【正文】 出現(xiàn)偏差，填寫(xiě)工藝驗(yàn)證偏差處理單，報(bào)驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人審批。 有無(wú)需要改進(jìn)的模擬分裝實(shí)驗(yàn)條件及操作步驟。 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求，是否有偏差，如有，偏差的說(shuō)明是否合理。 驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人對(duì)驗(yàn)證報(bào)告進(jìn)行審批，審核標(biāo)準(zhǔn) . 驗(yàn)證試驗(yàn)是否有遺漏 ,記錄是否完整。擬定再驗(yàn)證周期。 對(duì)于新建的凍干粉針劑生產(chǎn)線在其正式投入生產(chǎn)前必須進(jìn)行培養(yǎng)基無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)，合格后才可投入生產(chǎn)； ，每年至少進(jìn)行 2次培養(yǎng)基無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)； 每個(gè)在凍干粉針劑灌裝生產(chǎn)線上的工作人員，每年至少參加 1 次成功的培養(yǎng)基無(wú)菌模擬 灌裝試驗(yàn)； 當(dāng)生產(chǎn)用設(shè)備、設(shè)施，從事凍干粉針劑灌裝生產(chǎn)操作的人員結(jié)構(gòu)，工藝方法有重大改動(dòng)時(shí)均必須進(jìn)行培養(yǎng)基無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)，以證明其改動(dòng)對(duì)已經(jīng)驗(yàn)證了的凍干粉針劑灌裝工藝過(guò)程不產(chǎn)生不 第 11 頁(yè) 共 11 頁(yè) 文件名稱 凍干粉針劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證方案 文件編號(hào) JBZYZ004A 良影響。 原因調(diào)查結(jié)束后，應(yīng)根據(jù)調(diào)查所確定的或可能發(fā)生的原因制定糾正或改進(jìn)方案并予以實(shí)施。在 調(diào)查結(jié)束并采用相應(yīng)的措施后應(yīng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)。對(duì)微生物污染的樣 品應(yīng)進(jìn) 行鑒別試驗(yàn)，鑒別的內(nèi)容至少應(yīng)包括菌落、細(xì)胞形態(tài)學(xué)及革蘭氏染色特性等。透明、澄清、無(wú)混濁的培養(yǎng)基判為無(wú)微生物生長(zhǎng)；培養(yǎng)基混濁或有懸浮的菌絲或菌落，則需 做進(jìn)一步的微生物生長(zhǎng)檢查，以確定培養(yǎng)基是否真正染菌。在第三天和第七天之間至少觀察培養(yǎng)基灌裝品的微生物生長(zhǎng)情況一次，并且在檢測(cè)期間的最后一天至少再觀察一次，并對(duì)污染瓶中的微生物進(jìn)行總結(jié)其特點(diǎn)。至此供試品已全部制備完成。然后，將托盤按編號(hào)順序依次放到凍干機(jī) 中，冷凍溫度不得低于 3℃ 。備注應(yīng)特別標(biāo)記生產(chǎn)過(guò)程中修機(jī)前后托盤，以便于調(diào)查其污染原因。 ，模擬實(shí)際生產(chǎn)的條件下，將 胰酪胨大豆胨肉湯培養(yǎng)基 灌裝到 7ml抗生素瓶中，裝量 ，蓋塞，然后放到傳送帶上，自動(dòng)傳送至軋蓋間。 ： 5ml： m2大約容納 5人 。 ⑤ 、塵埃粒子監(jiān)測(cè)取樣點(diǎn)：按無(wú)菌灌裝區(qū)面積等分進(jìn)行取樣，每個(gè)測(cè)試點(diǎn)距離 1米，測(cè)試點(diǎn)距內(nèi)墻面 ，另外在灌裝面、膠塞清洗機(jī)膠塞出口處、西林瓶滅菌烘干隧道出口處分別增加一個(gè)測(cè)試點(diǎn)。 ③ 、空氣微生 物數(shù)量監(jiān)測(cè)沉降平皿法取樣點(diǎn)：取樣點(diǎn)見(jiàn)附件《凍干粉針劑培養(yǎng)基無(wú)菌灌裝模擬 試驗(yàn)空氣微生物監(jiān)測(cè)沉降菌平皿取樣點(diǎn)分布圖》。 ② 、無(wú)菌灌裝區(qū)無(wú)菌性檢查取樣點(diǎn)：其取樣重點(diǎn)為無(wú)菌灌裝區(qū)內(nèi)墻壁、門、設(shè)備表面以及操作人員可能接觸的各種表面。另有一個(gè)平皿應(yīng)放置于微生物監(jiān)測(cè)室情況最差的部位。 空氣微生物數(shù)量監(jiān)測(cè) 沉降平皿法 每小時(shí)取樣一次 根據(jù)取樣點(diǎn)分布圖布置培養(yǎng)皿，各取樣點(diǎn)每小時(shí)更換取樣皿進(jìn)行檢測(cè)。 無(wú)菌灌裝區(qū)無(wú)菌性檢查 棉簽 擦拭法 模擬試驗(yàn)開(kāi)始前，試驗(yàn)進(jìn)行一半時(shí)間，試驗(yàn)結(jié)束后，分別根據(jù)取樣點(diǎn)要求對(duì)無(wú)菌區(qū)進(jìn)行取樣監(jiān)測(cè) 根據(jù)取樣點(diǎn)要求取樣，取樣面積固定，每次取樣面積為 25cm2。 ： 監(jiān)測(cè)項(xiàng)目 取樣方法 取樣頻率 取樣要求 操作人員無(wú)菌性檢查 棉簽擦拭法 模擬試驗(yàn)開(kāi)始前，試驗(yàn)進(jìn)行一半時(shí)間，試驗(yàn)結(jié)束后，分別對(duì)操作人員進(jìn)行取樣監(jiān)測(cè) 取樣時(shí)，被取樣的操作人員應(yīng)離開(kāi)灌裝機(jī)，在灌裝室的一角將雙臂平伸，靜止不動(dòng)，取樣人員按棉簽擦拭取樣法在最短時(shí)間內(nèi)取樣。操作工手套每只取 1個(gè)樣，每個(gè)樣用無(wú)菌棉簽擦拭 25cm2面積，全部檢出菌數(shù)應(yīng)﹤ 1CFU，；操作過(guò)程穿的無(wú)菌服每人取兩只前臂及前胸共 3 個(gè)樣，每個(gè)樣用無(wú)菌棉簽擦拭 25cm2面積，每個(gè)取樣點(diǎn)﹤ 5CFU。檢驗(yàn)結(jié)果 應(yīng)符合下表規(guī)定。其取樣方法、取樣點(diǎn)、取樣頻率見(jiàn)取樣計(jì)劃。 在模擬灌裝過(guò)程的前、中、后段，隨機(jī)抽取 100 支， 1/2 接種小于 100CFU 的枯草桿菌芽胞，另外 1/2 接種小于 100CFU 的白色念珠菌，分別在 30～ 35℃和 23～ 28℃條件下各培養(yǎng) 7天， 7 天內(nèi)至少有 50%的接種抗生素瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基中有明顯的接種微生物生長(zhǎng)，并以此作為陽(yáng)性對(duì)照。其中 50 支放于 30～ 35℃ 下培養(yǎng) 14 天，同時(shí)將另外 50支放于 23～ 28℃ 下培養(yǎng) 14天。如果陽(yáng)性對(duì)照生長(zhǎng)良好而挑戰(zhàn)瓶?jī)?nèi)無(wú)生長(zhǎng)，表明無(wú)菌容器系統(tǒng)的完整性測(cè)試通過(guò)。然后將每瓶容器來(lái)回翻轉(zhuǎn)，確保容器的內(nèi)表面和膠塞內(nèi)表面跟培養(yǎng)基完全接觸。浸沒(méi)時(shí)間不應(yīng)少于 4 小時(shí)。使用前菌懸液中挑戰(zhàn)菌濃度不低于每毫升 106CFU。 結(jié)果判斷：空白對(duì)照管應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)，若加菌的培養(yǎng)基管均生長(zhǎng)良好，則該培養(yǎng)基的