水樣的微生物檢測(cè)ppt課件(參考版)
2025-05-15 08:45本頁(yè)面
【正文】 記錄有藍(lán)色熒光產(chǎn)生的菌落數(shù)并報(bào)告，格式同 總大腸菌群濾膜法 。 ? 檢驗(yàn)步驟 ? 接種： 總大腸菌群濾膜上有典型生長(zhǎng)菌落 將濾膜轉(zhuǎn)移至 NA－ MUG上，細(xì)菌生長(zhǎng)面向上，37℃ 培養(yǎng) 4h。 ? 計(jì)算被證實(shí)的耐熱大腸菌群數(shù)，報(bào)告每 100mL水樣中的耐熱大腸菌群數(shù)（ CFU/100mL） ? ＝ 100 耐熱大腸菌群菌落數(shù)（ CFU/100mL） 所計(jì)的總大腸菌群菌落數(shù) 過(guò)濾的水樣體積 ? 大腸埃希氏菌 ? 大腸埃希氏菌多管發(fā)酵法是指多管發(fā)酵法總大腸菌群陽(yáng)性，在含有熒光底物的培養(yǎng)基上 ℃ 培養(yǎng) 24h產(chǎn)生 β葡萄糖醛酸酶，分解熒光底物釋放出熒光產(chǎn)物，使培養(yǎng)基在紫外光下產(chǎn)生特征性熒光的細(xì)菌，以此來(lái)檢測(cè)水中大腸埃希氏菌的方法。 ? 對(duì)可疑菌落轉(zhuǎn)種 EC培養(yǎng)基， ℃ 培養(yǎng) 24h177。 2h。 總大腸菌群的檢驗(yàn) 耐熱大腸菌群 ? 耐熱大腸菌群 ? 用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群分開(kāi)，在℃ 仍然能生長(zhǎng)的大腸菌群，稱(chēng)為耐熱大腸菌群。 ? 計(jì)算濾膜上生長(zhǎng)的總大腸菌群數(shù)，報(bào)告每 100mL水樣中的總大腸菌群數(shù)（ CFU/100mL） ? ＝ 100 總大腸菌群菌落數(shù)（ CFU/100mL） 數(shù)出的總大腸菌群菌落數(shù) 過(guò)濾的水樣體積 ? 方法：酶底物法 ? 范圍 本法可在 24h判斷水樣中是否含有總大腸菌群及含有的總大腸菌群的最可能數(shù) （ MPN） 。 2h 結(jié)果觀(guān)察與報(bào)告 ： ? 深紫黑色 ， 具有金屬光澤的菌落 ? 紫黑色 ， 不帶或略帶金屬光澤的菌落 ? 淡紫紅色 ， 中心較深的菌落 作革蘭氏染色 ， 鏡檢 。 ? 2 濾器滅菌：用點(diǎn)燃的酒精棉球滅菌，也可用蒸汽滅菌， 121℃ ， 20min。 總大腸菌群的檢驗(yàn) ? 方法： 濾膜法 ? 總大腸菌群濾膜法： 是指用孔徑為 m的微孔濾膜過(guò)濾水樣 ，將濾膜貼在添加乳糖的選擇性培養(yǎng)基上 37℃培養(yǎng) 24h， 能形成特征菌落的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌以檢測(cè)水中總大腸菌群的方法 。 2h，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者，證實(shí)有總大腸菌群存在。 總大腸菌群的檢驗(yàn) ? 證實(shí)試驗(yàn)： ? 經(jīng)革蘭氏染色為陰性無(wú)芽孢桿菌，同時(shí)接種乳糖蛋白胨培養(yǎng)液， 36℃ 177。 4 分離培養(yǎng) 將產(chǎn)酸 、 產(chǎn)氣的發(fā)酵管 ， 分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上 ， 于 36177。 2h， 如所有乳糖蛋白胨培養(yǎng)管都不產(chǎn)氣 、 產(chǎn)酸 ， 則可報(bào)告為總大腸菌群陰性 。 總大腸菌群的檢驗(yàn) 3 將接種管置 36177。 總大腸菌群的檢驗(yàn) ? 檢驗(yàn)步驟 乳糖發(fā)酵試驗(yàn) 2 檢驗(yàn) 水源水時(shí) ，如污染較嚴(yán)重，應(yīng)加大稀釋度，可接種 1， ， ， ，每個(gè)稀釋度接種 5管，每個(gè)水樣接種 15管，接種 1mL以下水樣時(shí)，必須作 10倍遞增稀釋后，取 1mL接種。 注入到 10mL單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中 ， 每一稀釋度共接種 5管 。 細(xì)菌總數(shù)的檢驗(yàn) ? 不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法 不同稀釋 度的平均菌落數(shù) 實(shí)例 101 102 103 兩個(gè)稀釋度 菌落數(shù)之比 菌落總數(shù) ( C
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