【正文】 ④ 用料經(jīng)濟 在。菌絲體生長階段空氣相對濕度應(yīng)控制在60%～70%。③ 環(huán)境條件要適宜 溫度是影響金針菇菌絲體生長發(fā)育的重要因素，最適溫度為23～25℃。還需要一定量的無機鹽類，如KH?PO?、硫酸鎂等。所需要的碳素營養(yǎng)都來自有機碳化合物，以淀粉、葡萄糖最好。碳源不足易使菌絲體衰老和自溶，氮源不足易使菌絲體生長過慢。此外，各種營養(yǎng)物質(zhì)的比例是影響食用菌菌絲生長的重要因素。② 營養(yǎng)協(xié)調(diào) 培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)的濃度及營養(yǎng)物質(zhì)間的濃度比例要適宜。參考文獻[1]. 李春,張利霞,李暉,[J].中國食用菌,1997,17(1):2021.[2]. 李日幫,譚見安,王五一,[J].地理學(xué)報,1999,54(2):158164.[3]. 尹良偉,馬海英,王懷瑾,[J].華北農(nóng)學(xué)報,2008,23(6):8183.[4]. Rotruck Biochemical Role as a Component of perxidase[J].Science,1997(179):588590.[5]. ,2004,11(2):813.[6]. [J].中國食品添加劑,1995,1:5053.[7]. [J].中國食用菌,1997,16(3):3033.[8]. [J].中國食物與營養(yǎng),2005(5):4346.[9]. [J].廣東農(nóng)工商職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報,2009,25(4):7982.[10]. [M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2008:51.[11]. [J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2004,25(9):814.[12]. [J].中國食用菌,1996,16(2):3638.[13]. [M].安徽:安徽大學(xué)出版社,2008:161165.[14]. [J].食用菌,2006,(增刊).2021.[15]. [J].農(nóng)學(xué)學(xué)報,2011,4043.[16]. (自然科學(xué)版),2006,5(2):143145.[17]. Rayman, importance of selenium to human health[J].Lancet,2000,356(9225):233241.附錄培養(yǎng)基配置的原則① 營養(yǎng)適宜 根據(jù)食用菌種類選擇適宜的營養(yǎng)。不斷的提高金針菇菌絲體、子實體的含硒量，是解決硒缺乏的有效途徑。目前，液體菌種越來越受到人們的青睞，它將為科研、為缺硒地區(qū)做出重大貢獻。 在實驗中，液體菌種的富硒能力和生長速度都是非常高的。通過富硒金針菇菌種的選育，可以得知金針菇在液體培養(yǎng)中，生長速度較快，富硒能力較強。 通過配對樣本t檢驗、獨立樣本t檢驗，紫外誘變沒有顯著性的改變菌絲體的生長速度；卻顯著的降低了菌絲體的富硒能力，并且紫外照射時間越長，減弱效應(yīng)越明顯；白色金針菇與金針菇201之間的生長速度以及富硒能力沒有顯著性的差異；液體發(fā)酵所培養(yǎng)的金針菇的富硒能力以及生長速度極顯著的高于其對應(yīng)的固體平板所培養(yǎng)出來的金針菇。然而，固體平板培養(yǎng)金針菇菌絲體的最佳生長及富硒狀態(tài)的硒濃度梯度范圍是在20~35μg/L之間。 金針菇在固體平板富硒培養(yǎng)中，菌絲體在較低的硒濃度梯度下菌落直徑和有機物消耗量比較大，菌絲密度高，菌絲外觀比較粗壯。4 結(jié)論與展望 結(jié)論 金針菇在液體富硒培養(yǎng)液中，發(fā)酵液基本清澈透明，透出淡淡的香味，菌絲球基本呈現(xiàn)球狀、白色。 白色金針菇和金針菇201的生長速率以及富硒能力的獨立樣本t檢驗表23 獨立樣本t檢驗Table 23. Independent samples t test項目菌種樣本數(shù)均值P值生長速度白色金針菇47金針菇20147富硒能力白色金針菇48金針菇20148由表23可知，白色金針菇與金針菇201之間的生長速度以及富硒能力沒有顯著性的差異。其中，對照組與誘變10min之間的p=，即與原種富硒能力相比較，紫外誘變10min后菌種的富硒能力極顯著的降低了。 對白色金針菇和金針菇201及其誘變菌種的相關(guān)參數(shù)的統(tǒng)計分析 紫外誘變對白色金針菇和金針菇201的生長速率以及富硒能力的影響表21 紫外誘變前后菌絲體生長速度的配對樣本t檢驗Table 21. Paired samples t test for UVirradiation on the mycelium growth speed 組別均值自由度P值對1對照組 誘變529對2對照組 誘變1029對3誘變5 誘變1027由表21可知，因此紫外誘變沒有顯著性的改變菌絲體的生長速度。表20金針菇201誘變10min ()在平板富硒培養(yǎng)基中對硒的富集特性Table 20. Seaccumulated characteristics of Flammulina velutipes () in the seleniumenriched plate medium培養(yǎng)液硒濃度(μg/L)菌絲體吸光值菌絲體含硒量(μg/g)硒含量提高倍數(shù)CK5101520253035———40圖14 Curves of the selenium and Consumption of organic matter of mycelium of Flammulina velutipes () in different selenium concentration gradient由表20和圖14可知：在所測的硒濃度范圍內(nèi)，該菌種出現(xiàn)了三個富硒能力的峰值，但以5μg/L含硒量的平板所培養(yǎng)的菌絲體的富硒能力最強。表19金針菇201誘變5min ()在平板富硒培養(yǎng)基中對硒的富集特性Table 19. Seaccumulated characteristics of Flammulina velutipes () in the seleniumenriched plate medium培養(yǎng)液硒濃度(μg/L)菌絲體吸光值菌絲體含硒量(μg/g)硒含量提高倍數(shù)CK 5 10 15 20 25 30 35 40 圖13 Curves of the selenium and Consumption of organic matter of mycelium of Flammulina velutipes () in different selenium concentration gradient由表19和圖13可知：在所測的硒濃度范圍內(nèi)，該菌種出現(xiàn)了三個富硒能力的峰值，但以35μg/L含硒量的平板所培養(yǎng)的菌絲體的富硒能力最強。表17 白色金針菇誘變10min()在平板富硒培養(yǎng)基中對硒的富集特性Table 17. Seaccumulated characteristics of white Flammulina velutipes () in the seleniumenriched plate medium培養(yǎng)液硒濃度(μg/L)菌絲體吸光值菌絲體含硒量(μg/g)硒含量提高倍數(shù)CK510152025303540圖11 Curves of the selenium and Consumption of organic matter of mycelium of white Flammulina velutipes ()in different selenium concentration gradient 表18金針菇201原種()在平板富硒培養(yǎng)基中對硒的富集特性Table 18. Seaccumulated characteristics of Flammulina velutipes 201 in the seleniumenriched plate medium培養(yǎng)液硒濃度(μg/L)菌絲體吸光值菌絲體含硒量(μg/g)硒含量提高倍數(shù)CK510152025303540圖12金針菇201原種菌絲體含硒量和有機物消耗量與硒濃度梯度的曲線圖 Curves of the selenium and Consumption of organic matter of mycelium of Flammulina velutipes 201 in different selenium concentration gradient由表18和圖12可知：在所測的硒濃度范圍內(nèi)，該菌種出現(xiàn)了三個富硒能力的峰值，但以30μg/L含硒量的平板所培養(yǎng)的菌絲體的富硒能力最強。因此，白誘10在富硒CM固體平板含硒量為35μg/L的時候，富硒能力最強，；在固體平板含硒量為20μg/L的時候，其生長速度最快。因此適宜濃度的固體平板硒含量有助于該菌種的富硒能力的提高，硒濃度過高以及過低均會降低其富硒能力。表16 白色金針菇誘變5min()在平板富硒培養(yǎng)基中對硒的富集特性Table 16. Seaccumulated characteristics of white Flammulina velutipes () in the seleniumenriched plate medium培養(yǎng)液硒濃度(μg/L)菌絲體吸光值菌絲體含硒量(μg/g)硒含量提高倍數(shù)CK510152025303540圖10白色金針菇誘變5min菌絲體含硒量和有機物消耗量與硒濃度梯度的曲線圖 Curves of the selenium and Consumption of organic matter of mycelium of white Flammulina velutipes ()in different selenium concentration gradient 由表17和圖11可知，白誘10在富硒CM固體平板上具有較強的富硒能力。因此，白色金針菇誘變5min菌種在富硒CM固體平板含硒量為25μg/L的時候，富硒能力最強，；在固體平板含硒量為5μg/L的時候，其有機物消耗量最大，生長速度最快。在有機物消耗方面，出現(xiàn)了兩個峰值，分別為含硒量5和20μg/L的固體平板。平板硒含量過高以及過低均會阻礙該菌絲體的富硒能力。平板中有機物消耗量與菌落直徑有著較為一定的正相關(guān)關(guān)系。下同。綜合考慮菌種生長速率、菌絲體富硒能力，因而較好的培養(yǎng)方案為配置含硒量為20μg/L的培養(yǎng)基培養(yǎng)白色金針菇原種菌絲體。其中在含硒量5μg/L的固體平板上培養(yǎng)的菌絲體的有機物消耗量值明顯高于含硒量25μg/L的固體平板。可見適宜濃度的固體平板硒含量有助于白色金針菇原種的生長。平板中有機物消耗量與菌落直徑有著較為明顯的正相關(guān)關(guān)系?？梢娬T變10min后，菌絲生長對高硒濃度顯得比較敏感。金針菇201誘變10min菌種，在空白對照組中，菌落生長最快，菌絲最濃密，菌絲外觀粗壯。但是在適宜硒濃度下菌絲體的有機物消耗量出現(xiàn)峰值。在低硒濃度時，菌絲直徑相對較高，可見高濃度硒阻礙了菌絲直徑的生長。由表14可知：金針菇201原種的菌絲體在較低的硒濃度梯度下生長非常好，菌落直徑和有機物消耗量比較大，菌絲密度高，菌絲外觀比較粗壯?？梢娬T變10min后，菌絲生長對硒濃度顯得比較敏感。白色金針菇誘變10min菌種，在10μg/L的硒濃度時，菌落生長較快，菌絲最濃密，菌絲外觀粗壯。其中在5μg/L的硒濃度時，該菌種生長速度最快，菌絲密度最高，菌絲外觀粗壯。在整個所測的硒濃度梯度范圍內(nèi)，低濃度的硒能夠促進菌絲直徑的增加。由表13可知：白色金針菇原種的菌絲體在較低的硒濃度梯度下菌落直徑和有機物消耗量比較大，菌絲密度高，菌絲外觀比較粗壯。表12 目鏡測微尺的校正Table 12. Calibration of eyepiece micrometer接物鏡倍數(shù)目鏡測微尺格數(shù)鏡臺測微尺格數(shù)目鏡測微尺每格代表的長度(μm)480100108050408010注：，本次實驗我使用40物鏡測量菌絲直徑。使用該染色液可以提高觀察效果，其中石炭酸可以起到殺菌的作用，乳酸是用來保水的，棉蘭是染色的。針對平板培養(yǎng)的金針菇菌種，測量其菌絲直徑，本實驗采用鏡臺測微尺校正顯微鏡上的目鏡測微尺，具體結(jié)果見表12。通過對上述菌株的生長狀況進行了詳細的記錄與觀察，得到不同富硒濃度對金針菇菌絲體的影響的結(jié)論。通過測定金針菇菌各個菌種菌絲體的菌落直徑、菌絲密度、有機物消耗量、菌絲外觀及菌絲直徑范圍等特性，從而反映金針菇各個菌種在平板上富硒培養(yǎng)的不同特性。實驗中，針對金針菇20白色金針菇及其紫外誘變菌種進行了條件優(yōu)化的平板富硒培養(yǎng)。不同的生物對硒的耐受能力是不同的。 金針菇在平板富硒培養(yǎng)中的特性金針菇菌絲在平板上培養(yǎng)、干燥后，使用紫外分光光度法測定其單位質(zhì)量下