【正文】 1:45203506081:45302506591:454030055K1K2K3R表33方差分析表因素偏差平方和自由度F比F臨界值料液比2時(shí)間2功率2溫度2誤差8 根據(jù)表333中數(shù)據(jù)，極差R表明，超聲波法提取榛蘑多糖正交實(shí)驗(yàn)中，各因素對(duì)多糖提取率影響程度大小為：料液比 提取時(shí)間 超聲功率 溫度。%，高于其他條件下的得率，所以該最佳工藝條件成立。纖維素酶能夠分解纖維素，破壞植物的細(xì)胞壁，有利于多糖的提取。圖37不同酶解時(shí)間下的榛蘑多糖得率 試驗(yàn)結(jié)果如圖37所示：隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)，榛蘑多糖得率不斷升高，酶解90min后，趨于平穩(wěn)，不再有明顯的增加。這是因?yàn)殚_始時(shí)溫度上升，纖維素酶的活力增強(qiáng)，多糖得率迅速提高，而超過50℃后，高溫使纖維素酶的活性不斷降低，所以多糖得率急劇下降。這是纖維素酶的活性易受pH的影響，如果pH不適宜，會(huì)使酶的活性降低。表 34 分析因素與水平水平因素A加酶率/%B酶解時(shí)間/minC酶解溫度/℃DpH1804529050310055根據(jù)表35進(jìn)行正交試驗(yàn)，得到結(jié)果如下 表35正交試驗(yàn)直觀分析表序號(hào)A加酶率/%B酶解時(shí)間/minC酶解溫度/℃DpH得率/%180452905031005548050590556100457805589045910050K1K2K3R表36方差分析表因素偏差平方和自由度F比F臨界值加酶率2時(shí)間2溫度2pH2誤差8 根據(jù)表336中數(shù)據(jù)，極差R表明，正交實(shí)驗(yàn)中，各因素對(duì)多糖提取率影響程度大小為：加酶率 酶解溫度 pH 酶解時(shí)間。提取液經(jīng)過抽濾、除蛋白、離心、醇沉等操作，得到榛蘑多糖，并重復(fù)三次。表37提取方法得率（%）傳統(tǒng)水提法超聲波法酶法超聲波酶法4 結(jié)論(1)傳統(tǒng)水提法提取榛蘑多糖得率較低，%。所以超聲波—酶法聯(lián)合提取榛蘑多糖的最佳工藝條件為：料液比1:40，%，酶解溫度50℃，酶解時(shí)間90min，超聲功率300W，超聲時(shí)間40min，超聲溫度60℃，%。參考文獻(xiàn)[1] 秦俊哲,[M].西安: 西北農(nóng)業(yè)科技大學(xué)出版社, 2003:2131.[2] 賀偉, 秦國(guó)夫,[J].真菌學(xué)報(bào), 1996, 15(1):915.[3] 林志斌, 章達(dá)敏, [J].微生物學(xué)通報(bào), 1996, 23(24): 239240.[4] 秦俊哲，陳明，陳合等. 食藥用真菌多糖的研究現(xiàn)狀與展望[J].中國(guó)食用菌，2006,2:69.[5] [M].北京: 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1997:1681[6] 李延平，吳科鋒，劉義．蜜環(huán)菌多糖對(duì)環(huán)磷酰胺損傷小鼠骨髓細(xì)胞的保護(hù)作用［J］．中國(guó)中藥雜 志， 2005，30(4):283285．[7] Li YP，WuKF，Liu Y．Protective effect of Armillaria melleapolysaccharide on mice bone marro w cell damage caused bycyclophosphamide［J］．Zhongguo Zhong Yao Za Zhi，2005，30 (4): 283286．[8] 王惠國(guó)，馮寶民．蜜環(huán)菌多糖免疫調(diào)節(jié)活性的實(shí)驗(yàn)研究［J］．陜西科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，27(2): 6264．[9] 于敏，沈業(yè)壽，梅一德等．蜜環(huán)菌多糖的免疫增強(qiáng)作用研究［J］．生物學(xué)雜志，2001，18(4):16．[10] 林志彬，章達(dá)敏，夏冬等．蜜環(huán)菌多糖對(duì)小鼠免疫功能的影響［J］．中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，1988，4(2): 9396．[11] 戴鈴，王華，沈業(yè)壽等．蜜環(huán)菌多糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞免疫功能的影響［J］．生物學(xué)雜志，200 0，17(5): 2021．[12] 于敏，沈業(yè)壽．蜜環(huán)菌菌索多糖對(duì)小鼠血糖及急性毒性作用研究［J］．中國(guó)食用菌，2002，21(1) : 3537．[13] 操玉平，于敏，沈業(yè)壽．蜜環(huán)茵多糖對(duì)損傷性胰島細(xì)胞分泌功能的影響［J］．中國(guó)食用菌，2009， 28(1) : 3941．[14] 陸軍，操玉平，于敏，蜜環(huán)菌菌索多糖對(duì)四氧嘧啶致胰島細(xì)胞損傷的保護(hù)作用［J］．中國(guó)藥理學(xué) 通報(bào)，2008，24( 9) : 1120．[15] Ng LT，Wu SJ，Tsai JY，et al． Antioxidant activities of cultured Armillariella mellea［J］．Pri kl Biokhim Mikrobiol，2007，43( 4) : 495 ～ 500．[16] Kim YS，Im J，Choi JN，Kang SS，et al． Induction of CAM － 1 by Armillariella mellea is mediated through gengeneration of reactive oxygen species and JNK activation［J］．Ethnopharmac ol，2010，128(1):198205．[17] 沈明花，崔海丹，王欣彤．榛蘑多糖的抗氧化作用研究［J］．食品科技，2010，35(5) : 7779．[18] 虞磊，沈業(yè)壽，吳建民等．蜜環(huán)菌菌索多糖抗衰老作用研究［J］．中成藥，2006，28(7): 994995．[19] 丁誠(chéng)實(shí)，沈業(yè)壽，彭世奇．蜜環(huán)菌殼聚糖對(duì)果蠅壽命和D－半乳糖致衰老小鼠的影響［J］．食品科 學(xué)，2007，28(4):302304．[20] 張穎，沈業(yè)壽，葛繼志等．蜜環(huán)菌多糖對(duì)低能離子束誘變作用的恢復(fù)效應(yīng)［J］．激光生物報(bào)，200 2，11(4): 272275．[21] Wu SJ，Tsai JY，Lai MN，et al，Armillariella mellea showsanti－inflammatory activity by inhibi ting the expression of NO，iNOS，COX－2 and cytokines in THP－1 cells［J］．Am J Chin Me d，2007, 35(3): 507516．[22] 李巧云，閻月榮．單掃描示波極譜法連測(cè)五味子、榛蘑中的銅和鋅［J］．生析試驗(yàn)室，2005，24(1) :5255．[23] [M].:9~27,118137[24] 張國(guó)鋒，刁其玉，屠焰．荷花蜂花粉多糖提取條件的研究[J]．飼料工業(yè)，2009，30 (20): 47．[25] 徐 揚(yáng)，楊保偉，柴博華，等. 超聲波—酶法提取海帶多糖及其抑菌活性[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2010， 26(1)：356362.[26] 劉利萍，鐘引飛．海帶多糖的超聲波提取及對(duì)自由基的清除作用研究[J]．紹興文理學(xué)院學(xué)報(bào)，200 5，13(1)：4951．[27] 尚紅偉．大棗多糖提取分離過程研究[D].西安：,6.[28] 陳紅,崔海月,李玉擴(kuò),劉秀奇,樊紅秀,[J]. 吉林農(nóng)業(yè) 大學(xué)學(xué)報(bào). 2011,33(5):581586致謝 本論文是在趙曉丹老師的精心指導(dǎo)下完成的。最后，感謝父母及所有親人的支持，他們是我能夠順利完成學(xué)業(yè)的堅(jiān)強(qiáng)后盾，再次衷心感謝所有關(guān)心、幫助和鼓勵(lì)過我的親人、老師、同學(xué)和朋友。值此論文完成之際，謹(jǐn)向?qū)熩w曉丹老師致以崇高的敬意和感謝，老師的指導(dǎo)和教誨，為我以后的工作和學(xué)習(xí)之路指引了方向。(5) 比較4種方法得到的榛蘑多糖得率，超聲波—酶聯(lián)合提取法比其他三種方法有明顯的優(yōu)勢(shì)。最佳工藝條件為A2B3C2D2 ，即料液比1:40，超聲時(shí)間為40min，超聲功率為300W，超聲溫度為60℃，%(3)超聲波—酶法聯(lián)合提取榛蘑多糖實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)結(jié)果，各因素對(duì)多糖得率影響程度大小為：加酶率 酶解溫度 pH 酶解時(shí)間。 根據(jù)超聲波酶法得到的最佳工藝條件中的酶解條件，只進(jìn)行酶解，%，酶解時(shí)間90min，酶解溫度50℃，提取液不再進(jìn)行超聲波處理，經(jīng)抽