】劉曉梅，張世蘭．HBsAg陰性結(jié)果的慢性乙型肝炎患者病毒血癥水平與臨床的關(guān)系[J】．臨床檢驗雜志，2004，22(5)：381382．【3】 Weber B, Dengler T, Berger A .Evaluation of two new autom ated assays for hepatitis B virus surface HBsAg detection IMMUIITE HBsAg_and IMMUlITE 2000 HBsAg[ J] ．J .Clin Microbiol,2003 ,41,(1 )；13 5—143 ．【4】鄭懷競．臨床免疫學(xué)檢驗質(zhì)量保證[M]．北京：北京醫(yī)科大學(xué)，中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1995，99．【5】王朝陽，段文強 ,乙肝兩對半陰陽性之臨床意義，中國社區(qū)醫(yī)師雜志，2007，26(1)：1213. 綜 述綜 述目前乙肝病毒感染是我國最常見的感染性疾病之一，而HBsAg是乙肝病毒感染后最早出現(xiàn)的血清標(biāo)志物之一，因此HBsAg的檢測是診斷肝炎病毒感染的重要依據(jù)。 綜上分析，該試劑盒對于高濃度生物樣品的檢測具有良好的準(zhǔn)確性和精密度，而對于低濃度樣品的檢測在準(zhǔn)確性和精密度方面都低于高濃度樣品，且與實際值有一定差值，因此不適合低濃度樣品的檢測。在做3組數(shù)據(jù)的板間精密度分析時，發(fā)現(xiàn)6，3，%，%，呈遞增趨勢，前兩個濃度滿足對ng/ml級RSD水平的一般應(yīng)15%的要求。在精密度方面，HBsAg 6ng/，顯示孔間差異較大，精密度不高，但是也符合ng/ml級RSD水平的一般應(yīng)15%的要求，與其它孔比較差 異較大，可能是由于操作不當(dāng)引起。4 結(jié)果分析及應(yīng)用評價 第一組數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線R2=，顯示具有良好的相關(guān)性，HBsAg 濃度為6ng/ml和3ng/ml %%，符合限度要求在85%—115%的范圍內(nèi)。精密度則表示分析方法的可重復(fù)性，是對同一樣品每次測定結(jié)果的一致性，用標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，可做板內(nèi)和板間的驗證，對于ug/ml級水平的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差一般應(yīng)10%, ng/ml級水平的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差一般應(yīng)15%。標(biāo)準(zhǔn)曲線指樣品所測定的濃度值與吸光度的關(guān)系，以樣品濃度為X軸，以吸光度為Y軸，繪制回歸曲線，用回歸方程及R值來評件曲線的可信度，該實驗所用了6個濃度點建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。:因為絕大多數(shù)患者外周血中可出現(xiàn)HBsAg，含量在5ng/ml ～600ug/ml之間，高者可達(dá)2000ug／ml以上【5】，滿足了現(xiàn)階段文獻(xiàn)報道的最低濃度值。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度OD值，從而計算樣品濃度。反應(yīng)終止時，固相載體上酶標(biāo)抗原或抗體被結(jié)合量(免疫復(fù)合物)與待測標(biāo)本中待檢抗體或抗原的量呈一定比例。本次實驗是對實驗室的一種試劑盒，即上海酶聯(lián)生物有限公司生產(chǎn)的HBsAg的酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)定量分析試劑盒進(jìn)行的方法學(xué)驗證，以判斷該試劑盒是否能用于臨床樣本分析。目前普遍使用的HBsAg試劑盡管在制備時采用了高親和力的單克隆抗體，并且使包被抗體、。 方法概述 酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固
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