【正文】 （二）血片制作和染色質(zhì)量規(guī)范見表51。（2）染色合格率應(yīng)在85%以上。血片制作和染色合格率要求分別以血片制作、染色和清潔度的好、中，合并計算合格率。中：薄血膜中，厚血膜好或中。鏡檢時，應(yīng)當(dāng)記錄下所觀察到的各種瘧原蟲，不要籠統(tǒng)地記作混合感染。式中N為需要檢查的紅細(xì)胞數(shù)，P為1萬個紅細(xì)胞中的瘧原蟲數(shù)，I為血樣單位(以1萬個紅細(xì)胞計算）?？砂垂絅=(IP)247。鏡檢薄血膜，算出紅細(xì)胞的瘧原蟲感染率，然后按下式算出瘧原蟲密度。（三）薄血膜的瘧原蟲計數(shù)在涂制薄血膜的同時，計數(shù)每181。 白細(xì)胞數(shù) 每μl血中白細(xì)胞數(shù) = 瘧原蟲數(shù)/μl血。用下式算出瘧原蟲密度。l血中白細(xì)胞數(shù)。國內(nèi)常用此方法將密度分為6級：全厚血膜查見瘧原蟲數(shù)在10個以內(nèi)，記錄實(shí)際數(shù)字；全厚血膜查見瘧原蟲數(shù)在10個以上，但平均每個視野不到1個蟲，記錄“少”；100個視野中查見的瘧原蟲數(shù)平均每個視野1~5個，記錄“＋”；100個視野中查見的瘧原蟲數(shù)平均每個視野6~10個，記錄“++”；100個視野中查見的瘧原蟲數(shù)平均每個視野11~100個，記錄“+++ ”；100個視野中查見的瘧原蟲數(shù)平均每個視野100個以上，記錄“++++ ”。 （一）半定量計數(shù)用厚血膜每個視野中所觀察到瘧原蟲的平均數(shù)可粗略地估計出瘧原蟲密度。圖58 各種影響診斷的矯作物六、瘧原蟲計數(shù)為了了解病人的嚴(yán)重程度、病人是否需要輸血及抗瘧藥的效果測定瘧原蟲密度是十分必要的。（三）疑似瘧原蟲胞質(zhì) 網(wǎng)織紅細(xì)胞殘留物和白細(xì)胞殘留物通常為藍(lán)色，與瘧原蟲的胞質(zhì)相似，如與某些紅點(diǎn)結(jié)合在一起，易被誤認(rèn)為是瘧原蟲。但球菌形體較大，邊緣光滑，常多見聚集一處，分布較廣。轉(zhuǎn)動顯微鏡微調(diào)時，可見其浮于紅細(xì)胞上，與瘧原蟲不在一個平面。間日瘧=；惡性瘧=；三日瘧=；卵形瘧=；環(huán)形體=R（Ring form）；大滋養(yǎng)體=T(trophozoite)；裂殖體=S(Schizont)；配子體=G(Gametocytr)?？赐暄?，若為陽性，應(yīng)立即按血片編號登記原蟲的種、期，以防差錯。有時因染色較淺，不見原蟲的核和胞漿，只見到典型的瘧色素可斷定。（二）鑒別要點(diǎn)在厚膜中必須根據(jù)瘧原蟲的核、胞漿、瘧色素三個條件鑒別是否是瘧原蟲及何種蟲種。鏡檢時應(yīng)從厚血膜上開始。四、厚血膜鏡檢厚血膜由于細(xì)胞重迭，干燥緩慢，以致蟲體皺縮，空泡消失，胞質(zhì)變形，加之紅細(xì)胞被溶解，所以蟲種和蟲體的鑒別比薄血膜困難，但用血量多，瘧原蟲鏡下密度高，因此檢出率，常用于瘧原蟲檢出。核較大，相對的難見到胞漿，核染深紅色或紫紅色，四周胞漿圍繞，染藍(lán)色，呈卵園形，邊緣光滑。在吉氏染色中多見顯淡紅色或淡紫色，中間顆粒為紫紅色，形狀近似石榴子，且邊緣不甚光滑。在厚血膜上則體形較小，胞漿收縮均勻，不染色帶明顯，瘧色素分布規(guī)則則沿邊分布。胞漿邊緣整齊，無空泡。大配子體：大小幾乎充滿真?zhèn)€紅細(xì)胞。胞漿邊緣不整齊，有時有空泡。（三）大滋養(yǎng)體與大配子體的形態(tài)鑒別大滋養(yǎng)體：大小一般不超過被寄生的紅細(xì)胞的3/4。否則在形態(tài)鑒別上會混淆弄錯。（一）各種瘧原蟲各期形態(tài)鑒別被寄生的紅細(xì)胞形態(tài)大小及染色深淺度（是否褪色）；胞漿色彩及其濃淡，結(jié)構(gòu)疏密，有否空泡及不著色帶，體積大?。簧匕唿c(diǎn)（薛氏點(diǎn)、茂氏點(diǎn)）；查其他各期形態(tài)是否存在作參考；色素顆粒的形態(tài)、顏色、排列。血小板中央部分有著藍(lán)紫色的顆粒，周邊部呈均質(zhì)淺藍(lán)色（圖5－7）。血小板體積甚小，直徑2～4μm，呈雙凸扁盤狀；當(dāng)受到機(jī)械或化學(xué)刺激時，則伸出突起，呈不規(guī)則形。圖56單核細(xì)胞（三）血小板：血小板或稱血栓細(xì)胞, 正常數(shù)值為10萬～40萬／μl。胞質(zhì)較多，呈弱嗜堿性，含有許多細(xì)小的嗜天青顆粒，使胞質(zhì)染成深淺不勻的灰藍(lán)色。胞核形態(tài)多樣，呈卵圓形、腎形、馬蹄形或不規(guī)則形等。它是白細(xì)胞中體積最大的細(xì)胞。中性粒細(xì)胞在血液中停留約6～7小時，在組織中存活約1～3天。中性粒細(xì)胞的胞質(zhì)染成粉紅色，含有許多細(xì)小的淡紫色及淡紅色顆粒，顆?？煞譃槭忍烨囝w粒和特殊顆粒兩種。核的形態(tài)多樣，有的呈臘腸狀，稱桿狀核；有的呈分葉狀，葉間有細(xì)絲相連，稱分葉核。圖54 嗜酸性粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞：中性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的50％－70％，是白細(xì)胞中數(shù)量最多的一種。在過敏性疾病或寄生蟲病時，血液中嗜酸性粒細(xì)胞增多。嗜酸性粒細(xì)胞還能借助抗體與某些寄生蟲表面結(jié)合，釋放顆粒內(nèi)物質(zhì)，殺滅寄生蟲。嗜酸性粒細(xì)胞也能作變形運(yùn)動，并具有趨化性。細(xì)胞呈球形，直徑10～15μm，核常為2－3葉，呈眼鏡狀，深紫色，胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大（～）、均勻、略帶折光性的嗜酸性顆粒，染成桔紅色（圖5－4）。胞質(zhì)內(nèi)含有嗜堿性顆粒，大小不等，分布不均，染成藍(lán)紫色，可覆蓋在核上（圖5－3）。細(xì)胞呈球形，直徑10－12μm。少數(shù)大、中淋巴細(xì)胞的核呈腎形，胞質(zhì)內(nèi)含有較多的大嗜天青顆粒，稱為大顆粒淋巴細(xì)胞，見圖52。小淋巴細(xì)胞數(shù)量最多，細(xì)胞核圓形，一側(cè)常有小凹陷，染色質(zhì)致密呈塊狀，著色深，核占細(xì)胞的大部，胞質(zhì)很少，在核周成一窄緣，嗜堿性，染成蔚藍(lán)色，含少量嗜天青顆粒。淋巴細(xì)胞：占白細(xì)胞總數(shù)的20％～30％，圓形或橢圓形，大小不等。這種形狀可以最大限度的從周圍攝取氧氣。血細(xì)胞分類和計數(shù)的正常值如下：　　 紅細(xì)胞350萬～550萬個/μl　 中性粒細(xì)胞50％－70％　　　　　　　　　　　　有粒白細(xì)胞　?。ィ?％　　　　　　 白細(xì)胞 （粒細(xì)胞） 嗜堿性粒細(xì)胞0～1％血細(xì)胞　　4000～10000個/μl 淋巴細(xì)胞20％～30％無粒白細(xì)胞　血小板 單核細(xì)胞3％～8％10萬～40萬個/μl　 　　 二、血液中各種正常細(xì)胞形態(tài)（一）紅細(xì)胞：直徑通常是6μm～8μm；形狀：人類的紅細(xì)胞是雙面凹的圓餅狀。血細(xì)胞約占血液容積的45%，包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板。一、血液血液由血漿和血細(xì)胞組成。第五章 瘧原蟲鏡檢技術(shù)瘧原蟲鏡檢時，首先須對正常薄厚血膜中各種細(xì)胞的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和染色性質(zhì)加以識別。有時候僅僅是一些片子的染色不理想，這種情況下，可以重新涂片。如果你染色的質(zhì)量不高應(yīng)該做些什么？首先，檢查每一個技術(shù)步驟是否合理如果血涂片、固定、稀釋染液，清洗染液器具以及儲存各項(xiàng)操作都符合要求，你依然得不到合格的染色后的血片。當(dāng)染色太藍(lán)，可用pH較低的緩沖水沖洗；如染色太紅，則用pH較高的緩沖液沖洗；如染色太深，可延長沖洗時間，予以校正。所以染色時間長短要隨著染液的質(zhì)量、新舊、濃度及溫度而決定。染色時間：染色時間長，染色效果好，反之則差。染液的稀釋濃度：染液濃度高，著色快，各種細(xì)胞著色深，薛氏點(diǎn)、茂氏點(diǎn)等粗大顯著；染液濃度低，著色慢，但各種細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)著色均勻、清晰，如環(huán)狀體、子孢子及瘧色素等顏色分明，但薛氏點(diǎn)、茂氏點(diǎn)不夠清楚。染液放置時間稍長，染色力逐漸增加，故應(yīng)在染色前1~2周先將染液制備好。新配制的染液應(yīng)先試染，以酸堿度最適宜的水稀釋，觀察染色是否理想，否則需重新制備染液。（四）影響血膜染色質(zhì)量的因素血片染色好壞，除與玻片的清潔程度、血膜制作的質(zhì)量和染色技術(shù)等有關(guān)外，還與下列因素有關(guān):染劑和溶劑的質(zhì)量：染料、甲醇和甘油如不純，常使配成的染液偏酸或偏堿，影響染色效果。取1ml蒸餾水加入1滴吉氏染液，混勻后滴在厚、薄血膜上，染色1~4小時（根據(jù)血片存放時間而定)。當(dāng)同一張玻片上厚血膜與薄血膜同時染色時，應(yīng)按照厚血膜的染色方法，以免厚血膜過染而鏡檢困難。成批染色時，將血膜朝一個方向插入染色缸中，或每對玻片血膜朝外，背靠背插入染色缸中，倒入新配的2％吉氏染液(2ml吉氏原液同98ml蒸餾水緩沖液混勻），浸沒厚薄血膜，染色30分鐘后，向染色缸中注入緩沖液或自來水，直到溢出，除掉染液表面上的浮渣，將染色缸中殘余的染液傾出，加入新水，反復(fù)沖洗2~3次，取出玻片，將血膜朝下插在晾片板上干燥。（