【正文】 最后，感謝父母及所有親人的支持，他們是我能夠順利完成學業(yè)的堅強后盾，再次衷心感謝所有關心、幫助和鼓勵過我的親人、老師、同學和朋友。值此論文完成之際，謹向?qū)熩w曉丹老師致以崇高的敬意和感謝，老師的指導和教誨，為我以后的工作和學習之路指引了方向。參考文獻[1] 秦俊哲,[M].西安: 西北農(nóng)業(yè)科技大學出版社, 2003:2131.[2] 賀偉, 秦國夫,[J].真菌學報, 1996, 15(1):915.[3] 林志斌, 章達敏, [J].微生物學通報, 1996, 23(24): 239240.[4] 秦俊哲，陳明，陳合等. 食藥用真菌多糖的研究現(xiàn)狀與展望[J].中國食用菌，2006,2:69.[5] [M].北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社,1997:1681[6] 李延平，吳科鋒，劉義．蜜環(huán)菌多糖對環(huán)磷酰胺損傷小鼠骨髓細胞的保護作用［J］．中國中藥雜 志， 2005，30(4):283285．[7] Li YP，WuKF，Liu Y．Protective effect of Armillaria melleapolysaccharide on mice bone marro w cell damage caused bycyclophosphamide［J］．Zhongguo Zhong Yao Za Zhi，2005，30 (4): 283286．[8] 王惠國，馮寶民．蜜環(huán)菌多糖免疫調(diào)節(jié)活性的實驗研究［J］．陜西科技大學學報，2009，27(2): 6264．[9] 于敏，沈業(yè)壽，梅一德等．蜜環(huán)菌多糖的免疫增強作用研究［J］．生物學雜志，2001，18(4):16．[10] 林志彬，章達敏，夏冬等．蜜環(huán)菌多糖對小鼠免疫功能的影響［J］．中國藥理學通報，1988，4(2): 9396．[11] 戴鈴，王華，沈業(yè)壽等．蜜環(huán)菌多糖對小鼠腹腔巨噬細胞免疫功能的影響［J］．生物學雜志，200 0，17(5): 2021．[12] 于敏，沈業(yè)壽．蜜環(huán)菌菌索多糖對小鼠血糖及急性毒性作用研究［J］．中國食用菌，2002，21(1) : 3537．[13] 操玉平，于敏，沈業(yè)壽．蜜環(huán)茵多糖對損傷性胰島細胞分泌功能的影響［J］．中國食用菌，2009， 28(1) : 3941．[14] 陸軍，操玉平，于敏，蜜環(huán)菌菌索多糖對四氧嘧啶致胰島細胞損傷的保護作用［J］．中國藥理學 通報，2008，24( 9) : 1120．[15] Ng LT，Wu SJ，Tsai JY，et al． Antioxidant activities of cultured Armillariella mellea［J］．Pri kl Biokhim Mikrobiol，2007，43( 4) : 495 ～ 500．[16] Kim YS，Im J，Choi JN，Kang SS，et al． Induction of CAM － 1 by Armillariella mellea is mediated through gengeneration of reactive oxygen species and JNK activation［J］．Ethnopharmac ol，2010，128(1):198205．[17] 沈明花，崔海丹，王欣彤．榛蘑多糖的抗氧化作用研究［J］．食品科技，2010，35(5) : 7779．[18] 虞磊，沈業(yè)壽，吳建民等．蜜環(huán)菌菌索多糖抗衰老作用研究［J］．中成藥，2006，28(7): 994995．[19] 丁誠實，沈業(yè)壽，彭世奇．蜜環(huán)菌殼聚糖對果蠅壽命和D－半乳糖致衰老小鼠的影響［J］．食品科 學，2007，28(4):302304．[20] 張穎，沈業(yè)壽，葛繼志等．蜜環(huán)菌多糖對低能離子束誘變作用的恢復效應［J］．激光生物報，200 2，11(4): 272275．[21] Wu SJ，Tsai JY，Lai MN，et al，Armillariella mellea showsanti－inflammatory activity by inhibi ting the expression of NO，iNOS，COX－2 and cytokines in THP－1 cells［J］．Am J Chin Me d，2007, 35(3): 507516．[22] 李巧云，閻月榮．單掃描示波極譜法連測五味子、榛蘑中的銅和鋅［J］．生析試驗室，2005，24(1) :5255．[23] [M].:9~27,118137[24] 張國鋒，刁其玉，屠焰．荷花蜂花粉多糖提取條件的研究[J]．飼料工業(yè)，2009，30 (20): 47．[25] 徐 揚，楊保偉，柴博華，等. 超聲波—酶法提取海帶多糖及其抑菌活性[J]. 農(nóng)業(yè)工程學報，2010， 26(1)：356362.[26] 劉利萍，鐘引飛．海帶多糖的超聲波提取及對自由基的清除作用研究[J]．紹興文理學院學報，200 5，13(1)：4951．[27] 尚紅偉．大棗多糖提取分離過程研究[D].西安：,6.[28] 陳紅,崔海月,李玉擴,劉秀奇,樊紅秀,[J]. 吉林農(nóng)業(yè) 大學學報. 2011,33(5):581586致謝 本論文是在趙曉丹老師的精心指導下完成的。(5) 比較4種方法得到的榛蘑多糖得率，超聲波—酶聯(lián)合提取法比其他三種方法有明顯的優(yōu)勢。所以超聲波—酶法聯(lián)合提取榛蘑多糖的最佳工藝條件為：料液比1:40，%，酶解溫度50℃，酶解時間90min，超聲功率300W，超聲時間40min，超聲溫度60℃，%。最佳工藝條件為A2B3C2D2 ，即料液比1:40，超聲時間為40min，超聲功率為300W，超聲溫度為60℃，%(3)超聲波—酶法聯(lián)合提取榛蘑多糖實驗中，根據(jù)單因素實驗和正交試驗結果，各因素對多糖得率影響程度大小為：加酶率 酶解溫度 pH 酶解時間。表37提取方法得率（%）傳統(tǒng)水提法超聲波法酶法超聲波酶法4 結論(1)傳統(tǒng)水提法提取榛蘑多糖得率較低，%。 根據(jù)超聲波酶法得到的最佳工藝條件中的酶解條件，只進行酶解，%，酶解時間90min，酶解溫度50℃，提取液不再進行超聲波處理，經(jīng)抽濾、除蛋白、離心、醇沉等操作后，得到榛蘑多糖。提取液經(jīng)過抽濾、除蛋白、離心、醇沉等操作，得到榛蘑多糖，并重復三次。 綜上所述，超聲波—酶法聯(lián)合提取榛蘑多糖的最佳工藝條件為：料液比1:40，%，酶解溫度50℃，酶解時間90min，超聲功率300W，超聲時間40min，超聲溫度60℃。表 34 分析因素與水平水平因素A加酶率/%B酶解時間/minC酶解溫度/℃DpH1804529050310055根據(jù)表35進行正交試驗，得到結果如下 表35正交試驗直觀分析表序號A加酶率/%B酶解時間/minC酶解溫度/℃DpH得率/%180452905031005548050590556100457805589045910050K1K2K3R表36方差分析表因素偏差平方和自由度F比F臨界值加酶率2時間2溫度2pH2誤差8 根據(jù)表336中數(shù)據(jù)，極差R表明，正交實驗中，各因素對多糖提取率影響程度大小為：加酶率 酶解溫度 pH 酶解時間。因此，為了更好地考察提取的最優(yōu)條件，綜合各個單因素，從而進一步設計正交試驗，各組試驗均按照常規(guī)試驗方法進行，通過測定各組試驗的提取率，經(jīng)過直觀分析，最后得出最佳的提取水平組合。這是纖維素酶的活性易受pH的影響，如果pH不適宜，會使酶的活性降低。 %，提取時間90min，酶解溫度50℃，改變pH。這是因為開始時溫度上升，纖維素酶的活力增強，多糖得率迅速提高，而超過50℃后，高溫使纖維素酶的活性不斷降低，所以多糖得率急劇下降。 %，提取時間90min，pH ，改變酶解溫度。圖37不同酶解時間下的榛蘑多糖得率 試驗結果如圖37所示：隨著酶解時間的延長，榛蘑多糖得率不斷升高，酶解90min后，趨于平穩(wěn)，不再有明顯的增加。由于纖維素酶價格較高， %左右，比較合適。纖維素酶能夠分解纖維素，破壞植物的細胞壁，有利于多糖的提取。 固定酶解溫度50℃，提取時間90min，pH ，改變加酶率。%，高于其