大豆脂肪酸含量的測(cè)定以及色譜分析畢業(yè)論文-在線瀏覽
2024-08-07 14:10本頁面
【正文】 是由于軟脂酸和硬脂酸為飽和的脂肪酸，容易引起人的心血管疾病，油酸、亞油酸、亞麻酸作為不飽和脂肪酸，可以降低血壓，軟化血管，降低膽固醇，非常有益于人體的健康，尤其是亞油酸和亞麻酸。亞麻酸參與維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，同時(shí)能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞膜的適應(yīng)性。營(yíng)養(yǎng)學(xué)家同時(shí)也認(rèn)為，亞麻酸含有的3個(gè)不飽和鍵不穩(wěn)定，容易引起大豆油脂的氧化變性[9]，降低油的品質(zhì)，并且工業(yè)生產(chǎn)中往往會(huì)使用脂肪酸的脫氫技術(shù)，來降低亞麻酸的含量，同時(shí)增加亞油酸的含量，但此技術(shù)容易產(chǎn)生順式脂肪酸，對(duì)人體健康不利，因此大豆油中，脂肪酸的組分配比是衡量大豆油品質(zhì)優(yōu)劣的一個(gè)重要指標(biāo)。該試驗(yàn)還對(duì)來自不同地區(qū)不同類型的174份的大豆材料進(jìn)行了脂肪酸含量的分析，結(jié)果表明，進(jìn)化程度越高，亞麻酸、軟脂酸含量越低，油酸含量越高，但整體上五種脂肪酸含量多少的分布沒有變化，仍然是不飽和脂肪酸居多，大約占總量的85%，并且亞油酸能到達(dá) 0%以上。我們主要目的是要提高油酸和亞油酸的含量，降低飽和脂肪酸和亞麻酸的含量。因此應(yīng)重視大豆脂肪酸組分的配比，以便開展大豆品質(zhì)育種，提高脂肪含量。植物脂肪酸的甲酯化方法常用的有酸催化、堿催化以及皂化酯化等。在分析實(shí)際樣品時(shí)，要根據(jù)樣品的具體特點(diǎn)選擇合適的甲酯化方法。此法花費(fèi)時(shí)間極長(zhǎng)，溶劑用量大，而且效率并不高，但檢測(cè)精確度高。豆粉直接甲酯化法適用于大量樣品的快速檢測(cè)，可以避免傳統(tǒng)方法長(zhǎng)時(shí)間的加熱對(duì)脂肪酸的組分產(chǎn)生影響，而且此法精密度上與索氏抽提法沒有顯著差異，可以節(jié)約大量的時(shí)間，提高實(shí)驗(yàn)的效率。從俄國(guó)植物學(xué)家茨維特（）在1901年首先發(fā)現(xiàn)并命名色譜，到現(xiàn)在氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的成熟，氣相色譜在分析中逐漸確立了自己在歷史舞臺(tái)上的位置。當(dāng)氣化后的試樣被載氣帶入色譜柱中運(yùn)行時(shí)，組份就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次分配。經(jīng)過一定的柱長(zhǎng)后，便彼此分離，按順序離開色譜柱進(jìn)入檢測(cè)器，產(chǎn)生的離子流訊號(hào)經(jīng)放大后，在記錄器上描繪出各組份的色譜峰[13]。采用苯：石油醚=1：1萃取液進(jìn)行GC分析后，脂肪酸的峰值會(huì)更高，峰也比較標(biāo)準(zhǔn)。研究對(duì)大豆脂肪酸分析的前處理過過程進(jìn)行了條件優(yōu)化，以期為育種工作者進(jìn)行材料篩選提供簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。分別采用正己烷和苯：石油醚=1：1對(duì)5 。 將樣品用萬能粉碎機(jī)粉碎后，加入1ml正己烷，室溫放置5h。吸取 1 μL 上清液進(jìn)入氣相色譜。最終確定了以下色譜條件。2 結(jié)果與分析 不同萃取溶劑對(duì)脂肪酸提取效果比較 到目前為止，脂肪酸的提取大部分采用采用Folch[14]法或Bligh和Dyer[15]法這兩類比較經(jīng)典的提取方法。CHCl3相含脂類，水相含非脂溶性的物質(zhì)。但是CHCl3的毒性較大，還會(huì)引起一些副反應(yīng)，所以人們還發(fā)展了許多其它的溶劑萃取系統(tǒng)。常用的萃取溶劑還有苯，石油醚、正己烷、乙醚、正己烷/異丙醇、正己烷：甲醇(1:1， V/V)、乙醚乙醇(1: 3，V/V)，苯：石油醚(1:1， V/V)等。兩種方法的色譜圖如圖1和圖2所示。所以本實(shí)驗(yàn)對(duì)50個(gè)樣品進(jìn)行脂肪酸提取采用的是苯和石油醚作為脂肪酸的提取溶劑。但是甲酯化試劑需要現(xiàn)用現(xiàn)配， 甲酯化試劑只能使用3 d，超過3 d的試劑起不到酯化的效果，無法檢出脂酸酸甲酯。因此，在做大量樣品分析時(shí)，需要分批量做樣品前處理，每次甲酯化20份左右材料為宜 以免甲酯化超過20h導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。 圖5 脂肪酸氣相色譜圖 幾種大豆品種中脂肪酸的組成及相對(duì)含量 種質(zhì)名稱 棕櫚酸 硬脂酸 油酸 亞油酸 亞麻酸油酸/亞油酸比二粒黑豆：1高作選1號(hào):1灌云海白花:1黃大粒:1龍川黃牛毛:1東農(nóng)36號(hào):1東山69:1東山白馬豆:1二季早豆2:1合豐24號(hào):1花綠黃豆:1花色豆:1化眉豆:1淮陽春豆:1黃豆:1黃豆2:1合豐37:1和龍油太:1黑河一號(hào):1橫峰烏豆:1花黑虎:1花綠黃豆:1花色豆:1黃稈豆:1黃臍:1回茬小黃豆:1冀豆7號(hào):1犍為泉水豆:1劍格化林雞窩豆:1醬黃豆:
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