大豆脂肪酸含量的測(cè)定以及色譜分析畢業(yè)論文(參考版)
2025-06-30 14:10本頁(yè)面
【正文】 豆粉直接甲酯化法有效避免了檢測(cè)樣品的取樣誤差和長(zhǎng)時(shí)間加熱處理對(duì)脂肪酸組分的影響，測(cè)得結(jié)果更加接近真實(shí)值，此法可應(yīng)用于多種油料植物的脂肪酸組分含量的測(cè)定； 而籽粒直接甲酯化法由于不同大豆籽粒間脂肪酸組分含量存在差異，導(dǎo)致脂肪酸檢測(cè)結(jié)果中存在取樣誤差，因此該方法適用于低世代分離群體的單籽?；虬胱蚜z測(cè)分析。該文在前人的研究基礎(chǔ)上對(duì)大豆脂肪酸組分含量的檢測(cè)方法進(jìn)行了探索，提出了改良的樣品處理方法，與傳統(tǒng)的索氏抽提法相比具有一定的優(yōu)勢(shì)，其簡(jiǎn)化了大豆油脂的提取程序，縮短了檢測(cè)所需時(shí)間，節(jié)省了試驗(yàn)費(fèi)用，減少了工作量。以往人們普遍使用的方法是利用索氏提取器提取籽粒中的油脂，經(jīng)過(guò)一系列甲酯化步驟后進(jìn)樣測(cè)試。如圖所示，我們選取出了十二個(gè)亞油、亞麻比較高的品種。營(yíng)養(yǎng)學(xué)家同時(shí)也認(rèn)為，亞麻酸含有的3個(gè)不飽和鍵不穩(wěn)定，容易引起大豆油脂的氧化變性，降低油的品質(zhì)，并且工業(yè)生產(chǎn)中往往會(huì)使用脂肪酸的脫氫技術(shù)，來(lái)降低亞麻酸的含量，同時(shí)增加亞油酸的含量。種質(zhì)名稱棕櫚酸硬脂酸油酸亞油酸亞麻酸油亞比冀豆7號(hào):1淮陽(yáng)春豆:1合豐37:1大粒黃:1犍為泉水豆:1橫峰烏豆:1合豐24號(hào):1和龍油太:1醬黃豆:1黃大粒:1東山69:1龍川黃牛毛:1黃臍:1大屯小黑豆:1二粒黑豆：1 圖為冀豆7號(hào)氣相色譜圖 圖為二粒黃豆氣相色譜圖 篩選出的高油亞比品種亞麻酸參與維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，同時(shí)能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞膜的適應(yīng)性。 篩選出的高油亞比品種脂肪酸的組分配比是衡量大豆油品質(zhì)優(yōu)劣的一個(gè)重要指標(biāo)，油亞比的高低可對(duì)大豆品種的優(yōu)劣進(jìn)行一定程度的區(qū)分。 圖3 正常甲酯化時(shí)間提取大豆脂肪酸的氣相色譜分析譜 圖4 甲酯化時(shí)間提取大豆脂肪酸的氣相色譜分析譜圖 大豆中脂肪酸成分的GC測(cè)定 將經(jīng)過(guò)甲酯化的供試大豆樣品進(jìn)行氣相色譜分析，如圖，樣品的色譜圖清晰呈現(xiàn)5 個(gè)峰，與標(biāo)準(zhǔn)試樣對(duì)比，大豆樣品色譜圖的5 個(gè)峰出現(xiàn)時(shí)間先后依次為軟脂酸、硬脂酸、油酸、亞油酸和亞麻酸，軟脂酸的保留時(shí)間為 min， min， min。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)甲酯化超過(guò)20 h時(shí)，樣品的檢出效果不好，得到的峰值偏低，且有雜峰出現(xiàn)。 不同甲酯化時(shí)間對(duì)脂肪酸提取效果比較 采用醇鈉作為甲酯化試劑，酯化反應(yīng)快速且完全。 圖1 苯和石油醚做萃取劑提取大豆脂肪酸的氣相色譜分析譜圖 圖2 正己烷做萃取劑提取大豆脂肪酸的氣相色譜分析譜圖 結(jié)果顯示，由苯、石油醚以及正己烷做溶劑提取脂肪酸，二者提取結(jié)果相差不大，苯和石油醚的混合物效果略好?？紤]到試劑的毒性問(wèn)題，本文采用了毒性相對(duì)較小的苯、石油醚和正己烷作溶劑，并對(duì)二者的提取效果進(jìn)行了比較。 如韓菊[16][17]人用二氯甲烷代替三氯甲烷萃取類脂，結(jié)果基本一致，而CH2Cl2的毒性小得多，更安全可靠。這種方法幾乎可把所有的脂類包括結(jié)合態(tài)脂從組織中提取出來(lái)。Folch法是用CHC13/CH3OH（2:1）的溶劑先將脂類從動(dòng)植物組織中萃取出來(lái)，隨帶出的水形成一定組成的三元溶劑混合物。 色譜分析條件：美國(guó)安捷倫公司 Agilent6890N 氣相色譜儀，F(xiàn)FAP 彈性石英毛細(xì)柱（30m320μm），進(jìn)樣口為 Agilent 分流/不分流進(jìn)樣口，進(jìn)樣口溫度為 250℃，F(xiàn)ID 檢測(cè)器溫度為 250℃，氮?dú)饬魉?40ml/min，氫氣流速 40ml/min，空氣流速 450ml/min，分流比 20:1，樣品進(jìn)樣量 1μl，程序升溫：初始溫度 80℃，25℃/min 到 200℃，再以 3℃/min 到 215℃，最后以 2℃/min到 230℃。 色譜條件 為了獲得較好的分離效果、較高的靈敏度和理想的分辨率，分析前對(duì)不同的進(jìn)樣口壓力、載氣流速、程序升溫條件等實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化。檢測(cè)方法：將供試材料用研磨儀充分研磨，磨好后取 g 的豆粉放入 mL 離心管中，加1 mL脂肪提取液，振蕩混勻10 min，離心后取上清，加 1 mol/L 甲醇鈉甲酯化，靜置 10
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