氯霉素類(lèi)藥物在獸醫(yī)臨床上應(yīng)用及其殘留研究進(jìn)展(參考版)
2025-05-29 12:12本頁(yè)面
【正文】 一般來(lái)講， LC/MS 技術(shù)確證氯霉素比 G C / M S 技術(shù)確證迅速，但由于 GC/MS 技術(shù)的靈敏度高 ，可利用的碎片離子多，所以目前確證牛奶中氯霉素類(lèi)殘留主要用 G C /M S 技術(shù)。在氯霉素殘留確認(rèn)工作中， GC/MS 和LC/MS/MS 是首選的方法。 酶免疫測(cè)定法 非常適合對(duì)氯霉素殘留篩選的需要，它能在短短的幾個(gè)小時(shí)檢測(cè)幾十到上百個(gè)試樣，也不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備，并有 特異性強(qiáng)、靈敏度高、試樣預(yù)處理簡(jiǎn)單 等優(yōu)點(diǎn)，它在 現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控和基層 實(shí)際檢測(cè)上有著廣闊的應(yīng)用前景。氣相色譜／選擇性離子監(jiān)測(cè)／質(zhì)譜性 (GC／SIM／ NS)分析 CAP殘留，靈敏度更高，可達(dá)到 pg ?液 — 質(zhì)聯(lián)用法 LC／ MS是一種新的確證方法，不需要衍生化處理，操作簡(jiǎn)便，靈敏度高。 ?樣品制備不 需要衍生化過(guò)程 ，操作簡(jiǎn)單，但UVD選擇性較差，具有紫外吸收的雜質(zhì)都會(huì)產(chǎn)生干擾 ，因此 HPLC／ UVD的檢測(cè)限比 GC高，一般在 5ug／ kg，樣品前處理必須排除具有紫外吸收的內(nèi)源性雜質(zhì)的干擾 。 GC 是定量測(cè)定氯霉素殘留較為經(jīng)典成熟的方法，專(zhuān)一性強(qiáng)，靈敏可靠，檢測(cè)限低（ 小于 1ug/kg),但由于受到氯霉素?fù)]發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制 ,需要衍生化程序 ,比較 繁瑣 ,一定程度上限制了 GC 的應(yīng)用。目前國(guó)內(nèi)、外研制的 氯霉素 ELISA 檢測(cè)試劑盒 ，廣泛用于氯霉素的檢測(cè)。 ELISA避免了 RIA存在的 穩(wěn)定性問(wèn)題 ，更加簡(jiǎn)便、靈敏，檢測(cè)限達(dá)到 pg級(jí)，且 同時(shí)可檢測(cè)多數(shù)樣品 ，是十分理想的快速篩選手段， 缺點(diǎn)在于出現(xiàn)假陽(yáng)性的概率較大 ，易引起誤判。要使半抗原性物質(zhì)具有免疫原性，就需使其與大分子載體物質(zhì)（蛋白質(zhì)）相結(jié)合制備人工抗原，而后將其作為抗原進(jìn)行使用，動(dòng)物體內(nèi)即可產(chǎn)生相應(yīng)特異性的抗氯霉素的抗體。 ? ELISA是基于抗原和抗體反應(yīng)而建立的。 免疫分析法 ?氯霉素免疫測(cè)定法包括 放射免疫測(cè)定法（ RIA）、 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法 （ ELISA) 。 ? CPM 是將處理后的樣品注入牛津杯，與含菌液的檢測(cè)平板貼合，培養(yǎng)后根據(jù) 抑菌圈直徑的大小 來(lái)判定結(jié)果， CPM 的檢出限為 ～ 2mg／ kg，比 STOP靈敏度高，并可在樣品的處理中加入其他抗生素以 消除干擾影響 。常用方法有 棉簽法 (Swab Test On Premises，STOP)和 杯碟法 (Cylinder Plate Method，CPM)。 篩選法 ?主要包括以氯霉素抑菌作用為基礎(chǔ)的 微生物學(xué)法 ，以氯霉素抗原抗體特異性免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)的 免疫學(xué)法 ，以氯霉素衍生偶合反應(yīng)為基礎(chǔ)的 化學(xué)顯色法 ， 薄層色譜法 等（ Thin Layer Chromatographic Method,TLC)其中微生物學(xué)法和免疫學(xué)法較為常用 。歐盟由原來(lái)的 10μg/kg改為 1μg/kg，繼而又降至 ，比原標(biāo)準(zhǔn)要求提高了 100倍；美國(guó) FDA規(guī)定的檢出限也由原來(lái)的 5μg/kg降為 ，且目前正在研究應(yīng)用更為靈敏的方法，可使檢出限值達(dá) 。 2377/90 Updated on ? List of pharmacologically active substances for which maximum residue limits have been fixed). Florfenicol ? Bovine 200 μg/kg Muscle 3000 μg/kg Liver 300 μg/kg Kidney ? Porcine 300 μg/kg Muscle 500 μg/kg Skin + fat 2022 μg/kg Liver 500 μg/kg Kidney ? Chicken 100 μg/kg Muscle 200 μg/kg Skin + fat 2500 μg/kg Liver 750 μg/kg Kidney Not for use in animals from which eggs are produced for human Thiamphenicol ? Bovine 50 μg/kg Muscle
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